ГОСТ Р 54744-2011

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                                ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                                          НАЦИОНАЛЬНЫЙ
                                                                             ГО С ТР
                                               СТАНДАРТ
                                             РОССИЙСКОЙ                      54744   —


                                              ФЕДЕРАЦИИ                      2011




                                   ПРОДУКЦИЯ СОКОВАЯ

                       Определение хинной, яблочной и лимонной кислот
                            в продуктах из клюквы и яблок методом
                        высокоэффективной жидкостной хроматографии


                                            Издание официальное




                                                          Москоа
                                                      Стандартинформ
                                                           2019




ошибки строительства

ГОСТ Р 54744— 2011


                                           П ред и сл ови е

    1 РАЗРАБОТАН Академическим центром сертификации и стандартизации продуктов питания
ОАО «Академсертификат»

    2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 «Продукты переработки фруктов,
овощей и грибов»

     3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерапьного агентства по техническому ре­
гулированию и метрологии от 13 декабря 2011 г. No 917-ст

       4 В настоящем стандарте учтены основные нормативные положения:
       - международного стандарта CODEXSTAN 247— 2005 «Общий стандарт на фруктовые соки и не­
ктары» (CODEXSTAN 247— 2005 «Codex general standard for fruit juices and nectars». NEQ) в части мето­
дов анализа и отбора проб соковой продукции;
       - основные нормативные положения и метрологические характеристики документа АОАС 986.13
«Хинная, яблочная и лимонная кислоты в коктейлях из клюквенного сока и в яблочном соке» (АОАС
Official Method 986.13 «Quinic, Malic and Citric Acids in Cranberry Juice Cocktail and Apple Juice». NEQ)

     5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Ноябрь 2019 г.



     Правила применения настоящ его ста н д а р та установлены в с т а т ь е 26 Федерального закона
о т 29 июня 2015 г. No 162-ФЗ «О стандартизации в Российской Федерации». Информация об из­
менениях к настоящ ему ста н д а р ту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущ его
года) информационном указателе «Национальные станд арты », а официальный т е к с т изменений
и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные станд арты ». В случае
пересмотра (замены) или отм ены настоящ его ста н д а р та со о тветствую щ ее уведомление будет
опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные
станд арты ». С оответствую щ ая информация, уведомление и т е к с т ы размещ аются такж е в ин­
формационной систем е общего пользования — на официалыюм са й те Федерального а ге н тс тв а по
техническому регулированию и м етрологии в с е ти И н те р н е т (www.gost.ru)




                                                          © Стандартинформ. оформление. 2013. 2019

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и рас­
пространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии

II

ГОСТ Р 54744— 2011


 Н А Ц И О Н А Л Ь Н Ы Й              С Т А Н Д А Р Т          Р О С С И Й С К О Й            Ф Е Д Е Р А Ц И И



                                             ПРОДУКЦИЯ СОКОВАЯ

  Определение хинной, яблочной и лимонной кислот в продуктах из клю квы и яблок методом
                     высокоэфф ективной жидкостной хроматографии

Juice product. Determination of quinic, malic and citric acids in products from cranberry and apples by high-performance
                                                 liquid chromatography



                                                                                     Дата введения — 2013— 01— 01




      1 О бласть прим ен ения
     Настоящий стандарт распространяется на соковую продукцию в части продуктов из клюквы и
яблок и устанавливает метод определения хинной, яблочной и лимонной кислот с помощью высоко­
эффективной жидкостной хроматографии (далее — метод ВЭЖХ).



      2 Н ор м а ти вн ы е с сы л ки
     В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 1770 (ИСО 1042— 83. И С 0 4788— 80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры,
мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
     ГОСТ 4198 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические условия
     ГОСТ 6709 Вода дистиллированная. Технические условия
     ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и
размеры
     ГОСТ 26313 Продукты переработки фруктов и овощей. Правила приемки и методы отбора проб
     ГОСТ Р 512391> Соки фруктовые и овощные. Метод определения L-яблочной кислоты
     ГОСТ Р 519402> Соки фруктовые и овощные. Метод определения D-яблочной кислоты
      П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных
стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по
техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «На­
циональные стандарты*, который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесяч­
ного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт,
на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта
с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана дати­
рованная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения
(принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная
ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется
применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором
дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылху.



      1> Действует ГОСТ 34409— 2018.
     2) Действует ГОСТ 34408— 2018.


Издание оф ициальное
                                                                                                                       1

ГОСТ Р 54744— 2011


     3 С ущ н о сть метода
     Метод основан на предварительной твердофазной экстракции пробы с помощью одноразового
картриджа для удаления соединений, мешающих определению, фильтровании и хроматографическом
разделении в системе для проведения ВЭЖХ.
     Хинная, яблочная, лимонная кислоты в ходе хроматографического определения разделяются с
использованием двух обращенно-фазовых хроматографических колонок и регистрируются с помощью
спектрофотометрического детектора при длине волны 214 нм. Расчет долей органических кислот, под­
тверждаемых хроматограммой, осуществляется путем сравнения с градуировочными растворами стан­
дартных веществ.

     4 П р и б о р ы и реактивы

     4.1 Хроматограф для ВЭЖХ
     Хроматографическая система для ВЭЖХ состоит из инжектора, спектрофотометрического детек­
тора с возможностью регистрации фракций при длине волны 214 нм с разрешением 0,1 ед. оптической
плотности, программно-аппаратного комплекса для обработки результатов хроматографического раз­
деления (например, система Waters Associates, Inc., инжектор модель 7725i, детектор модель 2487,
компьютерный интегратор Hewlett-Packard 3390 или эквивалентная система).
     4.2 Колонка аналитическая
     Для хроматографического разделения используют аналитическую колонку [1] модель Supelcosil
LC-18 (или эквивалент) с размером частиц 5 мкм, длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм с
последовательно подключенным картриджем модель Radial-Pak С18 (Waters Associates. Inc. или экви­
валент) с размером частиц 5 мкм. длиной 100 мм. с использованием радиального насосного модуля.
     Картридж Radial-Pak С1в допускается заменить на любую стандартную обращенно-фазовую ко­
лонку С 18 из нержавеющей стали с размером частиц 10 мкм.
     В системе перед колонкой (1) необходимо использовать предварительную обращенно-фазовую
колонку модель Bio-Rad ODS-Ю (или эквивалент). В качестве подвижной фазы используют фосфатный
буфер. Скорость элюирования составляет 0,8 см3/мин. Разрешение детектора должно составлять не
менее 0.1 ед. оптической плотности.
     4.3 Картридж для твердофазной экстракции
     Для твердофазной экстракции используют одноразовые картриджи модель Sep-Pak С1а (Waters
Associates, Inc. или эквивалент).
     4.4 Реактивы
     4.4.1 Калий фосфорнокислый однозамещенный (КН2Р 0 4) по ГОСТ 4198, х. ч.
     4.4.2 Кислота ортофосфорная массовой долей не менее 85 %. х. ч.
     4.4.3 Метанол (перед применением фильтруют через мембранный фильтр с размером пор
0,45 мкм), 95 %, ч. д. а.
     4.4.4 Фаза подвижная ВЭЖХ — раствор 0,2 М КН2Р 0 4 с 2,4 ед. pH
      Для приготовления подвижной фазы (фосфатного буфера) для ВЭЖХ взвешивают 27,2 г КН2Р 04
(4.4.1) в химическом стакане. В стакан добавляют дистиллированной воды (4.4.5) до объема 950 см3. С
помощью pH-метра и ортофосфорной кислоты (4.4.2) доводят кислотность до 2.4 ед. pH. Раствор пере­
носят в мерную колбу на 1000 см3 и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор фильтруют
через мембранный фильтр с размером диаметра пор 0,45 мкм (4.7).
      4.4.5 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
      4.4.6 Кислота хинная (CAS-77-95-2), ч. д. а.
      4.4.7 Кислота яблочная (CAS-6915-7), ч. д. а.
      4.4.8 Кислота лимонная (CAS-77-92-9), ч. д. а.
      4.4.9 Ацетонитрил, ч. д. а. (перед применением фильтруют через мембранный фильтр с разме­
ром диаметра пор 0.45 мкм).
      4.5 Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336.

2