ГОСТ Р 51259-99

ГОСТ Р 51259-99
                                                          (ДИН 10344-82)


                ГОСУДАРСТВЕННЫЙ   СТАНДАРТ      РОССИЙСКОЙ   ФЕДЕРАЦИИ




                   М О ЛО КО И М О Л О Ч Н Ы Е П РО ДУКТЫ

                     Метод определения лактозы и галактозы


                                   Издание официальное




                                  ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                       Москва




вязаный жакет

ГОСТ Р 5 1 2 5 9 -9 9

                                         Предисловие

      1 РАЗРАБОТАН Московским государственным университетом пищевых производств

     ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации Т К 335 «Методы испытаний агропромыш­
ленной продукции на безопасность»

      2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 12 апреля 1999 г.
№ 121

     3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст национального стандарта ФРГ ДИН
10344—82 «Молоко и молочные продукты. Ферментативное определение лактозы и галактозы* с до­
полнительными требованиями, отражающими потребности народного хозяйства (разделы 2, 3 ,4 .5 ,6
и 7)

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

      5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения
Госстандарта России

II                                            260

ГОСТ Р 51259-99
                                                                                       (ДИН 10344-82)

ГО СУ ДА РСТВ ЕНН Ы Й                СТАНДАРТ              РО С СИ Й СКО Й             ФЕДЕРАЦИИ



                              М О ЛОКО И М О ЛО ЧН Ы Е ПРОДУКТЫ

                               Метод определения лактозы и галактозы

                                          Milk and milk products.
                         Method for determination o f lactose and galactose content




                                                                                 Дата ввеления 2000—01—01


           1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на молоко и маточные продукты и устанашшвает метод
определения массовых долей лактозы и галактозы в присутствии других сахаров.

          2 Нормативные ссылки

     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 2493—75 Калий фосфорнокислый двузамешенный 3-водный. Технические условия
     ГОСТ 3652—69 Кислота лимонная моногидрат и безводная. Технические условия
     ГОСТ 3769—78 Аммоний сернокислый. Технические условия
     ГОСТ 4174—77 Цинк сернокислый 7-вещный. Технические условия
     ГОСТ 4204—77 Кислота серная. Технические условия
     ГОСТ 4328—77 Натрия гидроокись. Технические условия
     ГОСТ 4523—77 Магний сернокислый 7-водный. Технические условия
     ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия
     ГОСТ 26809—86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовки
проб к анализу

          3 Определения, обозначения и сокращения

       3 .1 В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующим определением:
       массовые доли лактозы и галактозы в молоке и молочных продуктах: Массовые доли лактозы
и галактозы, определенные раздельно в соответствии с настоящим стандартом и выраженные в
г / 100 г.
       3.2 В настоящем стандарте применяют следующие обозначения и сокращения:
       НАД — р-никотинамндадениидинуклеотид;
       НАДН —Р-никотинамидаденнндинуклеотид (восстаноаченная форма);
       ГЗ - Р-галактозидаза;
       ГДГ — Р-гатактозодегидрогепаза;
       Е—международная единица, определяющая количество (активность) фермента, которое служит
кагат и затором для превращения при 25 “С 1 мкмоля вещества в минуту.



Издание официальное

1 2 -3 -7 0 6                                       261                                                 I

ГОСТ Р 5 1 2 5 9 -9 9

     4 Сущность метода

      Метод определения галактозы основан на окислении галактозы, содержащейся в освобожденном
от жира и белка водном экстракте пробы молока или молочных продуктов, под действием НАД в
присутствии фермента ГДГ и фотометрическом измерении массовой доли образовавшегося НЛДН,
эквивалентной массовой доле галактозы в пробе (свободная галактоза).
      Метод определения лактозы основан на п и р о л и зе лактозы, содержащейся в освобожденном от
жира и белка водном экстракте пробы молока или молочных продуктов, в присутствии ГЗ до глюкозы
и галактозы, окислении имеющейся в пробе галактозы (свободная галактоза плюс образовавшаяся при
гидролизе лактозы) под действием НАД в присутствии фермента ГДГ и фотометрическом измерении
массовой доли образовавшегося НЛДН. эквивалентного массовой доле галактозы, и расчете массовой
доли лактозы по разности оптических плотностей данного раствора и раствора, используемого при
определении свободной галактозы.

      5 Реактивы

      При проведении анализа используют химически чистые или чистые для анализа реактивы.
      Вода, используемая для приготовления растворов ферментов, должна быть бидисгиллированной.
      Вода, используемая для приготовления растворов химических реагентов и подготовки проб,
должна быть дистиллированной по ГОСТ 6709 или деминерализованной.
      Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов для определения
лактозы и галактозы при условии соответствия их качества требованиям настоящего стандарта.
      5 .1 Раствор сернокислого цинка
      30 г сернокислого цинка по ГОСТ 4174 (Z nS 04■7Н.О) растворяют в 100 см* дистиллированной
воды. Раствор хранят при комнатной температуре 12 мес.
      5.2 Раствор гексациано-(П)-фсррата калия
      15 г гексаииано-(М)-феррата калия (K JF e(C N )J ЗН;0 ) растворяют в 100см1дистиллированной
воды. Раствор хранят при температуре 4 'С 1 мес.
      5.3 Гидроокись натрия по ГО СТ4328, раствор молярной концентрации c{Na()H) = ОДЗмаль/дм1.
      5.4 Цитратный буферный раствор
      2,8 г тринатрийцитрата дигидрата (CbH 40 ,N a j- 2Н.О). 0.625 г сернокислого магния по
ГОСТ 4523 (MgSO, • 7Н:0 ) и 0,042 г моногидрата лимонной кислоты по ГОСТ 3652 (С ,Н кО,- Н.О)
растворяют в 40 см1дистиллированной воды. Активную кислотность раствора доводят до 6,6 pH не­
сколькими каплями раствора серной кислоты по ГОСТ 4204 молярной концентрации c(H ,S 04) =
= 2 моль/дм5 или раствора гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 молярной концентрации c(NaOH) =
= 0,1 моль/дм1. Объем раствора доводят дистиллированной водой до 50 см». Буферный раствор устойчив
при температуре 4 "С 3 мес.
      5.5 Буферный раствор дифосфата калия
      8,3        г дифосфата калия по ГОСТ 2493 (К4Р ,0 ,) растворяют в 40 см* дистиллированной воды.
Активную кислотность раствора доводят до 8.6 pH раствором серной кислоты по ГОСТ 4204 молярной
концентрации c<H,S04) = 2м оль/дм \ Объем раствора доводят дистиллированной водой до 50 см 1.
Буферный раствор устойчив при температуре 4 "С 2 мес.
      5.6 Раствор НАД
      0,035 г НАД растворяют в 7 см1 нитратного буфера по 5.4. Раствор устойчив при температуре 4 С
три недели.
      5.7 Суспензия фермента ГЗ
      Сухой лиофилизат (i-галактозидазы из Е. сой массой 0.005 г и активностью 150 Е суспендируют
в 1 см’ раствора аммония сернокислого по ГОСТ 3769 молярной концентрации c ((N H 4),S 0 4) =
= 2,2 моль/дм5. Суспензия устойчива при температуре 4 ‘С 12 мес.
      5.8 Суспензия фермента ГДГ
      Сухой лиофилизат р-галактозодсгидрогеназы из Pseudomonas tluorescens массой 0,005 г и актив­
ностью 25 Е смешивают с 1 см5 раствора аммония сернокислого по ГОСТ 3769 молярной концентра­
ции c ((N H 4),S 04) = 2,2 моль/дм5. Суспензия устойчива при температуре 4 *С 12 мес.

2                                              262