ГОСТ Р 51240-98

ГОСТ Р 51240-98
                                                                             (ДИН 1140-94)


                    Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н ЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й С К О Й Ф Е Д Е Р А Ц И И




                            СОКИ Ф РУКТО ВЫ Е И О В О Щ Н Ы Е

                          Метод определения D-глюкозы и D-фруктозы


                                                 Издание официальное




                                                ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                                      М осква




кардиганы женские

ГОСТ Р 51240-98

                                       Предисловие

     1 РЛЗРЛБО ГЛН Московским государственным университетом пищевых производств

   ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропро­
мышленной продукции па безопасность*

     2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 25 декабря
1998 г. № 463

     3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст национального стандарта ФРГ
ДИН ЕН 1140—94 -Фруктовые и овощные соки. Ферментативное определение D-глюкозы и
D -фруктозы. Спектрофотометрическое определение НЛДФН (ннкотинамндадениндииуклеотид-
фосфата)* с дополнительными требованиями, отражающими потребности народного хозяйства
(разделы 2, 5, 7, 8 и 9 и пункт 6.1)

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разре­
шения Госстандарта России
II                                          128

ГОСТ Р 51240-98
                                                                                     (ДИН 1140-94)

Г О С У Д А I» С Т В Е Н Н Ы Й     СТАНДАРТ            Р О С С И Й С К О Й Ф ЕД Е Р А Ц И И


                            СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ

                         Метод определения D-глюкозы и D-фруктозы

                                      Fruit and vegetable juices.
                          Determination of D-glucosc and D-fructose content



                                                                              Дата введения 1 9 9 9 -0 7 -0 1


      1 Область применения
    Настоящий стандарт распространяется на фруктовые и овощные соки, нектары и сокосо­
держащие напитки и устанавливает метод определения массовых концентраций D-глюкозы и
D-фруктозы.

      2 Нормативные ссылки
      13 настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
      ГОСТ 3769—78 Аммоний сернокислый. Технические условия
      ГОСТ 4201—79 Натрий углекислый кислый. Технические условия
      ГОСТ 4328—77 Натрия гидроокись. Технические условия
      ГОСТ 4523—77 Магний сернокислый 7-водиый. Технические условия
      ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

      3 Определение, обозначения и сокращения
      3.1 В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующими определения­
ми:
     массовые концентрации D-глюкозы и D-фруктозы во фруктовых и овощных соках, нектарах
и сокосодержащих напитках: Массовые концентрации D -глюкозы и D-фруктозы, определенные
раздельно в соответствии с настоящим стандартом и выраженные в граммах на кубический
дециметр.
     3.2 В настоящем стандарте применяют следующие обозначения и сокращения.
     АТФ      — аденозин-5'трифосфат;
     АДФ      — аде нозин - 5'-дифосфат;
     НАДФ — [3-иикотинам идадениндикуклеотидфосфат;
     Н.АДФН — (3-ннкотинамидадениндинуклеотндфосфат (восстановленная форма);
     Г-6-Ф    — глюкозо-6-фосфат;
     ф -6 -ф — фруктозо-6-фосфат;
     ГК       — гексокиназа;
     Г6Ф-ДГ — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа;
     ФГИ      — фосфоглюкозои зомераза;
     Е        — международная единица.определяет количество (активность) фермента,которое
                служит катализатором для превращения при 25 *С 1 мкмоля вещества в минуту.

Изланис официальное
                                                 129                                                            1

ГОСТ Р 51240-98

     4 Сущность метода и реакции
     4.1 С у щ н о с т ь м е т о д а
     Метод (1, 2] основан на фосфорилировании D-глюкозы и D-фруктозы под действием АТФ в
присутствии ГК с образованием Г-6-Ф и Ф-6-Ф, преобразовании Г-6-Ф под действием НАДФ в
присутствии Г6Ф-ДГ в глюконат-6-фосфат и НЛДФН, фотометрическом измерении массовой кон­
центрации образовавшегося НЛДФН. эквивалентной массовой концентрации D-глюкозы; изомериза­
ции Ф-6-Ф в Г-6-Ф в присутствии ФГИ. преобразовании Г-6-Ф под действием НЛДФ в присутствии
Г6Ф-ДГ в глюконат-6-фосфат и НЛДФН. фотометрическом измерении массовой концентрации
образовавшегося НЛДФН. эквивалентной массовой концентрации D-фруктозы в пробе.
     4.2 Р е а к ц и и , п р о и с х о д я щ и е п р и о п р е д е л е н и и D - г л ю к о з ы :

     D -глюкоза + АТФ          ГК } Г-6-Ф + АДФ,                                                       (1)

     Г-6-Ф + НАДФ’ 16Ф Д Г; глюконат-6-фосфат + НДДФН + Нч.                                            <2)
     4.3 Р е а к ц и и ,    происходящие         при о п р е д е л е н и и   D - фруктозы:

     D-фруктоза + АТФ           ГК , Ф-6-Ф + АДФ.

     Ф-6-Ф     ФГИ         Г-6-Ф.                                                                      (4)

     Г-6-Ф + НАДФ*           Г6Ф~ДГ глюконат-6-фосфат + НЛДФН + Н*                                      (5)


     5 Реактивы
      5.1 О б щ и е т р е б о в а н и я
       При проведении анализа используют химически чистые или чистые для анализа реактивы.
      Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов для определения
D-глюкозы и D-фруктозы при условии, что качество реактивов не ниже указанного в настоящем
стандарте.
       Препараты триэтаноламингидрохлорида, дннатрневой соли р-ннкотинамидадениидинуклео-
тидфосфата (|3-НАДФ-№2) и дннатрневой соли аденозин-З'-трнфосфата (АТФ-1Ма2Н2-ЗН20 ) долж­
ны содержать не менее 90 % основного вещества.
      5.2 Б у ф е р н ы й р а с т в о р г и д р о х л о р и д а т р и э т а н о л а м и н а а к т и в н о й
к и с л о т н о с т ь ю 7,6 pH
       14.0 г триэтаноламингидрохлорида и 0,25 г сернокислого магния по ГОСТ 4523 раслюряют в
80 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Активную кислотность раствора устанавливают
равной 7,6 pH приблизительно 5 см3 раствора гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 молярной концент­
рации с (NaOH) = 5 моль/дм3. Объем раствора доводят дистиллированной водой до 100.0 см3.
Буферный раствор устойчив при температуре 4 'С 1 мес.
      5.3 Р а с т в о р Н А Д Ф
      0,06 г дииатрисвой соли р-никотинамцдадениндинуклеотидфосфата (р-НЛДФ-Ма2) растворя­
ют в 6 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Раствор устойчив при температуре 4 *С 1 мес.
      5.4 Р а с т в о р А Т Ф
      0,3 г дннатрневой соли аденозин-5'-трифосфата (АТФ-№ 2Н2-ЗН20 ) и 0,3 г углекислого
кислого натрия по ГОСТ 4201 растворяют в 6 см3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Раствор
устойчив при температуре 4 *С 1 мес.
      5.5 С у с п е н з и я ф е р м е н т о в Г К и Г 6 Ф - Д Г
       Раствор гексокиназы массовой долей 0,002 г/см3 и удельной активностью не менее 280 Е/см3,
содержащий глюкозу в качестве субстрата и АТФ. и раствор глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы массовой
далей 0,001 г/см3 и удельной активностью не менее 140 Е/см3, содержащий глюкозы-6-фосфат в
качестве субстрата, смешивают с раствором сернокислого аммония по ГОСТ 3769 малярной концент­
рации с ((NH4),S04) = 3,2 моль/дм3. Суспензия устойчива при температуре 4 *С 12 мес.
2                                                   130