ГОСТ Р 51427-99

ГОСТ Р 51427-99


                    ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й СК О Й ФЕ Д Е Р АЦ ИИ




                                   СОКИ ЦИТРУСОВЫ Е

                         Метод определения массовой концентрации
                            гесперидина и нарингина с помощью
                       высокоэффективной жидкостной хроматографии


                                          Издание официальное




                                         ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                               Москва




номер сертификата

ГОСТ Р 5 1 4 2 7 -9 9

                                      Предисловие

    1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овоще­
сушильней промышленности (ВН И И К О П )

     ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ГК 93 «Продукты переработки плодов
и овощей»

     2 П РИ Н ЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабря
1999 г. № 582-ст

    3 Стандарт гармонизирован с европейским стандартом ЕН 12148:1996 «Соки фруктовые и
овощные. Определение гесперидина и нарингипа в цитрусовых соках. Метод высокоэффективной
жидкостной хроматографии*

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распрострален в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России

                                                     © ИМ К Издательство стандартов, 2000
                                                             © СТЛНДЛРТИНФ ОРМ . 2008
                                               Переиздание (по состоянию на апрель 2008 г.)

II

ГОСТ Р 51427-99


ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                        СТАНДАРТ             РОССИЙСКОЙ                  ФЕДЕРАЦИИ


                                         СОКИ ЦИТРУСОВЫ Е

                Метол определения массовой концентрации гесперидина и парти йна
                   с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

             Citrus juices. Method Гог determination of hespendin and naringin mass concentration
                                using high performance liquid chromatography



                                                                                   Дата введения 2001—01—01


     1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на цитрусовые соки и устанавливает метод определения
массовой концентрации гесперидина и нарингииа с помощью высокоэффективной жидкостной
хроматографии.
     Диапазон определения массовой концентрации гесперидина и нарингииа — от 300 до
2000 м г/дм \


     2 Нормативные ссылки^
     В настоящем стандарте использованы ссылки па следующие стандарты:
     ГОСГ 61—75 Кислота уксусная. Технические условия
     ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, про­
бирки. Общие технические условия
     ГОСТ 5712—78 Аммоний щавелевокислый 1-водный. Технические условия
     ГОСТ 20289—74 Диметилформамид. Технические условия
     ГОСТ 24104—88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические
условия
     ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные парамет­
ры и размеры
     ГОСТ 26313—84 Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора проб
     ГОСТ 26671—85 Продукты переработки плодов и овощей, консервы мясные и мясораститель­
ные. Подготовка проб для лабораторных анализов
     ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные.
Часть 1. Общие требования
     ГОСТ Р 51431—99 Соки фруктовые и овощные. Метод определения относительной плотности
     ИСО 3696—87* Вода для лабораторного анализа. Технические условия и методы испытаний


     3 Сущность метода
     Метод основан на экстракции гесперидина и нарингииа из пробы сока раствором диметил-
формамида при нагревании и количественном определении их массовых концентраций в экстракте
с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с применением обращенно-
фазовой колонки и спектрофотометрического детектора в ультрафиолетовой области спектра.

     * Дсйствуег до введения в действие ГОСТ Р. разработанного на основе стандарта ИСО.

Издание официальное
     ° См. примечание ФГУП «СТАНДАРТНЫФОРМ. (с. 6).
                                                                                                          I

ГОСТ I» 514 2 7 -9 9

     4 Средства измерений, лабораторное оборудование, реактивы и материалы
      Весы лабораторные обшего назначения по ГОСТ 24104 е наибольшим пределом взвешивания
20 г. 2-го класса точности.
      Весы лабораторные обшего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания
200 г, 2-го класса точности.
      Жидкостный хроматограф, состоящий из:
      - насоса высокого давления с верхним пределом давления не менее 25 МПа и диапазоном
регулирования подачи растворителя от 0,1 до 5 c m j / m h h ;
      - петлевого устройства ввода пробы (инжектора) с рабочим объемом петли 0.020 см5;
      - спектрофотометрического детектора с переменной длиной волны, позволяющего проводить
измерение оптической плотности при длине волны 287 нм. или детектора с фиксированной длиной
волны, позволяющего проводить измерения оптической плотности при длине волны 280 нм. снаб­
женного проточной кварцевой кюветой вместимостью не более 0.01 см5, с относительной погреш­
ностью измерения оптической плотности не более 2 %;
      - регистрирующего устройства (самописца или интегратора), позволяющего проводить изме­
рения при чувствительности 0.2 мВ/см. с погрешностью записи в рабочих условиях не более 0.5 %:
      - колонки длиной 250 мм, внутренним диаметром 4 или 4.6 мм, заполненной обрашенпо-фа-
зовым сорбентом с привитыми октадецильными группами размером частиц 5 мкм.
      М икрошприц вместимостью, обеспечивающей полное заполнение петли инжектора.
      Баня водяная, пригодная для поддержания температуры (90±2) “С.
      Колбы мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 50, 100 и 1000 см5.
      Цилиндры по ГОСТ 1770 вместимостью 250 и 1000 см5.
      Фильтры мембранные размером пор не более 0.5 мкм.
      Пипетка по ГОСТ 29227 типа 2 исполнения 1, 1-го класса точности вместимостью 2 и 10 см5.
      Аммоний щавелевокислый 1-водный (оксалат аммония) по ГОСТ 5712, х.ч.
      Ацетонитрил для жидкостной хроматографии |1 |, х.ч.
      Диметилформамнд по ГОСТ 20289, х.ч.
      Кислота уксусная по ГОСТ 61. х.ч.
      Вода для лабораторного анализа по ИСО 3696 категории 1.
      Нарингин (нарингенин-7-неогесперндозид).
      Гесперидин (геспсридин-7-рутинозид).
      Допускается использование других средств измерений, лабораторного оборудования и реакти­
вов, по метрологическим и техническим характеристикам не уступающих перечисленным выше.

     5 Отбор и подготовка проб
     5.1 Отбор проб - по ГОСТ 26313.
     5.2 Подготовка проб к испытаниям — по ГОСТ 26671.
     Концентрированные продукты разводят водой до заданного значения относительной плотности
в соответствии с нормативным или техническим документом на конкретный вид продукта. Отно­
сительную плотность разбавленной пробы определяют по ГОСТ Р 51431 и найденное значение
указывают в протоколе испытаний.

     6 Подготовка к проведению испытаний
     Для приготовления растворов, используемых при проведении испытания, и подвижной фазы
для ВЭЖХ используют только воду для лабораторного анализа категории 1 по ИСО 3696.
     6.1 Приготовление стандартных растворов гесперидина и пари шина
      Навески гесперидина и нарингина массой 120 мг каждая переносят в мерные колбы вмести­
мостью 100 см5. В колбы вносят по 20 см5 диметилформамида. Содержимое колб перемешивают до
полного растворения кристаллов гесперидина и нарингина, затем объем содержимого в колбах
доводят до отметки раствором уксусной кислоты концентрации с(СН ,СО О Н) = 0,01 моль/дм5,
содержимое колб тщательно перемешивают. Из полученных основных растворов гесперидина и
нарингина массовой концентрации 1200 мг/дм5 готовят рабочие растворы гесперидина и нарингина
массовой концентрации 120. 60, 30 и 15 мг/дм5 точным разведением основных растворов в соответ­
ствующее количество раз смесью раствора уксусной кислоты концентрации с(С Н ,С О О Н ) =
= 0.01 моль/дм5 и ли метил формамида (8:2 по объему). Срок годности основных и рабочих растворов
гесперидина и нарингина — 30 сут при хранении при температуре около 4 "С.
     6.2 11ригагонление раствора оксалата аммония концентрации c[(NH4)2C 2( ) 4 H2OJ = 0,025 моль/дм-'
2