ГОСТ 30519-97

ГОСТ 3 0 5 1 9 -9 7
                                                                               ГО СТ Р 5 0 4 8 0 -9 3



                               М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й             С Т А Н Д А Р Т




                                           ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

                                    Метод выявления бактерий рода Salmonella


                                                       Издание официальное




                                                   МВЖГОСУДАРСТВВВНЫЙ СОВЕТ
                                         ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
                                                             Мннс к




индивидуальное строительство

ГОСТ 30519—97/ГО С Т Р 5 0 4 8 0 -9 3

                                         Предисловие

   1 РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной
и овощесушильней промышленности (ВНИИКОП) и Техническим комитетом по стандартизации
ГК 93 «Продукты переработки плодов и овощей»

   2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (прото­
кол № 11 от 23 апреля 1997 г.)

  За принятие проголосовали:

           Нанмономанне государства                     Наименование наиноиадыюго органа
                                                                по стандарт»займи

 Республика Беларусь                           Госстандарт Республики Беларусь
 Республика Казахстан                          Госстандарт Республики Казахстан
 Кыргызская Республика                         Кыргьгзстандарт
 Республика Молдова                            Молдовастандарг
 Российская Федерация                          Госстандарт России
 Республика Таджикистан                        Таджикгосстандарт
 Туркменистан                                  Главгосинспскиия «Туркмснстандартлары*
 Республика Узбекистан                         Узгосстандарг


   3 Постановлением Госстандарта России от 16 апреля 1998 г. № 122 ГОСТ 30519—97 введен в дей­
ствие в качестве государственного стандарта Российской Федерации с момента принятия указанного
постановления и признан имеющим одинаковую силу с ГОСТ Р 50480—93 на территории Российской
Федерации в связи с полной аутентичностью их содержания

  4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

  5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения
Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

                                              79                                               II

Груши Н09

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н * !                                 Ы   Й      С Т А Н Д А Р Т


                       ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

                Метол выявления бактерий рола Salmonella                         ГОСТ 30519-97

                               Food products.                                  ГОСТ P 50480-93
                      Method Гог detection of Salmonella

МКС 07.100.30
ОКСТУ9Ю9
                                                                              Дата ввеления 1994—01—01

     Настоящий стандарт распространяется на нишевые продукты и устанавливает метод выяате-
ния в определенной навеске продукта бактерий рода Salmonella.

     1 Сущность метода

      Метод выявления бактерий рода Salmonella основан на высеве определенного количества продук­
та в жидкую неселективную среду, инкубировании посевов, последующем выявлении в этих посевах
бактерий, способных развиваться в жидких селективных средах, образующих типичные колонии на
агаризованных дифференциально-диагностических средах, имеющих типичные для бактерий рода
Salmonella биохимические и серологические характеристики.

     2 Отбор и подготовка проб

     Отбор и подготовка проб - по ГОСТ 26668. ГОСТ 26669 или по нормативно-технической
документации на анализируемый продукт.

     3 Аппаратура, материалы, реактивы

     Для проведения анализа применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 10444.1. а
также указанные ниже:
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104* с
наибольшим пределом взвешивания 200 г. 2-го класса точности (для взвешивания реактивов):
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104
с наибольшим пределом взвешивания 1 кг, 4-го класса точности (для взвешивания продукта);
     микроскоп световой биологический с увеличением 900—1000';
     петлю бактериологическую;
     стекла предметные по ГОСТ 9284;
     стекла покровные по ГОСТ 6672;
     термостат с диапазоном рабочих температур 28 'С -5 5 ' С, позволяющий поддерживать заданную
температуру с допустимой погрешностью ±1 'С.
     спирт нзобугнловый по ГОСТ 9536;
     бриллиантовый зеленый;
     желчь сухую или натуральную;



     * С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001 (здесь и далее).


Издание официальное
      ★

I                                                      80

ГОСТ 30519—97/ГОСТ I* 50480-93

     контрольный штамп бактерий рода Salmonella , не относящихся к тифозной группе:
     магний хлористый по ГОСТ 4209;
     мочевину по ГОСТ 6691:
     сухие агглютинирующие адсорбированные поливалентные сальмонеллезные сыворотки основных
групп А, В. С, D, Е и редких групп;
     феноловый красный.

     4   Подготовка к анализу

      4.1 Приготовление растворов и реактивов
      4.1.1 Раствор бриллиантового зеленого концентрации 5 г/дм3: 0.5 г бриллиантового зеленого
переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор перели­
вают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор
хранят в закрытом сосуде из темного стекла при комнатной температуре не более 3 мес.
      4.1.2 Раствор фенолового красного концентрации 4 г/дм': 0.4 г фенолового красного переносят в
фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную
колбу вместимостью 100 см3 и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор хранят в закрытом
сосуде из темного стекла при комнатной температуре не более 3 мес.
      4.1.3 Реактив Эрлиха: 1,0 г парадиметиламинобензалытегида растворяют в 95 см' этилового
спирта объемной концентрации 96% и прибавляют 80 см3 концентрированной соляной кислоты
(р = 1.18-1.19 г/см3).
      4.1.4 Реактив Ковача: перемешивают 5.0 г парадиметиламинобензальдегида, 25 см3 концентри­
рованной соляной кислоты и 75 см3 изобутилового спирта.
      4.1.5 Спиртовой раствор а-нафтола концентрации 50 г/дм3: 5,0 га-нафтола помещают в колбу
вместимостью 100 см3, растворяют в этиловом спирте объемной концентрации 96 % и доводят раствор
зтнловым спиртом до метки. Раствор готовят непосредственно перед применением.
      4.1.6 Спиртовой раствор фенолового красного концентрации 2 г/дм3: 0.2 г фенолового красного
переносят в колбу вместимостью 100см', растворяют в этиловом спирте объемной концентрации 50 %
и доводят раствор этиловым спиртом до метки.
      4.1.7 Сухие агглютинирующие адсорбционные поливалентные сальмонеллезные сыворотки го­
товят перед употреблением по прописи, указанной в прилагаемом к ним наставлении.
      4.2 Приготовление питательных сред
      4.2.1 Забуференная пептонная вода: 10,0 г пептона, 5,0 г хлористого натрия. 9.0 г дву замещенно­
го фосфорно-кислого натрия (Na3H P 04 • I2H.O). 1,5 г одно замещенного фосфорно-кислого к а т я
растворяют при нагревании в 1000 см3 дистиллированной воды, устанавливают pH так. чтобы после
стерилизации он составлял при температуре 25 "С 7,0±0,1. Разливают по колбам в количестве,
зависящем от навески анализируемого продукта (если навеска равна 25 г. то разливают по 225 см’, то
есть 1 : 9), и стерилизуют при температу ре ( 121 ± I) *С в течение 20 мин.
      4.2.2 Магниевая среда: готовят путем соединения трех растворов.
      Приготовление раствора 1: 8,4 г пептона, 14.3 г хлористого натрия. 40 см3дрожжевого экстракта,
приготовленного по ГОСТ 10444.1. 2,85 г однозамешенного фосфорно-кислого калия растворяют при
нагревании в 1780 см'дистиллированной воды.
      Приготовление раствора 2: 71,4 г хлористого магния (MgCI2 • 6Н.О) расгворяют при нагревании
в 180 см5дистиллированной воды.
      Раствор 3: берут 1.8 см ' раствора бриллиантового зеленого, приготоаленного по 4.1.1.
      Приготовленные растворы соединяют, устанавливают pH так, чтобы после стерилизации он
составлял при температуре 25 "С 7,2±0,2. разливают в колбы или флаконы по 100 см' и стерилизуют
при температу ре (112±1) *С в течение 30 мин.
      4.2.3 Селенитовая среда: готовят из двух растворов.
      Приготоаление раствора 1: 5,0 г пептона. 7,0 безводного двузамещенного фосфорно-кислого
натрия. 3,0 г безводного однозамешенного фосфорно-кислого натрия, 4,0 г.лактозы растворяют при
нагревании в 1000 см' дистиллированной воды, охлаждают до 45 *С —55 “С, если необходимо, путем
изменения соотношения фосфатных солей устанавливают pH 7,0±0,1. Среду рахливают по 100 см3 в
колбы или флаконы и стерилизуют текучим паром по 30 мин в течение двух дней или при температуре
(112+1) *С в течение 30 мин.

                                                 81                                                  2