ГОСТ Р 50455-92

ГОСТР 50455—92
(ИСО 3565—75)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Обнаружение сальмонелл (арбитражный метод)

Издание официальное

Москва

Call Стандартинформ
2010

УДК 637.525.001.4:006.354 Группа Н19

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ ГОСТР
Обнаружение сальмонелл (арбитражный метод) 50455—92
Meat and meat product. Detection of зайтопеНае (Reference method) (HCO 3565—75)
OKC 07.100,30
OKCTY 9209

Дата введения 1994—01—01
1 Назначение
Настоящий стандарт устанавливает метод обнаружения сальмонелл в мясе и мясных продуктах.
2 Область применения
Метод распространяется на все виды мяса и мясные продукты.

3 Ссылка

ГОСТ 9958—81 Изделия колбасные и продукты из мяса. Методы бактериологического анализа

4 Определения

4.1 Сальмонеллы — микроорганизмы, образующие типичные колонии на плотных селектив-
ных питательных средах и имеющие биологические и серологические характеристики, описанные в
настоящем стандарте.

4.2 Обнаружение сальмонелл — определение присутствия или отсутствия этих микроорганиз-
мов в определенном продукте по методу, установленному настоящим станлартом.

5 Сущность метода

Обнаружение сальмонелл проходит в четыре стадии (см. пи. 5.1—5.4), так как они обычно
присутствуют в небольших количествах, иногда в поврежденном состоянии, и часто в сопровожде-
нии большого количества других бактерий их группы.

5.1 Предварительное обогащение — выдерживание пробы в термостате в неселективной жид-
кой среде при температуре 37 °С.

5.2 Обогашение — посев прелварительно обогащенной среды в две жидкие селективные среды
с последующим выдерживанием в термостате при температуре соответственно 37 или 42—43 °С.

5.3 Посев на чашках — пересев двух обогащенных сред на плотные селективно-диагностичес-
кие среды. которые, после выдерживания в термостате при температуре 37 °С. исследуют на наличие
колоний, по своим характеристикам подозрительных на сальмонеллы.

5.4 Подтверждение — пересев подозрительных на сальмонеллы колоний и определение их
биохимических и серологических характеристик.

'Издание официальное
© Издательство станлартов, 1992
© СТАНДАРТИНФОРМ, 2010
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техни-
ческому регулированию и метрологии

1 88

ГОСТР 50455—92

6 Питательные среды и реактивы

6.1 Основные материалы

Для получения сопоставительных результатов рекомендуется использовать безводные компо-
ненты питательных срел одинакового качества, химические препараты аналитического качества или
сухие готовые среды. Используемая вода должна быть дистиллированной или, по крайней мере,
эквивалентной чистоты.

Примечание. Требования к бриллиантовому зеленому даны в приложении. Если используются сухие
готовые среды, их следует готовить и применять в соотнстствии с рекомендацией поставщика.

6.2 Питательные среды
6.2.1 Буферная пептонная вода

Состав:
пептон cone . Юг
хлорид натрия. . 5Юг
гидрофосфат натрия (Na; HPO, 12140). . 906
дигидрофосфат калия (KHyPO,) - . 1,5г
ыы: . 1000 см?

Приготовление: растворяют все компоненты в кипящей воде, устанавливают рН так, чтобы
после стерилизации его значение составляло (7,0=0.1) при 20 °С. Полученный раствор разливают по
225 см? в колбы вместимостью 500 смз.

‘Стерилизуют среду в течение 20 мин при температуре (12121) °C.

6.2.2 Среда тетратионатная (Мюллера-Кауфмана)

6.2.2.1 Основа

Состав:
мясной экстракт . . 5,0г
пептон ..... . 1000г
хлорид натрия. . .30r
карбонат кальция ПР > . 45г
вода ....... ay - 1000 см?

Приготовление: безводные основные компоненты или сухую готовую основу добавляют к воде
и кипятят, Устанавливают рН Tak, чтобы после стерилизации его значение составляло (7,0+0,1) при
20 °С.
‘Стерилизуют основу в течение 20 мин при температуре (12141) °C.
6.2.2.2 Раствор тиосульфата натрия
Состав:
тиосульфат натрия (Ма›$2О;-5Н2О) . 50,0 г
вода до общего объема - 100 см?
Приготовление: тиосульфат натрия растворяют в небольшом количестве воды, а затем доводят
объем до 100 см.
‘Стерилизуют раствор в течение 20 мин при температуре (12141) °С.
6.2.2.3 Йодный раствор

Состав:
Йод. ase . 20,0 г
йодид калия. . 25,0 г
вода до общего объема - 100 см?

Приготовление: растворяют йодид калия в минимальном объеме воды, добавляют йод и
встряхивают до полного растворения. Объем доводят водой до 100 смз.

Раствор хранят в плотно укупоренном сосуде из непрозрачного стекла.

6.2.2.4 Раствор бриллиантового зеленого

Состав:
бриллиантовый зеленый . 0,5г
вода . 100 em?

Приготовление: добавляют бриллиантовый зеленый к воде. Оставляют раствор в темноте не
менее чем на сутки, чтобы обеспечить самостерилизацию.

#9 2

ГОСТР 50455—92

6.2.2.5 Раствор бычьей желчи

Состав:
бычья желчь сухая. Не 10,0 г
вода . . 100 смз

Приготовление: сухую бычью желчь растворяют в кипящей воде.
Стерилизуют раствор в течение 20 мин при температуре (1211) °С.
6.2.2.6 Готовая среда

Состав:

ocho (пб: уклея ЕЕ
раствор тиосульфата натрия (п. 6.2.2.2).
йодный раствор (п. 6.2.2.3).... A
раствор бриллиантового зеленого (п. 6.
раствор бычьей желчи (п. 6.2.2.5) ....... +.

Приготовление: в асептических условиях к основе добавляют компоненты в вышеуказанном
порядке. После каждого добавления жидкость хорошо перемешивают. Разливают готовую среду по
100 смз в стерильные колбы вместимостью 500 см?. Хранят ее при температуре 4 °С в темноте не
более недели.

6.2.3 Срела селенитовая с бриллиантовым зеленым (Стокса и Осборна)

6.2.3.1 Осиова

Состав:

пептон
дрожжевой экстракт
маннит........
таурохолат натрия
гидроселенит натрия
вода...

Приготовление: растворя! р ре ингредиента (т. с, безводные основные компоненты
или сухую готовую основу) в кипящей воде в течение 5 мин. После охлаждения добавляют гидро-
селенит натрия, доводят рН до (7,0+0,1) при 20 °С.

Хранят ее при температуре 4 °С в темноте не более недели.

6.2.3.2 Буферный раствор

Состав:
Раствор А
дигидроортофосфат калия (КН2РО.)................ 34,0 г
DUP ини wy ааа RPO EE ES = 1000 смз

Растворяют дигидроортофоефат калия в воде:
РастворБ
гидроортофосфат калия (К›НРО.).
ВОДА 2 ce eee ene er eee

Растворяют гилроортофосфат калия в воде.

Приготовление: смешивают два объема раствора А и три объема раствора Б, получая раствор
СРН (7,040, 1) при 20 °С.

6.2.3.3 Раствор бриллиантового зеленого

Состав и приготовление этого раствора — по п. 6.2.2.4,

6.2.3.4 Готовая среда

Состав:

основа (п. 6.2.3.1) -. 900 см?
буферный раствор (п. 6.2.3.2) . РОЯ . 100 см?
раствор бриллиантового зеленого (п. 6.. 2. 3. 3) И Тем?

Приготовление: к основе добавляют буферный раствор, нагревают до 80 °С. охлаждают и
добавляют раствор бриллиантового зеленого. Разливают готовую среду по 100 см? в стерильные
колбы вместимостью 500 см*.

Используют среду в день приготовления.

6.2.4 Агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным (Эделя и Кампельмахера)

6.2.4.1 Основа

Состав:

мясной экстракт .
пептон