ГОСТ 29136-91

Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й   С Т А Н Д А Р Т
                                                  С ОЮЗ А     ССР




                                  МУКА КОРМОВАЯ ИЗ РЫБЫ, МОРСКИХ
                                   МЛЕКОПИТАЮЩИХ, РАКООБРАЗНЫХ
                                         И БЕСПОЗВОНОЧНЫХ
                                        МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ

                                                 ГОСТ 2 9 1 3 6 -9 1

                                                 Издание официальное
                    БЗ 7-91/778
                    24 руб.




                                      КОМИТЕТ СТАНДАРТИЗАЦИИ И МЕТРОЛОГИИ СССР
                                                       Москва

сметная стоимость

УДК 664.957:006.354                                            Группа Н29
Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й         С Т А Н Д А Р Т   С О ЮЗ А    ССР
1


       МУКА КОРМОВАЯ ИЗ РЫБЫ, МОРСКИХ
       МЛЕКОПИТАЮЩИХ, РАКООБРАЗНЫХ И
               БЕСПОЗВОНОЧНЫХ
                                                           ГОСТ
             Метод определения токсичности
                                                         29136—91
         Fodder meal from fish, mammals,
        Crustacea and invertebrate animals*
           Toxicity determination method
ОКСТУ 9109

                                                   Дата введения   01.01*93


   Настоящий стандарт распространяется на кормовую муку, из­
готовленную из рыбы и ракообразных, а также из отходов, по­
ручаемых при их переработке, и устанавливает методы опреде­
ления токсичности.

                               1. ОТБОР ПРОБ

      Отбор проб— по ГОСТ 13496.0.

                   2. ОСНОВНОЙ (АРБИТРАЖНЫЙ) МЕТОД

        Метод основан на количественном определении ответных реак­
    ций инфузорий стилонихий на токсичные компоненты исследуе­
    мых продуктов, содержащихся в мелкодисперсной водной взвеси
    испытуемого продукта (тяжелые металлы, хлорорганические сое­
    динения, углеводороды нефти и соединения грибкового и бакте­
    риального характера).
        Токсичность испытуемого продукта оценивается по выживае­
    мости инфузорий в течение 24 ч.
        2.1. А п п а р а т у ip а, (мia т е р и а л ы
        Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пре-
     зелом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
        Мельница лабораторная электрическая.
        Холодильник бытовой.
        Фильтр мембранный № 6.
        Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
        Чашки Петри по ГОСТ 25336.

    Издание официальное
                                       © Издательство стандартов, 1992
    Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен,
     тиражирован и распррстранен без разрешения Госстандарта СССР
     2—724

С. 2 ГОСТ 29136—91

    Пипетка исполнения 2, вместимостью 20 см3 по ГОСТ 20292.
    Шприц медицинский по ГОСТ 22967 или ветеринарный мно­
гократного использования вместимостью 5 см3 с длинными игла­
ми (воздухопуска).
    Пробирки исполнения 2 вместимостью 20 см3 по ГОСТ 1770.
    Штатив для пробирок.
    Сито лабораторное с отверстиями диаметром 1 мм.
    Баня водяная.
    Шкаф сушильный.
    Ступка № 5 с пестиком по ГОСТ 9147.
    Пипетки пастеровские для пересадки инфузорий
    Микроскоп бинокулярный стереоскопический марки МБС с
увеличением 2X8.
    Счетчик лабораторный СЛ-1.
    Блок камер из оргстекла.
    Блок луночных микроаквариумов.
    Карандаш по стеклу.
    Культура инфузорий стилонихий в логарифмической фазе
роста.
    Дрожжи пекарские прессованные по ГОСТ 171.
    Пластинка стеклянная.
   2.2. П о д г о т о в к а к а н а л и з у
    2.2.1. Выделение и культивирование инфузорий стилонихий
    2.2.1.1. В ы д е л е н и е      инфузорий           из     природных
вод
    Пробу природной воды в количестве 1000—3000 см3 концент­
 рируют путем фильтрации через мембранный фильтр № 6 да
 объема 40 см°. Концентрированный раствор с фильтром помещают
 в чашку Петри, осторожно смывают осадок с филыра и добав­
ляют корм — одну гранулу сухих пекарских дрожжей массой
 около 0,003 г.
    Через 1—2 сут происходит массовое развитие инфузорий раз­
личных видов.
    2.2.1.2. В ы д е л е н и е и н ф у з о р и й из к о м н а т н ы х а к ­
 вариумов
    На дно аквариума помещают гранулу сухих пекарских дрож­
 жей массой около 0,003 г. Через 1 ч водную среду вблизи корма
 отбирают пастеровской пипеткой в чашку Петри.
    2.2.1.3. В ы д е л е н и е       инфузорий           стилонихий      в
 культуру
    Выделение стилонихий в культуру проводят путем неоднократ­
 ного пересаживания в микроаквариумы из оргстекла вмести-
 люстью 0,4 см3.
    2.2.1.4. К у л ь т и в и р о в а н и е с т и л о н и х и й
     Культивируют стилонихии в чашки Петри, используя в каче­
 стве корма сухие пекарские дрожжи, которые добавляют в куль-

ГОСТ 29136—91 С. 3

тральную среду в количестве около 0,003 г во время пересева
культуры. Пересев культуры проводится 2 раза в неделю.
    Культивирование проводят при комнатной температуре (18—
28)°С и естественном освещении, избегая прямых солнечных лу­
чей. Допускается использовать лампы дневного света, устанавли­
вая их сверху на расстоянии 1 м.
    2.2Л.5. Т р а н с п о р т и р о в а н и е и н ф у з о р и й
    Транспортируют культуру инфузорий в стеклянной посуде вме­
стимостью 50 —100 см3 при температуре от 18 до 28°С.
    Период акклиматизации к лабораторным условиям — 24 ч.
    2.2.2. Приготовление среды для культивирования инфузорий
( культуральной среды)
    Средой для культивирования стилоиихий является водопро­
водная вода, которую отстаивают в закрытых ватным тампоном
колбах в течение 1 недели, фильтруют через двойной бумажный
фильтр и стерилизуют 3-кратным нагреванием на водяной бане
до 80°С в течение 3 дней по 30 мин.
    2.2.3. Приготовление корма для инфузорий
    Свежие пекарские прессованные дрожжи массой около 50 г
измельчают и высушивают в бытовом холодильнике. Хранят в
чистой банке с притертой пробкой. Срок хранения в бытовом
холодильнике— 12 мес.
    2.2.4. Изготовление блока камер для промежуточного переса­
живания инфузорий
    Две пластины из органического стекла размером 1 8x8 см
склеивают между собой дихлорэтаном. В верхней пластине тол­
щиной 1 см в 2 ряда по 5 шт. в каждом просверливают отверстия
диаметром 3 см. Рабочий объем каждой камеры 4 см3. Нижняя
 пластина толщиной 3 мм служит дном.
    2.2.5. Изготовление блока луночных микроаквариумов
    Блок луночных микроаквариумов изготавливают из пластины
органического стекла размером 1 6 x 1 0 x 1 см. В пластине высвер­
ливают с последующей полировкой 5 рядов по 10 лунок. Диаметр
 каждой лунки 1,0 см, глубина 0,5, рабочий объем 0,4 см3.
    2.2.6. Порядок обработки емкостей дгя проведения анализа
    Чашки Петри, блоки микроаквариумов и камер моют мыль­
ным раствором и споласкивают водопроводной проточной водой.
 Блоки из органического стекла сушат только на воздухе, чашки
 Петри прокаливают в с у ш и л ь н о м шкафу при температуре 150—
 180°С.
     2.2.7. Подготовка пробы к анализу по ГОСТ 7636.
     2 2.8. Приготовление мелкодисперсной взвеси исследуемого
 продукта
     Навеску исследуемого продукта массой 0,2 г помещают в про­
 бирку с притертой пробкой вместимостью 20 см3, приливают 20 см3
 2*