ГОСТ Р 51197-98

ГОСТ Р 51197-98
                                                                                   (ИСО 4133-79)


                           ГОСУДАРСТВЕННЫЙ   СТАНДАРТ Р О С С И Й С К О Й             ФЕДЕРАЦИИ




                                 М ЯСО И М Я С Н Ы Е П РО ДУ КТЫ

                                 Метод определения глюконо-8-лактона


                                               Издание официальное




                                                              М осква
                                                       С та н д а р ти н ф о р м
                                                                2010




гигиеническое заключение

ГОСТ Р 5 1 1 9 7 -9 8

                                        Предисловие

      1 РАЗРАБОТАН Московской государственной академией пищевых производств

    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропро­
мышленной продукции на безопасность»

     2 П РИ Н ЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 28 августа
1998 г. № 335

     3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст международного стандарта
ИСО 4133—79 «Мясо и мясные продукты. Определение содержания глюконо-5-лактона* с допол­
нительными требованиями, отражающими потребности экономики страны (6.6, 6.8. 6.12, 7.1 и 9.1)

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Январь 2010 г.




                                                        © И ПК Издательство стандартов. 1998
                                                              © СТАНДАРТИНФОРМ , 2010

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техни­
ческому регулированию и метрологии
II                                           ПО

ГОСТ Р 51197-98
                                                                                    (ИСО 4 1 3 3 -7 9 )


ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                     СТАНДАРТ             РОССИЙСКОЙ                    ФЕДЕРАЦИИ

                                МЯСО И М ЯСН Ы Е ПРОДУКТЫ

                               Метод определения глюконо-6-лактома

                                        Meat and meat products.
                          Method lor determination of glucono-S-iactonc content




                                                                                  Д а та введения 2000—0 1 —01


     1 Область применения

     Настоящий стандарт распространяется на мясо и мясные продукты и устанавливает метод
определения глюконо-5-лактона.


     2 Нормативные ссылки

     ГОСТ 9793—74 Продукты мясные. Методы определения влаги
     ГОСТ Р 51447—99 (ИСО 3100-1—91) Мясо и мясные продукты. Методы отбора проб


     3 Определение

     Массовая доля глюконо-5-лактона — массовая доля глюконо-5-лактона, определенная в соот­
ветствии с настоящим стандартом и выраженная в процентах.


    4 Сущность метода

     Глюконо-6-лактон экстрагируют из пробы продукта, взятой на испытание, ледяным раствором
хлорной кислоты. Смесь центрифугируют, фильтруют, затем проводят гидролиз глюконо-5-лактона,
содержащегося в фильтрате, гидроксида калия с образованием глюконата.
     Преобразуют глюконат в 6-фосфоглюконат в ходе реакции с аденозин-5-трифосфатом (АТФ)
в присутствии глюконаткнназы (ГК):

                            ГК
     глюконат + А Т Ф ............. > 6-фосфоглюконат + АДФ.

     Восстанавливают 6-фосфоглюкопатом эквивалентное количество никотинамидадениндинук-
леотилфосфата (НАДФ) в присутствии 6-фосфоглюконатдегидрогеназы (6-ФГДГ):

                               6-ФГДГ
    6-фосфоглюконат + Н А Д Ф *................ > НАДФН + СО, + Н ‘ + рибулозо-5-фосфат.

     Измеряют массовую долю образовавшейся восстановленной формы никотинамидаденинди-
нуклеотидфосфата (НАДФН) на спектрофотометре при длине волны 365 нм.



Издание официальное
                                                  III                                                        I

ГОСТ Р 5 1 1 9 7 -9 8

     5 Реактивы

     Все реактивы должны быть аналитического качества (не ниже х.ч.). Все растворы, кроме
растворов неорганических соединений (5.1 и 5.2), должны храниться в закрытой посуде из темного
стекла, тщательно вымытой и пропаренной или стерилизованной.
     Вода, используемая для приготовления растворов ферментов, должна быть деминерализован­
ной или бидистиллированной, полученной в стеклянном дистилляторе.
     Вода, используемая для приготовления растворов химических реагентов и подготовки проб,
должна быть дистиллированной или деминерализованной.
     П р и м е ч а н и е — Однократно дистиллированная вода может содержать ионы металлов, которые
снижают активность ферментов, а деминерализованная вода может содержать микроорганизмы, увеличиваю­
щие неспецифическую <|юноиую ферментативную активность и искажающие результаты анализа.
     Препарат НЛДФ должен содержать не менее 90 % основного вещества.
     Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов при условии
соответствия их качества требованиям настоящего стандарта.
     5.1 Раствор хлорной кислоты с (НСЮ 4) = 0,4 моль/дм3
     17,3       см 3 раствора хлорной кислоты массовой доли 70 % и плотности 1.67 г/см 3 помещают в
мерную колбу вместимостью 500 см3 и доводят объем раствора до метки водой.
     П р и м е ч а н и е — При использовании хлорной кислоты меньшей массовой доли проводят перерасчет
обьсма кислоты, используемого для (каждения белков.
     5.2 Раствор гидроксида калия с (КО Н ) = 2 моль/дм3
     Растворяют 56,1 г гидроксида калия в воде, доводят объем раствора до 500 см 3.
     5.3 Буферный раствор активной кислотности 8,0 pH
     Растворяют 2.64 г глицилглицина (C4HxN;0 3) и 0.284 г хлорида магния гексагидрата
(MgCI, • 6 Н ,0 ) в 150 см3 воды. Устанавливают активную кислотность раствора 8,0 pH при 20 *С
раствором гидроксида калия (5.2). используя для измерений pH -метр. Доводят объем раствора до
200 см3.
     Раствор устойчив не менее 1 мес при температуре 4 *С.
     5.4 Раствор НАДФ
     Растворяют 50 мг д и натриевой соли i«и коти нам идадени иди нуклеотид фосфор ной кислоты
(НАДФ-N a,) в 5,0 см3 воды.
     Раствор устойчив не менее 1 мес при температуре 4 "С.
     5.5 Раствор адено зим-5-трифосфа га (А'ГФ)
     Растворяют 250 мг дннатрневой соли аденозин-5-трнфосфорной кислоты (Л ГФ -N a,) и 250 мг
гидрокарбоната натрия (N aH C O ,) в 5.0 см ' воды.
     Раствор устойчив не менее I мес при температуре 4 “С.
     5.6 Суспензия 6-ФГДГ
     Используют поставляемую в готовом виде суспензию 6-фосфоглюконатдегндрогеназы из дрож­
жей. содержащую 6-ФГДГ концентрации 2.0 мг/см3 и удельной активности не менее 220 Е/см3, а
также глюконат киназу и НАДФН-оксидазу массовых долей не более 0,05 % каждого.
     Суспензия устойчива не менее 6 мес при температуре 4 *С.
     5.7 Суспензия ГК
     Используют поставляемую в готовом виде суспензию глюконаткиназы из E.coli, содержащую
ГК концентрации 1,0 мг/см3 и удельной активности не менее 26 Е /см 3 и НЛДФН массовой доли не
более 0,05 %.
     Суспензия устойчива не менее 6 мес при температуре 4 *С.


     6 Средства контроля и вспомогательные устройства

     Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.11.
     6.1 Мясорубка механическая лабораторная, снабженная перфорированной пластинкой с от­
верстиями диаметром не более 4 мм.
     6.2 М иксер лабораторный.
     6.3 Центрифуга лабораторная с пробирками номинальной вместимостью 50 иди 100 см ’.
2                                                112