ГОСТ Р 51196-98

ГОСТР 51196—98
(ИСО 8069—86)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОЛОКО СУХОЕ

Метод определения молочной кислоты и лактатов

Издание официальное

Москва
= Стандартинформ
2009

ГОСТ P 51196—98

Предисловие
| РАЗРАБОТАН Московской государственной академией пищевых производств

ВНЕСЕН Техническим комитетом по станлартизации ТК 335 «Методы испытаний агропро-
мышленной продукции на безопасность»

2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 28 августа
1998 г. № 334

3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст международного стандарта
ИСО 8069—86 «Сухое молоко. Определение содержания молочной кислоты и лактатов. Фермента-

тивный метод» с дополнительными требованиями, отражающими потребности экономики страны
(2,307.1)

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июль 2009 г.

© ИПК Издательство стандартов, 1998
© СТАНДАРТИНФОРМ, 2009

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техни-
ческому регулированию и метрологии

и

ГОСТ Р 51196—98
(ИСО 8069—86)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОЛОКО СУХОЕ
Метод определения молочной кислоты и лактатов

Dried milk.
Method for determination of lactic acid and lactates

Дата введения 2000—01—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на сухое молоко всех видов и устанавливает метод
определения молочной кислоты и ее солей — лактатов.

2 Нормативные ссылки

ГОСТ 26809—86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подго-
товки проб к анализу

3 Определение

Массовая доля молочной кислоты и лактатов в сухом молоке, определенная в соответствии с настоя-
щим стандартом и выраженная в граммах молочной кислоты на 100 г сухого обезжиренного вещества.

4 Сущность метода

Восстанавливают пробу сухого молока в теплой воле, осаждают жиры и белки и фильтруют
пробу. Полученный фильтрат обрабатывают ферментами и биохимическими реагентами, добавляе-
мыми одновременно, но действующими последовательно:

- 1-лактатдегидрогеназа (1.-ЛДГ) и О-лактатдегидрогеназа ({О-ЛДГ) в присутствии никотина-
мидадениндинуклеотила (НАД) окисляют лактат до пирувата, восстанавливая НАД до НАДН:

О-ЛДГ
L-Aar

|-лактат/О-лактат+НАД*

> НАДН+пируват+Н-;

- глутаматпируваттрансфераза (ГПТ) в присутствии L-rayramata преобразует пируват в L-ana-
нин и (--глутамат в альфа-кетоглутарат:

пируват+ L-raytamar - ------ > 1--аланин+ 2-оксоглутарат.

Измеряют массовую долю образовавшегося НАДН, эквивалентную массовой доле молочной
кислоты и лактатов в пробе, на спектрофотометре при длине волны 340 нм.

5 Реактивы

Все реактивы должны быть аналитического качества (не ниже х.ч.). Вода. используемая для
приготовления растворов ферментов, должна быть бидистиллированной. Вода лля приготовления
растворов других реактивов и проб должна быть дистиллированной.

Препарат НАД должен содержать не менее 90 % основного вещества.

Издание официальное

ГОСТ P 51196—98

5.1 Раствор гексацианоферрата (Il) калия

Растворяют 35,9 г гексацианоферрата (И) калия K,|Fe(CN,)| x 3H,O в воде и доводят объем
раствора до 1 дм*. Раствор перемешивают.

5.2 Раствор сульфата цинка

Растворяют 71,8 г сульфата цинка гептагидрата (ZnSO,7H,0) в воде и доводят объем раствора
до 1 am}. Раствор перемешивают.

5.3 Раствор гидроксида натрия c{NaOH) = 0.1 моль/дм*

Растворяют 4,00 г гидроксида натрия (NaOH) в воде и доводят объем раствора до | дм. Pac-
твор перемешивают.

5.4 Буферный раствор активной кислотности 10,0pH

Растворяют 7,92 г глицилглицина (С,Н,М,О,) и 1.47 г Г-глутаминовой кислоты (С.Н,МО,) в
80 cm? воды. Устанавливают активную кислотность раствора (10,040,1) рН при 20 °С раствором гид-
роксида натрия с (NaOH) = 10 моль/лм? и доводят объем раствора водой до 100 ca. Раствор
перемешивают.

Раствор устойчив 3 мес при температуре от 0 до 5 °С.

5.5 Раствор НАД

Растворяют 350 мг НАД (C,,H,,N,0,,P,) в 10 см? волы.

Раствор устойчив | мес при температуре от 0 до 5 *С.

Во время использования сосуд с раствором должен быть погружен в емкость с колотым льдом.

5.6 Раствор 1-ЛДГ

Растворяют 10 мг 1--ЛДГ из мускульных тканей свиньи в | см? раствора глицерина массовой
доли 50 % {активная кислотность приблизительно 7 pH).

Удельная активность раствора [-ЛДГ должна быть не менее 5500 Е/см? при 25°C. Раствор
устойчив 12 мес при температуре от 0 до 5 °С.

Во время использования сосуд с раствором должен быть погружен в емкость с колотым льдом.

5.7 Суспензия О-ЛДГ

Смешивают 5 мг О-ЛДГ из Lactobacillus leichmannii с 1 см’ раствора сульфата аммония
с ((NH,),SO,) = 3,2 моль/дм? (активная кислотность приблизительно 6 рН).

Удельная активность суспензии О-ЛДГ должна быть не менее 1500 Е/см? при 25 °С. Суспензия
устойчива 12 мес при температуре от 0 до 5 °С. Во время использования сосуд с суспензией должен
быть погружен в емкость с колотым льдом.

5.8 Суспензия ГПТ

Суспензию ГПТ из сердца свиньи концентрации 20 мг/см? удельной активности 1600 Е/смз
при 25 °С в растворе сульфата аммония с ((МН,),50,) = 3,2 моль/дм? готовят центрифугированием
2 em? суспензии концентрации 10 мг/см? в течение 10 мин (при факторе разделения центрифуги
4000 g). Отбирают 1 см’ надосадочной жидкости и отбрасывают, а оставшуюся суспензию
используют для анализа.

Готовая суспензия устойчива при температуре от 0 до 5 °С 12 мес. На время работы сосуд с сус-
пензией помещают в емкость со льлом.

5.9 Раствор 1-лактата лития

Растворяют 50 мг 1.-лактата лития (C;H,O,Li) в воде и доволят объем раствора до 500 см”. Рас-
твор перемешивают.

5.10 Раствор О-лактата лития

Растворяют 50 мг О-лактата лития (C,H,O,Li) в воле и доводят объем раствора до 500 см?. Рас-
твор перемешивают.

6 Средства контроля и вспомогательные устройства

Обычная лабораторная аппаратура, в том числе указанная в 6.1—6.11.

6.1! Весы лабораторные общего назначения наибольшим пределом взвешивания 200 ги до-
пускаемой погрешностью +0,001 г.

6.2 Стаканчик стеклянный лля взвешивания или бюкса вместимостью 50 см".

6.3 Цилиндр градуированный вместимостью 50 см? и допускаемой относительной погреш-
ностью +2 %.

6.4 Колбы мерные вместимостью 100 см? и лопускаемой относительной погрешностью
20,2 %.

2