ГОСТ Р 51239-98

ГОСТ Р 51239-98
                                                                                      (ДИН 1138-94)


                              Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н ЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й С К О Й Ф Е Д Е Р А Ц И И




                                      СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ

                                        Метод определения L-яблочной кислоты


                                                           Издание официальное




                                                          ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                                                М осква




эксклюзивные вязаные жакеты

ГОСТ Р 51239-98

                                       Предисловие

     1 РАЗРАБОТАН Московским государственным университетом пищевых производств

   ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропро­
мышленной продукции на безопасность»

     2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 25 декабря
1998 г. № 462

     3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст национального стандарта ФРГ
ДИН 1138—94 «Фруктовые и овощные соки. Ферментативное определение L-яблочной кислоты.
Спектрофотометрическое определение НАДФ (никотинамндаденнндинуклеотида)» с дополнитель­
ными требованиями, отражающими потребности народного хозяйства (разделы 2. 5. 7, 8 и 9 и
пункты 6.1 и 6.5)

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разре­
шения Госстандарта России
II                                          120

ГОСТ Р 51239-98
                                                                                      (ДИН 1138-94)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                       СТАНДАРТ              РОССИЙСКОЙ                    ФЕДЕРАЦИИ




                               СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ

                               Метод определения L-яблочной кислоты

                      Fruit and vegetable juices. Determination of L-malic acid content




                                                                                   Дата введения 1999—07—01


     1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на фруктовые и овощные соки, нектары и сокосодер-
жашие напитки и устанавливает метод определения массовой концентрации L-яблочной кислоты
в виде свободной кислоты или соли.

     2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 3769—78 Аммоний сернокислый. Технические условия
     ГОСТ 4328—77 Натрия гидроокись. Технические условия
     ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия

     3 Определение, обозначения и сокращения
     3.1 В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определениями:
     массовая концентрация L-яблочной кислоты во фруктовых и овощных соках, нектарах н
сокосодержащих напитках: Массовая концентрация L-яблочной кислоты, определенная в соответ­
ствии с настоящим стандартом и выраженная в г/дм*.
     3.2 В настоящем стандарте применяют следующие обозначения и сокращения:
     НАД — р-никотинамндаденнндинуклеотнд;
     НЛДН — р-никотинамидадениндинуклеотнд (восстановленная форма):
     ГОГ — глугаматоксалоанетаттрансаминаза;
     L-МДГ — L-малатдегидрогеназа;
     Е — международная единица, определяющая количество (активность) фермента, которое
служит катализатором для превращения при 25 'С 1 мкмоля вещества в минуту.

     4 Сущность метода и реакции
     Метод 11, 2| основан на ферментативном преобразовании L-яблочной кислоты в оксалоацетат
под действием НАД в присутствии L-МДГ. смещении равновесия реакции путем связывания
образовавшегося оксалоацетата L-глутаматом в присутствии ГОТ и спектрофотометрическом изме­
рении массовой концентрации образовавшегося НАДН, эквивалентной массовой концентрации
L-яблочной кислоты в пробе |1. 2|.
                                           L-МДГ
                L-яблочная кислота + НАД* f      оксалоацетат + НАДН + Н‘ ,                             ( 1)



                  оксалоацетат + L-глутамат                L-аспартат + а-кетоглутарат.                 ( 2)


Издание официальное
                                                     121                                                   1

ГОСТ Р 51239-98

     5 Реактивы
      5.1 О б щ и е т р е б о в а н и я
      При проведении анализа используют химически чистые или чистые для анализа реактивы.
      Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов ятя определения
L-яблочнон кислоты при условии, что качество реагентов не ниже указанного в настоящем стандарте.
      Препараты глицилглицина, L-глугамнновоЙ кислоты и НАД должны содержать не менее 90 %
основного вещества.
      5.2 Г л и и и л г л и ц и н о в ы й б у ф е р н ы й р а с т в о р а к т и в н о й к и с л о т ­
н о с т и 10.0 pH
      4,75 г глицилглицина и 0.88 г L-глутаминовой кислоты растворяют в 50 см5дистиллированной
воды по ГОСТ 6709. Устанавливают активную кислотность раствора равной 10.0 pH приблизительно
4.6 см3 раствора гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 молярной концентрации с (NaOH) =
10 моль/дм3. Объем раствора доводят дистиллированной водой до 60 см3. Буферный раствор
устойчив при температуре 4 ‘С 3 мес.
      5.3 Р а с т в о р Н А Д
      0,420 г НАД растворяют в 12 см3 дистиллированной воды. Раствор устойчив при температуре
4 *С 1 мес.
      5.4 С у с п е н з и я ф е р м е н т а Г О Т
      Раствор глугаматоксалоацетаттрансаминазы массовой концентрации 0.002 г/см3, содержащий
L-аспартат и а-кетоглутарат в качестве субстрата, смешивают с раствором сернокислого аммония
по ГОСТ 3769 молярной концентрации с ((NH4),S04) = 3,2 моль/дм3. Удельная активность суспен­
зии ГОТ составляет не менее 400 Е/см3. Суспензия устойчива при температуре 4 'С 12 мес.
      5.5 С у с п е н з и я ф е р м е н т а L- М Д Г
      Раствор L-малатдегидрогеназы массовой концентрации 0,005 г/см3 смешивают с раствором
сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации с ((NH4):S 0 4) = 3.2 моль/дм3.
Удельная активность суспензии L-МДГ составляет не менее 6000 Е/см3. Суспензия устойчива при
температуре 4 'С 12 мес.

     6 Аппаратура
      Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.4.
      6.1 Дозаторы пипеточные объемами доз 100, 50 и 25 см' и относительной погрешностью
дозирования т\ % |3| или пипетки градуированные номинальной вместимостью 2.0; 1.0; 0,5; 0.2;
0,1 и 0,02 см3 и допускаемой относительной погрешностью ±1 %.
     6.2 Кюветы фотометрические из оптического стекла или пластмассы толщиной поглощающе­
го слоя I см для измерений при длинах волн 334, 340 или 365 им.
     6.3 Шпатели пластиковые или палочки стеклянные оплавленные длиной от 10 до 15 см для
перемешивания содержимого кюветы при проведении фотометрических измерений.
     6.4 Спектрофотометр или фотометр фотоэлектрический для измерений при длинах волн 334, 340
или 365 нм, допускаемой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания т\ %.
     6.5 Весы лабораторные общего назначения наибольшим пределом взвешивания 20 г и допус­
каемой погрешностью ±0,0001 г.

     7 Проведение испытания
     7.1 П о д г о т о в к а п р о б ы к и с п ы т а н и ю
     Как правило, пробы не нуждаются в особых методах подготовки к испытаниям. Результаты
испытания по настоящей методике выражают в граммах на кубический дециметр.
     Испытания концентрированных продуктов проводят после их разбавления дистиллированной
водой до получения значения относительной плотности разбавленного продукта согласно рецепту­
рам натурального сока, нектара или сокосодержащего напитка. При этом относительную плотность
разбавленной пробы выражают в граммах на кубический дециметр.
     Результаты испытаний концентрированного продукта могут быть также выражены в граммах
на килограмм. При расчете результата испытаний учитывают массу пробы концентрированного
продукта и фактор разбавления.
     При испытании продуктов высокой вязкости и/или с очень большим содержанием мякоти
результаты испытаний выражают в граммах на килограмм продукта.
     Продукты с мутной взвесью перед испытанием хорошо перемешивают.
2                                                122