ГОСТ 7702.2.4-93

ГОСТ 7702.2.4-93

                          М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й                   С Т А Н Д А Р Т




                                 МЯСО ПТИЦЫ, СУБПРОДУКТЫ
                                 И ПОЛУФАБРИКАТЫ ПТИЧЬИ

                              Методы выявления и определения количества
                                        Staphylococcus aureus


                                                    Издание официальное




                                             М ЕЖ ГОСУДАРСТВЕННЫ Й с о в е т
                                    НО СТАНДАРТИЗАЦИИ, М ЕТРО Л О ГИ И И СЕРТИФ ИКАЦ ИИ
                                                          Минск




каркасное строительство

ГОСТ 7702.2.4-93

                                           Предисловие

      1 РАЗРАБОТАН Госстандартом России

     ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного совета по стандартизации, мет­
рологии и сертификации

     2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации
21 октября 1993 г.

      За принятие проголосовали:

               Наименонамне гос уда(член          Наименование национального органа по стандартизации

    Республика Беларусь                           Госстандарт Республики Беларусь
    Кыргызская Республика                         Кыргызстаиларт
    Республика Молдова                            М олдовастандарт
    Российская Федерация                          Госстандарт России
    Республика Таджикистан                        Талжикстанларг
    Туркменистан                                  Главгосслужба «Туркмсистандартлары»

     3 Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и серти­
фикации от 02.06.94 № 160 межгосударственный стандарт ГОСТ 7702.2.4—93 введен в действие не­
посредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 01.01.95

      4 ВЗАМЕН ГОСТ 7702.2—74 в части метода выявления стафилококков

      5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июнь 2009 г.




                                                                  €> Издательство стандартов. 1994
                                                                    © СТЛНДЛРТИНФОРМ. 2009

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техни­
ческому регулированию и метрологии
н

ГОСТ 7702.2.4-93
УД К 6 3 7 .5 4 .5 7 6 .8 .0 7 :0 0 6 .3 5 4                                                                Группа   Н19

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й                                                         С Т А Н Д А Р Т


                       МЯСО ПТИЦЫ, СУБПРОДУКТЫ И ПОЛУФАБРИКАТЫ ПТИЧЬИ

                           Методы выявления и определения количества Staphylococcus aureus

                                          Poultry meat, edible offal, rcady-to-cook products.
                              Methods for detection and quantity determination of Staphylococcus aureus

M КС 67.120.20
ОКСТУ 9209

                                                                                              Д ата введения 1995—01 —01



      Настоящий стандарт распространяется на предназначенные для реализации и промышленной
переработки:
      мясо птииы в виде потрошеных, полулотрошеных и потрошеных с комплектом потрохов и
шеей тушек, частей, полученных при их разделке, а также обваленное и измельченное:
      субпродукты и полуфабрикаты птичьи.
      Стандарт устанавливает методы выявления Staphylococcus aureus и определения их количества.
      Метод выявления S. aureus основан на высеве определенного количества продукта или смывов
с его поверхности и (или) их разведений на элективные питательные среды с повышенным содержа­
нием хлорида натрия или с добавлением хлорида лития и подтверждении принадлежности вырос­
ших микроорганизмов к S. aureus по реакции коагулирования плазмы крови кролика.
      Метод определения количества посевом в агариэованную среду предназначен дтя проб, содер­
жащих в I г более 150 КОЕ или в 1 см3 более 15 КОЕ S. aureus.
      Метод определения количества S. aureus посевом в жидкие питательные среды основан на ме­
тоде наиболее вероятного числа(НВЧ) и предназначен для проб, содержащих в 1 г продукта менее
150 КОЕ, но в 10 г более 3 КОЕ или в 1 см3 смыва менее 15 КОЕ. но в 100 см3 смыва более 3 КОЕ.

         1 Методы отбора проб и подготовка к исследованиям — по ГОСТ 7702.2.0/
         Р 50396.0

        2 Проведение исследования
      2.1 Выявление S. aureus
      2.1.1 Из продукта или его смывов в солевой бульон по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.4.31
проводят посев из исходного разведения или последующих 10-кратных разведений в соотношении к
питательной среде 1:9. При этом при выделении S. aureus из 1 г продукта используют 10 см3 его первого
разведения. Посевы инкубируют при температуре (37i 1) *С в течение 18—24 ч, затем пересевают по­
верхностным методом на одну из агарнзованных сред: агар Байрд-Паркер, яично-желточный соле­
вой агар, яично-желточный азидный агар по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.4.32—2.4.34.
      2.1.2 Посевы на агарнзованных средах просматривают после 18—24 ч инкубирования при
температуре (37*1) *С.
      На среде Байрд-Паркер S. aureus растут в виде черных блестящих выпуклых колоний диамет­
ром 1—1,5 мм. окруженных зоной лецитнназной активности в виде просветления среды шириной
1—3 мм вокруг колоний.
      На яично-желточном солевом агаре и на яично-желточном азидном агаре колонии S. aureus
белого и различного оттенка желтого цвета обычно с образованием вокруг колоний зоны лецити-
назной активности.
      2.1.3 Для подтверждения принадлежности обнаруженных колоний к S. aureus не менее чем
из 5 колоний готовят мазки с окраской по Граму по ГОСТ 30425. При микроскопировании уста-

И здание официальное

                                                                                                                       I

ГОСТ 7702.2.4-93

                   навливают колонии с мелкими собранными в гроздья грамположительными кокками. Из 5 колоний
                   стафилококков проводят пересев на скошенный питательный агар по ГОСТ 7702.2.0/
                   ГОСТ Р 50396.0, 2.4.1; 2.4.4. Посевы термостатируют при температуре (37±1) *С в течение 18—24 ч.
                   Проверяют по мазкам, окрашенным по Граму, чистоту культуры выделенных стафилококков на
                   скошенном агаре.
                         2.1.4      Выделенные чистые культуры стафилококков проверяют на способность коагулировать
                   плазму крови кролика.
                        Для этого разведенную плазму крови кролика по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0. 2.3.24 раз­
                   ливают по 0.5 см3 в стерильные пробирки. В нее вносят по петле анализируемых культур, оставляя
                   одну пробирку с разведенной плазмой крови, не засеянной в качестве контроля. Внесенную культу­
                   ру тщательно перемешивают и инкубируют при температуре (37*1) *С в течение 3—6 ч. Если через
                   6 ч коагуляции плазмы не произошло, то пробирки оставляют при температуре (30±0,5) ‘С на 24 ч.
                   При отсутствии свертывания плазмы или появлении отдельных нитей через 24 ч исследуемую куль­
                   туру стафилококков относят к коагулазоотрнцательной. Реакцию считают положительной при об­
                   разовании даже небольшого компактного сгустка. При получении положительной реакции
                   плазмокоагуляции считают, что в посевах обнаружен S. aureus.
                        2.2 Определение количества S. aureus
                         2.2.1 При определении количества S. aureus посевом на агаризованную среду по 0,1 или
                   0,2 см3 разведения продукта или смыва наносят на поверхность двух параллельных чашек Петри с
                   одной из сред: агар Байрд-Паркер, яично-желточный солевой агар, яично-желточный азидный агар.
                   Посевы немедленно равномерно растирают по поверхности шпателем            изогнутой стеклянной
                   палочкой. Посевы подсушивают, инкубируют чашки с посевами дном вверх при температуре
                   (37±1) *С в течение 18—24 ч.
                         Отбирают чашки, на которых выросло от 15 до 150 характерных колоний. Не менее 5 колоний
                   используют для подтверждения их принадлежности к S. aureus.
                         2.2.2 При определении количества S. aureus по методу НВЧ высевают в солевой бульон три
                   последовательных 10-кратных разведения. Каждое разведение в 3-кратной повторности. Инкубиро­
                   вание и анализ проводят, как указано в 2.1.1—2.1.4.

                        3 Обработка результатов
                        3.1 Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
                        3.2 При обнаружении роста характерных черных колоний на среде Байрд-Паркера или коагу-
                   лазоположительных стафилококков на яично-желточном солевом агаре или на яично-желточном
                   азидном агаре дают заключение о присутствии S. aureus в исследуемой пробе продукта.
                        3.3 Результаты записывают следующим образом.
                        3.3.1 При выделении S. aureus из продукта или смыва записывают: S. aureus обнаружен или не
                   обнаружен, при этом указывается навеска продукта в граммах или объем смыва в кубических санти­
                   метрах. или плошадь смыва в квадратных сантиметрах.
                        3.3.2 При определении количества микроорганизмов посевом на агаризованные среды под­
                   счет проводят по ГОСТ 7702.2.I/ГОСТ Р 50396.1, 3.2: при посеве в жидкую питательную
                   среду - по ГОСТ 30425.
                        3.3.3 Результаты количественного определения S. aureus записывают, как указано в
                   ГО С Т 7702.2. i/Г О С Т Р 50396.1. 3.3.




                                                                    ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

                              ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

                          О бозн ачен и е Н Т Д . на которы й л ак а ссы лка                                     Н ом ер пункта


                       ГОСТ   7 7 0 2 .2 .0 — 9 5 / Г О С Т Р 5 0 3 9 6 . 0 - 9 2   1; 2 .1 .1 ; 2 .1 .3 ; 2 .1 .4
                       ГОСТ   7 7 0 2 .2 .1 — 9 5 / Г О С Т Р 5 0 3 9 6 . 1 - 9 2   3 .3 .3
                       ГОСТ   3 0 4 2 5 -9 7                                        2 . 1 . 3 ; 3 .3 .2


ГОСТ 7702.2.4-93

                   2