ГОСТ 30518-97

ГОСТ 30518—97
                                                                                      ГОСТ Р 50474-93


                                      М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й             С Т А Н Д А Р Т




                                                  ПРОДУКТЫ П И Щ ЕВ Ы Е

                                               Методы выявления и определения
                                         количества бактерий группы кишечных палочек
                                                    (колиформных бактерий)


                                                              Издание официальное




                                                         МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ
                                                ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
                                                                    .VI и н с к




энергетическая эффективность зданий

ГОСТ 30518-97/ГО СТ 1* 50474-93

                                           Предисловие

   1 РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и
овощесушильной промышленности (ВНИИКОП) и Техническим комитетом по стандартизации
ГК 93 «Продукты переработки плодов и овощей*

   2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (прото­
кол № 11 от 23 апреля 1997 г.)

          За принятие проголосовали:


               Найме нова мнс гоодарства                 Наименование национального органа
                                                                 по стандартизации

      Республика Беларусь                      Госстандарт Республики Беларусь
      Республика Казахстан                     Госстандарт Республики Казахстан
      Кыргызская Республика                    Кыргьгзстандарт
      Республика Молдова                       Молдовастандарг
      Российская Федерация                     Госстандарт России
      Республика Таджикистан                   Таджиксгандарг
      Туркменистан                             Главгосслужбз «Туркмснстандартлары*
      Республика Узбекистан                    Узгосстамдарт

   3 Настоящий стандарт соответствует ИСО 4831-78 «Микробиология. Общее руководство по
подсчету колибактернй. Методика расчета наиболее вероятного значения посте инкубации при 30 "С* и
ИСО 4832—78 «Микробиология. Общее руководство по подсчету колиформ. Метод подсчета
колоний при температуре 30 ‘С* в части сущности методов

   4 Постановлением Госстандарта России от 16 апреля 1998 г. № 122 ГОСТ 30518—97 введен в
действие в качестве государственного стандарта Российской Федерации с момента принятия указанно­
го постановления и признан имеющим одинаковую силу с ГОСТ Р 50474—93 на территории Россий­
ской Федерации в связи с полной аутентичностью их содержания

      5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

      6 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения
Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

 II                                            72

Группа Н09

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н * !                                   Ы    Й        С Т А Н Д А Р Т


                         ПРОДУКТЫ П И Щ ЕВ Ы Е

      Методы выявления и определения количества бактерий 1рунпы                       ГОСТ 30518-97
             кишечных палочек (колиформных бактерий)
                                                                                     ГОСТ P 50474-93
  Food products. Methods for detection and quantity determination of coliformes

MKC 07.100.30
ОКСТУ 9109

                                                                                  Дата введения 1994—01—01


     Настоящий стандарт распространяется на нишевые продукты и устанавливает метод выявления в
определенной навеске нишевого продукта колиформных бактерий и три метода определения их коли­
чества: метод наиболее вероятного числа (НВЧ) и методы посева в или на агариэованные селективно-
диагностические среды.
     Метод определения НВЧ колиформных бактерий предназначен для пищевых продуктов, содер­
жащих в 1 г твердого продукта менее 150 или в 1 см' жидкого продукта менее 15 клеток колиформных
бактерий.
     Метод определения количества колиформных бактерий посевом в агариэованные селективно-
диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в I г твердого продукта
более 150 или в 1 см5 жидкого продукта более 15 колониеобразующих единиц (КОЕ) колиформных
бактерий.
     Метод определения количества колиформных бактерий посевом на агариэованные селективно-
диагностические среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта
более 1500 или в I см3 жидкого продукта более 150 КОЕ колиформных бактерий.

     1 Сущность методов
      Методы выявления и определения наиболее вероятного числа колиформных бактерий основаны
на высеве определенного количества продукта и (или) разведений навески продукта в жидкую селек­
тивную среду с лактозой, инкубировании посевов, учете положительных пробирок (колб), пересеве,
при необходимости, культуральной жидкости на поверхность агаризованной селективно-диагности­
ческой среды для подтверждения по биохимическим и культуральным признакам роста принадлежно­
сти выделенных колоний к калиформным бактериям.
      Методы определения количества колиформных бактерий посевом в (на) агаризованные селек­
тивно-диагностические среды основаны на высеве определенного количества продукта или его разве­
дений в или на агаризованную селективно-диагностическую среду с лактозой, инкубировании посе­
вов, подсчете типичных колоний, подтверждении, при необходимости, по биохимическим признакам
принадлежности выделенных колоний к калиформным бактериям.

     2 Отбор и подготовка проб
     Отбор и подготовка проб - по ГОСТ 26668. ГОСТ 26669.




Издание официальное
        ★


                                                      73                                                     I

ГОСТ 30518-97/ГО СТ 1* 50474-93

     3 Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды
      3.1 Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 10444.1
со следующими дополнениями:
      весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 241044 с
наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности (для взвешивания реактивов):
      весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по
ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 1 кг, 4-го класса точности (для взвешивания
продукта):
      микроскоп световой биологический с увеличением 900-1000*;
      петля бактериологическая;
      поплавки (трубки Дархема);
      стекла предметные по ГОСТ 9284;
      термостат с диапазоном рабочих температур 28 "С—55 С. позволяющий поддерживать заданную
температуру с допустимой погрешностью ±1 “С;
      бриллиантовый зеленый;
      генциан виолет:
      желчь говяжья сухая или натуральная;
      метиловый фиолетовый;
      феноловый красный.
      3.2 Для проведения испытания применяют питательные среды:
      агар лактозный с бриллиантовым зеленым и феноловым красным;
      бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью;
      бульон Мак-Конки;
      бульон Кесслер;
      среду Эндо.

     4 Подготовка к испытанию
      4.1 Приготовление растворов
     4.1.1 Щелочной раствор бромкрезолово! о пурпурного концентрацией 10 г/дм': 1 г бромкрезодо-
вого пурпурного переносят в фарфоровую ступку с 19 см* раствора гидроокиси натрия с (NaOH) =
= 0.1 моль/дм5 и после растворения добавляют 80 см’ дистиллированной воды.
      4.1.2 Раствор бриллиантового зеленого концентрации 5 г/дм1: 0,5 г бриллиантового
зеленого переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде.
Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см5 и доводят дистиллированной водой
до метки.
      4.1.3 Раствор генцнаивиолета или кристаллического фиолетового, или метилового фиолетового
концентрацией 10 г/дм3: 1 годной из анилиновых красок переносят в фарфоровую ступку и постепен­
но растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и
доводят дистиллированной водой до метки.
      4.1.4 Раствор фенолового красного концентрации 2 г/дм3: 0,2 г фенолового красного переносят в
фарфорову ю ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную
колбу вместимостью НК) см5 и доводят дистиллированной водой до метки.
      4.1.5 Растворы, приготовленные по 4.1.1—4.1.4, хранят в закрытых сосудах из темного стекла
при комнатной температуре не более 3 мес.
      4.1.6. Растворы и реактивы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1.
      4.2 Приготовление питательных сред
      4.2.1       Агар лактозный с бриллиантовым зеленым и феноловым красным: 3,0 г мясного экстракта,
10,0 г пептона, 10.0 г лактозы. 5,0 г хлористого натрия, 0,5 г фосфорнокислого дву замещенного
калия. 15,0 г агара добаатяют к 1000 см3дистиллированной воды. При отсутствии мясного экстракта

     * С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001 (здесь и далее).

2                                                   74