ГОСТ Р 52832-2007

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                        ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                                НАЦИОНАЛЬНЫЙ                   ГОСТР
                                   СТАНДАРТ                    52832   -

                                 РОССИЙСКОЙ
                                  ФЕДЕРАЦИИ
                                                               2007
                                                               (ИСО 8870:2006)




                            МОЛОКО И ПРОДУКТЫ
                            НА ОСНОВЕ МОЛОКА

                     Обнаружение термонуклеазы,
                 образуемой коагулазоположительными
                           стафилококками

                                         ISO 8870:2006
              Milk and milk-based products — Detection of thermonuclease produced
                               by coagulase-positive staphylococci
                                             (MOD)



                                      Издание официальное




                                         -Л       Москва
                                         'Г
                                         Y]   Стандартинформ
                                         —J        2010




энергоаудит

ГОСТ Р 52832—2007

                                         Предисловие
     Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от
27 декабря 2002 г. №184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных
стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0—2004 «Стандартизация в Российской Федерации.
Основные положения»

     Сведения о стандарте

     1 ПОДГОТОВЛЕН ОАО «Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации»
совместно с ГУ Ярославской области «Ярославский государственный институт качества сырья и пище­
вых продуктов» на основе аутентичного перевода международного стандарта, указанного в пункте 4

     2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропромыш­
ленной продукции на безопасность»

     3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому
регулированию и метрологии от 27 декабря 2007 г. N» 459-ст

     4 Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к международному стандарту
ИСО8870:2006 «Молоко и продукты на основе молока. Обнаружение термонуклеазы. образуемой коагу-
лазоположительными стафилококками» (ISO 8870:2006 «Milk and milk-based products — Detection of
thermonuclease produced by coagulase-positive staphylococci»). При этом дополнительные слова, фразы,
показатели и их значения, включенные в текст стандарта для учета потребностей национальной эконо­
мики Российской Федерации и особенностей российской национальной стандартизации, выделены в
тексте стандарта курсивом

     5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     6 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Сентябрь 2010 г.



     Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом
информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежеме­
сячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случав пересмотра
(замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано
в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответст­
вующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе обще­
го пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию
и метрологии в сети Интернет




                                                                        © Стандартинформ. 2008
                                                                      © СТАНДАРТИНФОРМ. 2010

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и рас­
пространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии

ГОСТ Р 52832—2007
                                                                                                         (ИСО 8870:2006)


Н А Ц И О Н А Л Ь Н Ы Й                      С Т А Н Д А Р Т           Р О С С И Й С К О Й              Ф Е Д Е Р А Ц И И



                                      МОЛОКО И ПРОДУКТЫ НА ОСНОВЕ МОЛОКА

      Обнаружение термоиуклеазы, образуемой коагулазоположительными стафилококками

                                    M ilk and m ilk-based p roducts — Detection o f therm onuclease
                                             produced by coagulase-positive staphylococci



                                                                                              Д ата в в е д е н и я — 2009— 01 — 01



        1 Область применения
     Настоящий стандарт устанавливает качественный мотод определения термоиуклеазы, образу­
емой коагулазоположительными стафилококками в молоке и продуктах на основе молока.
     Наличие в молоке и продуктах на основе молока термоиуклеазы может использоваться как
индикатор достижения роста стафилококков опасного уровня и отражать вероятное присутствие ста­
филококкового энтеротоксина.

        2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ Р ИСО 7218— 2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие
требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям
     ГОСТ Р 53430—2009 Молоко и продукты переработки молока. Методы микробиологического
анализа
     ГОСТ 26809—86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка
проб к анализу
       П р и м е ч а н и е — П ри пользовании настоящ им стандартом цел есообразно проверить д ействие с сы л о ч­
н ы х стандартов в инф орм ационной систем е общ его пользования — на оф ициальном сайте Ф едерального
агентства по техническом у р егулированию и метрологии в сети И нтернет или по еж егодно и здаваем ом у инф орм а­
ционном у указателю «Н ациональны е стандарты », которы й опубликован по состоянию на 1 января текущ его года, и
по соответствую щ им еж ем есячно издаваемы м инф орм ационны м указателям , опубликованны м в текущ ем году.
Если ссы лочны й стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящ им стандартом следует руковод ство­
ваться заменяю щ им (изм ененны м ) стандартом . Если ссы лочны й стан да рт отменен без замены , то положение, в
котором д ан а ссы лка на н его, прим еняется в ч асти, не затрагиваю щ ей эту ссы лку.


        3 Термины и определения
     В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
     3.1       термонуклеаза (thermonuclease): Фермент, образуемый коагулазоположительными стафи­
лококками. гидролизирующий дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) при условиях, описанных в насто­
ящем стандарте.

        4 Сущность метода
     Метод основан на расщеплении ДНК термонуклеазой, при котором цвет агара изменяется с синего
на розовый. Цветная реакция обусловлена метахроматическими свойствами толуидинового синего О.

И зд ан и е о ф и ц и а л ь н о е

                                                                                                                                  1

ГОСТ Р 52832—2007

     5    Подготовка к испытанию

          5.1 Основные материалы
          Для текущей лабораторной практики см. ГОСТР 53430.
          Используют реактивы только аналитического качества, если не оговорено иначе, и только дистил­
лированную или деминерализованную воду, или воду аналогичной чистоты.
          Если приготовленные среды и реактивы не используют немедленно, их хранят, если не оговорено
иначе, в защищенном от света месте при температуре от 0 °С до 5 °С не более 1 мес в условиях, пред­
отвращающих любые изменения в их составе.
          5.2 Толуидиновы й синий О-ДНКагар
          5.2.1 Трис-буфор
          5.2.1.1 Состав:
          трис(гидроксиметил)аминометан (С4Н ,, N 03) — 6.06 г :
          хлорид кальция (СаС12) — 0,11 г;
          вода — 1000 см3.
          5.2.1.2 Приготовление
          Растворяют трис(гидрокси метил )а ми нометан и хлорид кальция в 980 см3воды. Доводят pH до 9.0 и
воду до 1000 см3.
          5.2.2 Основа среды
          5.2.2.1 Состав.
          дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) — 0,3 г.
          хлорид натрия (NaCI) — 10,0 г ;
          агар— Ю.Ог:
          трис-буфер (см. 5.2.1)— 1000 см3.
          5.2.2.2 Приготовление
          Компоненты нагревают на водяной бане (см. 6.2) до полного растворения ДНК и агара (около 1,5 ч).
          5.2.3 Раствор толуидинового синего О
          5.2.3.1 Состав:
          толуидиновый синий О (C15H16N3SCI) — 0,31 г;
          вода — 10 см3.
          5.2.3.2 Приготовление
          Толуидиновый синий О растворяют в воде при слабом нагревании и фильтруют через марлю (см.
6 . 12 ).
          5.2.4 Полная среда
          5.2.4.1 Состав:
          основа среды (см. 5.2.2) — 1000 см3:
          раствор толуидинового синего О (см. 5.2.3) — 3 см3.
          5.2.4.2 Приготовление
          Основу среды охлаждают до (50 ± 1) °С, добавляют профильтрованный раствор толуидинового
синего О и перемешивают.
          Полная среда может храниться маленькими порциями в закупоренных колбах или бутылях
несколько месяцев в защищенном от света месте при температуре от 0 °С до 5 °С.
          5.2.5 Приготовление чашек со средой
          В чашки Петри (см. 6.8) вносят по 13 см3 свежей полной среды (см. 5.2.4) или хранившейся среды,
предварительно расплавленной при (50 i 1) °С. Дают агару застыть.
          Приготовленные среды могут храниться не болов 2 мес (дном кверху и защищенными от высыха­
ния) в защищенном от света месте при температуре от 0 °С до 5 °С.
          5.3 Соляная кислота. с(НС1) = 2 моль/дм3
          5.4 Гидроокись натрия, с (NaOH) * 2 моль/дм3
          5.5 Трихлоруксусная кислота, с (СС13СООН) = 3 моль/дм3.
          Растворяют 49,02 г трихлоруксусной кислоты в 100 см3 воды.
          5.6 Обезжиренное сухое молоко
          Обезжиренное сухое молоко должно быть свободно от термоиуклеаэы. Наличие термонуклеазы
проверяют в каждой новой партии, используя метод, приведенный в настоящем стандарте.
2