ГОСТ Р 51441-99

ГОСТ Р 51441-99


                 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ   СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ




                     СОКИ Ф РУ К ТО ВЫ Е И О ВО Щ Н Ы Е

                   Ферментативный метод определения содержания
                      уксусной кислоты (ацетата) с помощью
                               спектрофотометрии



                                    Издание официальное




                                   ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                         Москва




регистрация ту

ГО С Т Р 5 1 4 4 1 - 9 9

                                      Предисловие

    1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овоше-
сушильной промышленности (ВНИИКОП)

     ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 «Продукты переработки плодов
и овощей*

     2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В Д ЕЙ С ТВИ Е Постановлением Госстандарта России от 22 декабря
1999 г. № 5% -ст

    3 Стандарт гармонизирован с европейским стандартом ЕН 12632:1999 «Соки фруктовые и
овощные. Ферментативное определение содержания уксусной кислоты (ацетата). НАД — спектро­
метрический метод»

      4 ВВЕДЕН ВП ЕРВЫ Е

       5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России

II                                         226

ГО СТ Р 5 1 4 4 1 -9 9


ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                       СТАНДАРТ              РОССИЙСКОЙ                  ФЕДЕРАЦИИ


                                СОКИ Ф РУ К ТО В Ы Е И О ВО Щ Н Ы Е

           Ферментативный метод определения содержания уксусной кислоты (ацетата)
                               с помощью спектрофотометрии

              Fruit and vegetable juices. Enzymatic method for spectrophotometric determination
                                         o f acetic acid (acetate) content



                                                                                  Дата введения 2001—01—01



     1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется па фруктовые, овощные соки и подобные им продукты
и устанавливает ферментативный метод определения общего содержания уксусной кислоты или
солей уксусной кислоты (ацетатов) в расчете на уксусную кислоту в диапазоне определения массовой
концентрации от 0,15 до 0.5 г/дм3 или массовой доли от 0.015 до 0.05 %.


     2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 199—78 Натрий уксуснокислый, 3-водный. Технические условия
     ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, про­
бирки. Общие технические условия
     ГОСТ 3769—78 Аммоний сернокислый. Технические условия
     ГОСТ 4201—79 Натрий двууглекислый кислый. Технические условия
     ГОСТ 4209—77 Магний хлористый, 6-водный. Технические условия
     ГОСТ 24104—88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические
условия
     ГОСТ 24363—80 Калия гидроокись. Технические условия
     ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные парамет­
ры и размеры
     ГОСТ 26313—84 Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора
проб
     ГОСТ 26671—85 Продукты переработки плодов и овощей, консервы мясные и мясораститель­
ные. Подготовка проб для лабораторных анализов
     ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуирован­
ные. Часть 1. Общие требования
     ГОСТ Р 51431—99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения относительной плот­
ности
     ИСО 3696—874* Вода для лабораторного анализа. Технические условия и методы испытаний.




      * С 1 то ля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104—2001.
        Действует до введения в действие ГОСТ Р. разработанного на основе стандарта ИСО.



Издание официальное

                                                    227                                                   1

ГОСТ Р 5 1 4 4 1 -9 9


      3 Обозначения и сокращения

     3.1 Обозначения
     13 настоящем стандарте применяют следующие обозначения:
     с — молярная концентрация вещества;
     g — ускорение силы тяжести.
     3.2 Сокращения
     13 настоящем стандарте применяют следующие сокращения:
     Л КС — Ацетил-коэнзим А-сшгтетаза;
     КоА — Коэнзим А;
     АТФ — Аденозин-5'-трифосфат;
     АМ Ф — Аденозин-монофосфат;
     ЦС — Цитрат-синтаза;
     НАД — |3-Никотинамидаденинд инуклеотид;
     НАДН — р-Никотинамидадениндинуклеотид, восстановленная форма;
     М ДГ — Малатдегидрогеназа;
     M E — 1-я международная единица ферментативной активности, равная количеству фермента,
необходимого для катализа превращения I микромоля вещества за 1 мин при температуре 25 “С в
стандартных условиях.


      4 Сущность метода

     Уксусная кислота (ацетат) в присутствии фермента ацетил-коэн зима А-синтетазы (АКС) с
аденозин-5'-трифосфатом (АТФ) и коэнзимом А (КоА) превращается в ацетил-КоА:
                            АКС
      Ацетат + АТФ + КоА     ^    ацетил — КоА + АМФ + пирофосфат.
     Ацетил-КоА реагирует с оксалоацетатом с образованием цитрата в присутствии цитрат-синта­
зы (ЦС):
                                          ЦС
      Ацетил-КоА + оксалоацетат + Н ,0         цитрат + КоА.
     Оксалоацетат. необходимый для реакции (2), образуется из маната и никотинамидаденинди-
нуклеотида (НАД) в присутствии малатдегидрогеназы (М ДГ). В зтой реакции НАД восстанавлива­
ется до НАДН.
                    МДГ
      Манат т НАД*      оксаноацетат + НАДН + Н*.
     В основе метода лежит образование НАДН. количество которого определяют по увеличению
оптической плотности при длине волны 334 нм, 340 нм или 365 нм. Количество образовавшегося
НАДН зависит от концентрации уксусной кислоты, однако зависимость нелинейная.


      5 Средства измерений, лабораторное оборудование, реактивы и материалы

      Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания
20 г, 2-го класса точности.
      Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания
500 г, 3-го класса точности.
      Спектрофотометр, позволяющий проводил, исследования при длине волны 340 нм, с допус­
тимой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более I % или коло­
риметр фотоэлектрический лабораторный с устройством для считывания значений оптической
плотности со светофильтром длиной волны, соответствующей максимуму пропускания (340 ± 10) нм
или (365 ± 10) нм, и допустимой абсолютной погрешностью измерения не более I %.
      Кюветы из кварца, оптического стекла или полистирола рабочей длиной 10 мм.
      Иономер или pH-метр с погрешностью измерения не более 0,05 pH.
      Пипетки по ГОСТ 29227 типа 3, исполнения 1, 1-го класса точности, вместимостью 1 и 10 см 3.
2                                              228