ГОСТ Р 51435-99

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                                 ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                                        НАЦИОНАЛЬНЫЙ                 ГО С ТР
                                             СТАНДАРТ
                                          РОССИЙСКОЙ
                                                                     51435-
                                           ФЕДЕРАЦИИ                 99
                                                                     (ИСО 8128-1-93)



                                       СОК ЯБЛОЧНЫЙ,
                             СОК ЯБЛОЧНЫЙ КОНЦЕНТРИРОВАННЫЙ
                           И НАПИТКИ, СОДЕРЖАЩИЕ ЯБЛОЧНЫЙ СОК
                             Метод определения содержания патулина
                                 с помощью высокоэффективной
                                    жидкостной хроматографии


                                             Издание официальное




                                                    СтандартИ1ф<цм
                                                         2011



замеры шума оборудования

ГОСТ Р 51435—99


                                       П ре д исловие

    1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и
овощесу-шильной промышленности (ВНИИКОП)

     2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 «Продукты переработки плодов
и овощей»

     3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22
декабря 1999 г. Мч 590-ст

     4 Настоящий стандарт содержит аутентичный текст международного стандарта ИСО 8128-1—93
«Сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки, содержащие яблочный сок. Определе­
ние содержания патулина. Часть 1. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии», кроме
приложения «Библиография»

     5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Август. 2018 г.



     Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федоралы<ого закона
от 29 июня 2015 г. No 162-ФЗ «О стандартизации в Российской Федерации». Информация об
изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего
года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официалышй текст изменений
и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае
пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет
опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные
стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в
информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства
по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)




                                                          © Стандартинформ. оформление. 2018

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и рас­
пространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии
II

ГОСТ Р 51435— 99
                                                                                          (ИСО 8128-1— 93)


Н А Ц И О Н А Л Ь Н Ы Й           С Т А Н Д А Р Т          Р О С С И Й С К О Й            Ф Е Д Е Р А Ц И И

            СОК ЯБЛОЧНЫЙ, СОК ЯБЛОЧНЫЙ КОНЦЕНТРИРОВАННЫЙ И НАПИТКИ,
                           СОДЕРЖАЩИЕ ЯБЛОЧНЫЙ СОК

                           Метод определения содержания патулина
                  с помощ ью вы сокоэф ф ективной жидкостной хроматографии

                     Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice.
            Method for determination of patulin content using high performance liquid chromatography




                                                                                 Дата введения — 2001—01— 01


     1 О бласть пр им енения
     Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания патулина в яблочном соке,
концентрированных яблочных соках и напитках, содержащих яблочный сок, с помощью высокоэффек­
тивной жидкостной хроматографии.
     Предел обнаружения патулина настоящим методом составляет 10 мкг/дм3 при условии, что
взятый для анализа объем пробы готового к употреблению сока составляет 5 см3.

     2 С ущ но сть метода
     Метод основан на экстракции патулина из исследуемой пробы этилацетатом. очистке экстракта
перераспределением в водный раствор карбоната натрия и количественном и качественном анализе
экстракта с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием слек-
трофотометрического детектора в ультрафиолетовой области.


     3 Р еактивы
      Используют реактивы аналитической чистоты и воду квалификации «для ВЭЖХ».
      3.1 Растворитель: этилацетат.
      3.2 Подвижная фаза — раствор ацетонитрила в воде объемной концентрации 10 %.
      3.3 Экстрагирующий раствор — водный раствор безводного карбоната натрия концентрации
14 г/дм3.
      3.4 Ацетатный буфер, pH 4.
      Смешивают 16.4 см3 уксусной кислоты [с (СН3СООН) = 0.2 моль/дм3] с 3.6 см3 раствора ацетата
натрия (с (CH3COONa) = 0.2 моль/дм3].
      3.5 Уксусная кислота, ледяная.
      3.6 Стандартный раствор патулина (С7Н60 4).
      3.6.1 Приготовление стандартного раствора
      Навеску патулина массой 10.0 мг. взятую с точностью до 0,1 мг, растворяют в мерной колбе с
одной отметкой вместимостью 100 см3 в ацетатном буфере (3.4). Объем содержимого в колбе доводят
до метки ацетатным буфером.
      Пипеткой переносят 10,0 см3 приготовленного раствора в другую мерную колбу с одной отметкой
вместимостью 100 см3, объем содержимого в колбе доводят до метки ацетатным буфером. Массовая
концентрация патулина в приготовленном стандартном растворе составляет около 10 мкг/см3.
      Измеряют оптическую плотность стандартного раствора при длине волны 276 мм на подходящем
спектрофотометре с использованием кварцевых кювет рабочей длиной 10 мм.


Издание оф ициальное
                                                                                                              1

ГОСТ Р 51435—99

     3.6.2 Расчет концентрации стандартного раствора патулина
     Концентрацию стандартного раствора патулина (3.6.1) рр... мкг/см3, вычисляют по формуле
                                                   AM 1000 С
                                                                                                 ( 1)


где А — оптическая плотность стандартного раствора патулина;
 А 2 7 б ~ молярный показатель поглощения раствора патулина при длине волны 276 нм. дм3 моль 1 •см 1
           (^276= 14600);
     М — молярная масса патулина. г/моль:
     С — постоянная прибора (обычно С = 1).

     4 П р и б о р ы и л а б о р а то р н о е о б о р уд о ван ие
     Перед использованием лабораторное оборудование промывают раствором гипохлорита натрия
концентрации 10 г/дм3.
     Обычное лабораторное оборудование, в частности следующее:
     4.1 Жидкостный хроматограф, снабженный спектрофотометрическим детектором в ультрафиоле­
товой области (пригодным для работы при длине волны 276 нм) и самописцем или интегратором.
     4.2 Обращенно-фазовая колонка ODS1* или другая аналогичная колонка со следующими пара­
метрами:
     - эффективность не менее 35000 теоретических тарелок на метр;
     * длина 250 мм;
     - внутренний диаметр 4.6 мм;
     - неподвижная фаза размером частиц 5 мкм.

     5 О тбор проб
     Проба, поступающая в лабораторию, должна быть представительной и без слодов порчи или
изменения свойств продукта при транспортировании и хранении.

     6 П роведение и с п ы та н и й

     6.1 Приготовление испытуемого раствора
      При испытаниях концентрированных яблочных соков их разводят водой 1:5 по объему. Дальней­
шую процедуру проводят для всех продуктов одинаково, как описано ниже.
     6.1.1 Пробу объемом 5.0 см3 экстрагируют порцией этилацетата объемом 5.0 см3 (3.1) в тече­
ние не менее 1 мин. Экстракцию повторяют еще два раза новыми порциями этилацетата объемом по
5.0 см3. Этилацетатные фазы объединяют и экстрагируют раствором карбоната натрия (3.3) объемом
2.0 см3.
      ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Экстракцию раствором карбоната натрия проводят как можно быстрее,
например в течение 1—2 мин. из-за нестабильности патулина в щелочной среде.
     6.1.2 Карбонатную фазу (6.1.1) экстрагируют свежей порцией этилацетата объемом 5,0 см3,
экстракт объединяют с предыдущими порциями. Карбонатную фазу отбрасывают. К экстракту добавля­
ют 5 капель уксусной кислоты (3.5). смесь перемешивают и упаривают на ротационном испарителе до
объема 1—2 см3.
     6.1.3 Полученный таким образом раствор количественно переносят во флакон вместимостью
около 5 см3 с помощью нескольких порций этилацетата объемом около 1 см3 каждая. Раствор упарива­
ют досуха в токе азота при температуре 40 °С. Остаток растворяют в 0,5 см3 подвижной фазы (3.2) или
ацетатного буфера (3.4).

     6.2 Построение градуировочного графика
     Порции стандартного раствора патулина (3.6.1) объемом 1.0: 2.0; 3.0; 5,0 и 7,5 см3 переносят
пипеткой в пять мерных колб с одной отметкой вместимостью 10 см3, объем содержимого в колбах до­
водят до метки ацетатным буфером (3.4): получают градуировочные растворы.

     О ODS — октадецилсилан.
2