ГОСТ Р 53985-2010

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                                         ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                                                    НАЦИОНАЛЬНЫЙ
                                                                                      ГОСТР
                                                       СТАНДАРТ
                                                     РОССИЙСКОЙ                       53985  -



                                                      Ф Е Д Е Р А Ц И И               2010




                                           КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

                                  Метод обнаружения и подсчета бактерий группы
                                   кишечных палочек (колиформных бактерий).
                                        Метод наиболее вероятного числа


                                                     Издание официальное




                                                                 Москва
                                                           С та м д ар ти н ф о рм
                                                                   2011




техническое освидетельствование

ГОСТ Р 53985— 2010


                                           Предисловие

     Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от
27 декабря 2002 г. N» 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных
стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0—2004 «Стандартизация в Российской Федерации.
Основные положения»

     Сведения о стандарте

      1 ПОДГОТОВЛЕН ОАО «Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации»
(ОАО «ВНИИС») на основе собственного аутентичного перевода на русский язык стандарта, указанного
в пункте 4

     2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропромыш­
ленной продукции на безопасность»

     3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому
регулированию и метрологии от 29 ноября 2010 г. No 556-ст

     4 В настоящем стандарте учтены основные положения международного стандарта:
     ИСО 4831:2006 «Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный
метод обнаружения и подсчета колиформных бактерий. Методика наиболее вероятного числа
(ISO 4831:2006 «Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection and
enumeration of conforms — Most probable number technique»)

     5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ




     Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом
информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — ввжоме-
сячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случав пересмотра
(замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано
в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответству­
ющая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего
пользования - на официалыюм сайте Федералыюго агентства по техническому регулированию и
метрологии в сети Интернет




                                                                             © Стандартинформ. 2011

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и рас­
пространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии

ГОСТ Р 53985—2010


Н А Ц И О Н А Л Ь Н Ы Й                      С Т А Н Д А Р Т            Р О С С И Й С К О Й               Ф Е Д Е Р А Ц И И




                                                   КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫ Х

 Метод обнаружения и подсчета бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий).
                            Метод наиболее вероятного числа

                                                          A nim al feeding stuffs.
                      M ethod fo r the d etection and e num eration o f conform s. M ost probable num ber technique



                                                                                               Д ата в в е д е н и я — 2012— 01— 01



        1 Область применения

     Настоящий стандарт распространяется на корма для животных и устанавливает метод обнаруже­
ния и подсчета наиболее вероятного числа (НВЧ) бактерий группы кишечных палочек (колиформных
бактерий).
     Метод наиболее вероятного числа колиформных бактерий предназначен для кормов, содержащих
искомое количество микроорганизмов в диапазоне от 1 до 100 на миллилитр или грамм анализируемой
пробы.

        2 Нормативные ссылки

     В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ Р ИСО 7218— 2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие тре­
бования и рекомендации по микробиологическим исследованиям
     ГОСТ Р ИСО 11133-1— 2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руково­
дящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 1. Общие руководящие
указания по обеспечению качества приготовления культурных сред в лаборатории
     ГОСТ Р ИСО 11133-2—2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руково­
дящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть2: Практические руководя­
щие указания по эксплуатационным испытаниям культуральных сред
     ГОСТ Р 51426— 99 (ИСО 6887— 83) Микробиология. Корма, комбикорма, комбинированное сырье.
Общее руководство по приготовлению разведений для микробиологических исследований
     ГОСТ Р 52816— 2007 Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий
группы кишечных палочек (колиформных бактерий)
     ГОСТ 13496.0— 80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб
     ГОСТ 25311— 82 Мука кормовая животного происхождения. Методы бактериологического
анализа
     ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1— 81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные.
Часть 1. Общие требования

        П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящ им стандартом целесообразно п роверить д ействие с сы л о ч­
н ы х стандартов в инф орм ационной систем е общ его пользования — на оф ициальном сайте Ф едерального
агентства по техническом у регулированию и метрологии в сети И нтернет или по еж егодно и здаваем ом у указателю
« Н ациональны е с та н д а р ты *, которы й опубликован по состоянию на 1 января текущ его года, и по соответствую щ им
еж ем есячно издаваем ы м инф орм ационны м указателям , опубликованны м в текущ ем году. Если ссы лочны й с та н ­
дарт зам енен (изм енен), то при пользовании настоящ им стандартом следует руководствоваться заменяю щ им
(и зм е н е н н ы м С та н д а р то м . Если ссы лочны й стандарт отм енен без зам ены , то полож ение, в котором дана ссы лка на
него, прим еняется в ч асти, не затрагиваю щ ей эту ссылку.


И зд ан и е о ф и ц и а л ь н о е

                                                                                                                                  1

ГОСТ Р 53985— 2010


     3 Термины и определения

     В настоящем стандарте применены термины и определения по ГОСТ Р 52816.


     4 Обнаружение колиформных бактерий и определение количества
     методом наиболее вероятного числа (НВЧ)

     Сущность метода — по ГОСТ Р 52816.
     4.1 Метод обнаружения колиформных бактерий
      4.1.1 В пробирку с селективно обогащенной питательной средой вносят около 1 г корма, пробирку
помещают в термостат для инкубирования при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) в тече­
ние 24 ч или 48 ч.
      4.1.2 Пробирку, после выращивания по 4.1.1. проверяют на наличие помутнения и/или образова­
ния газа. Затем из пробирки, в которой установлено наличие помутнения и/или образования газа, вносят
в другую пробирку с селективно обогащенной питательной средой около 1 см3 суспензии и проводят
повторное выращивание микроорганизмов при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) в тече­
ние 24 ч или 48 ч.
      4.1.3 Присутствие колиформных бактерий подтверждают в случае, если помутнение и/или обра­
зование газа замечено после осмотра пробирки, полученной по 4.1.2
     4.2   Метод НВЧ — определение количества колиформных бактерий
      4.2.1 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой двойной концентра­
ции вводят определенное количество анализируемой пробы, если исходный корм является жидким, или
определенное количество исходной суспензии в случае испытания других кормов.
      4.2.2 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой нормальной концен­
трации вводят определенное количество анализируемой пробы, если исходный корм является жидким,
или определенное количество исходной суспензии в случае испытания других кормов.
      Затем, в такихже условиях, в дополнительные пробирки с питательной средой нормальной крепос­
ти вводят десятичные разбавления анализируемой пробы или исходной суспензии.
      4.2.3 Пробирки с посевами, содержащие селективно обогащенную питательную среду двойной
концентрации, выращивают при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) в течение 24 ч, а про­
бирки, содержащие селективно обогащенную питательную среду нормальной концентрации, инкубиру­
ют 24 ч или 48 ч и после этого пробирки осматривают и отмечают образование пузырьков газа или
помутнение, предотвращающее обнаружение формирования газа.
      4.2.4 В ряд пробирок с подтверждающей питательной средой вводят суспензию культур из проби­
рок с селективно обогащенной питательной средой двойной концентрации и суспензию культур из про­
бирок с селективно обогащенной питательной средой нормальной концентрации, в которых было
замечено образование пузырьков газа или помутнение.
      4.2.5 Посевы в пробирках по 4.2.4 выращивают при температуре 30 °С или 37 °С в течение 24 ч или
48 ч, и эти пробирки исследуют на формирование газа.
      4.2.6 Наиболее вероятное число колиформных бактерий в 1 см3 или 1 гпробы корма (НВЧ) рассчи­
тывают исходя из числа из пробирок по 4.2.5. показывающих формирование газа. В этом случае исполь­
зуют таблицу установления наиболее вероятного числа.

     5 Среды выращивания бактерий и разбавители

     5.1 Общ ие положения
     Качество подготовки, изготовления и оценки эффективности питательных сред для выращивания
бактерий — по ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ Р И С 0 11133-1 и ГОСТ Р ИСО 11133-2.
     5.2 Селективно обогащенная питательная среда: LST (Триптоза лаурилсульфата)
     5.2.1 Состав приведен в таблице 1



2