ГОСТ 29177-91

ГОСТ 29177-91


                         М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й            С Т А Н Д А Р Т




                                                 ЗЕРНО
                                    МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ
                                    (СТЕПЕНИ ДЕСТРУКЦИИ) КРАХМАЛА



                                               Издание официальное
                       БЗ 12-2003




                                          ИПК ИЗДАТЕЛЬСТВО СТАНДАРТОВ
                                                    Москва




ошибки строительства

УДК 633.1.001.4:006.354                                                                           Группа С 19


М   Е   Ж    Г   О   С    У   Д    А   Р   С   Т   В   Е   Н      Н   Ы   Й      С Т А Н Д А Р Т

                                  ЗЕРНО

 Методы определения состояния (степени деструкции) крахмала                           ГОСТ
                               Grain.
                                                                                    29177-91
         Methods of determining the destruction grade of starch

MKC 67.060
ОКСТУ 9809


                                                                                       Дата ввеления 01.01.93


      Стандарт распространяется на необработанное зерно, а также на зерно, подвергнутое рахтич-
ным способах» гидротермической обработки (микронизация. экструдирован не, поджаривание и т.п.),
>i устанавливает метод определения деструкции крахмала.

                                               1. ОТБОР ПРОБ

     Отбор проб - по ГОСТ 13586.3.

                     2.   ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕПЕНИ ДЕСТРУКЦИИ КРАХМАЛА
                                      (Основной метод)

     Сущность метода заключается в определении степени гидролиза углеводного комплекса зерна
с помощью фермента глюкоамилазы и определении глюкозы, получаемой в результате деструкции
крахмала.
     2.1. Аппаратура, материалы и реактивы
     Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104* 2-го класса точности с допускаемой
погрешностью взвешивания ±0,01 г.
     Мельница лабораторная электрическая.
     Термостат биологический.
     Плитка электрическая.
     Пипетки исполнения 2; 2-го класса точности, вместимостью 1 см1, 5 см3, 20 см3 по ГОСТ 29227.
     Пипетки градуированные по ГОСТ 29227 исполнений 1,4. 7.
     Колбы мерные исполнений I, 2; вместимостью 100 см3, 1000 см3 2-го класса точности по
ГОСТ 1770.
     Стаканы химические по ГОСТ 25336.
     Цилиндры исполнения 1 вместимостью 100, 250. 500 см3 по ГОСТ 1770.
     Колбы мерные.
     Колбы конические вместимостью 150 см3 по ГОСТ 25336.
     Сито с отверстиями диаметром I мм.
     Бюретки для титрования, исполнения 1 и 3. 2-го класса точности с пеной деления 0.1 см3 по
ГОСТ 29251.
     Воронки стеклянные для фильтрования по ГОСТ 25336.
     Часы сигнальные или песочные на 3 мин.
     Фильтры бумажные.

     * С 1 июля 2002 г. нведен в действие ГОСТ 24104—2001.

И хиннс официальное                                                                  Перепечатка воспрещена
                                                                          © Издательство стандартов, 1992
                                                                      © ИГ1К Издательство стандартов, 2004

ГОСТ 29177-91 С. 2

      Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
      Кислота серная по ГОСТ 4204. х.ч. или ч.д.а.
      Гидроокись натрия по ГОСТ 4328.
     Калий-натрий виннокислый по ГОСТ 5845. х.ч.
      Гипосульфит натрия, раствор массовой концентрации 0.1 моль/дм3.
      Натрий уксуснокислый по ГОСТ 2080.
      Натрий углекислый по ГОСТ 83.
      Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61, раствор массовой концентрации 1 моль/дм3.
      Калий двухромовокислый по ГОСТ 4220. раствор массовой концентрации 0,1 моль/дм5.
      Калий йодистый по ГОСТ 4232, раствор с массовой долей 30 %.
     Медь сернокислая по ГОСТ 4165.
      Препарат ферментный глюкоамилазы очищенный по ТУ 64—13—18.
     Крахмал растворимый по ГОСТ 10163.
      Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
     2.2. Подготовка к испытанию
     2.2.1. Подготовка пробы
     Среднюю пробу испытуемого продукта измельчают на лабораторной мельнице и просеивают
через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Частицы, оставшиеся на сите в количестве до I %,
удаляют.
     2.2.2. Приготовление раствора сернокислой меди (раствор Фелинга 1)
      Навеску сернокислой меди массой 40 г переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см1,
растворяют в дистиллированной воде и доводят объем дистиллированной водой до метки.
     2.2.3. Приготовление щелочного раствора виннокислого калия-натрия (раствор Фелинга 2)
     200 г виннокислого калия-натрия и 150 г гидроокиси натрия растворяют примерно в 400 см3
дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см5. После охлаждения раствора объем
его доводят дистиллированной водой до 1000 см5.
     2.2.4. Приготовление раствора крахмала с массовой долей 1 %
      Навеску растворимого крахмала массой 1 г помешают в мерную колбу вместимостью 100 см3,
добавляют 25 см3 дистиллированной поды и тщательно перемешивают. Затем в колбу добавляют еще
25 см3 дистиллированной воды, помешают колбу в кипящую водяную баню и, непрерывно переме­
шивая. выдерживают до полного растворения крахмала. Затем колбу охлаждают до комнатной
температуры и объем доводят дистиллированной водой до метки, после чего содержимое колбы
перемешивают стеклянной палочкой.
      Раствор крахмала готовят в день проведения анализа.
     2.2.5. Приготовление раствора гипосульфита натрия массовой концентрации 0.1 моль/дм5
     Для приготовления раствора гипосульфита натрия массовой концентрации 0,1 моль/дм5 и
установления его титра 25 г соли растворяют в 1 дм3 дистиллированной воды, к полученному
раствору прибавляют 0,1 г углекислого натрия, оставляют стоять в течение суток и устанавливают
титр по 0,1 моль/дм5 раствора двухромовокислого калия (4,9036 г двухромового кислого калия
растворяют в 1 дм1 воды).
     Для установления титра раствора гипосульфита в колбу с притертой пробкой приливают точно
20 см5 0,1 моль/дм5 раствора двухромовокислого калия, доливают водой до 100 см3, прибавляют при
помешивании 4 см3 концентрированной серной кислоты и 4 см3 раствора йодистого калия с массо­
вой долей 30 %. Колбу закрывают пробкой и оставляют в темном месте на 2—3 мин, затем титруют
раствором гипосульфита натрия, все время интенсивно перемешивая жидкость, пока коричневый
цвет раствора не перейдет в светло-желтый, прибавляют 1 см5 1%-ного раствора крахмала и продол­
жают титрование до исчезновения синей окраски и перехода ее в зеленоватую.
      Поправочный коэффициент (К) к точно 0,1 моль/дм3 раствора гипосульфита определяют по
формуле




где V — объем гипосульфита натрия, израсходованный на титрование, см3.
     2.2.6.      Приготовление раствора серной кислоты с плотностью 1,14 г/см3
     В колбу вместимостью 1000 см5 наливают 500 см5 дистиллированной воды, туда же осторожно
добавляют 228.9 г концентрированной серной кислоты плотностью 1.84 г/см3. После охлаждения до

С. 3 ГОСТ 29177-91

комнатной температуры раствор доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.
Плотность полученного раствора должна составлять 1.14 г/см5.
      2.2.7. Приготовление ацетатного буфера с pH = 4.7—5,0
      Для приготовления ацетатного буфера берут раствор ледяной уксусной кислоты массовой
концентрации 1 моль/дм5 (60.12 г уксусной кислоты на 1 дм5 воды) и уксуснокислого натрия
(136.09 г уксуснокислого натрия на 1 дм5).
      Ацетатную буферную смесь готовят смешиванием указанных растворов в соотношении от 1:1
до 1:2 соответственно значениям pH 4,7—5,0.
      2.2.8. Приготоатение раствора ферментного препарата глюкоамилазы
      Навеску ферментного препарата очищенной глюкоамилазы массой 1 г при глюкоамилазной
активности препарата (ГлА) 1000 Ед на 1 г или 0.5 г при активности препарата 2000 ГлА на I г
помещают в стеклянный стаканчик вместимостью 25 — 30 см3. Туда же добавляют небольшое
количество дистиллированной воды и тщательно растирают стеклянной палочкой до получения
однородной массы. Полученную массу количественно переносят в мерную колбу вместимостью
100 см5, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и, при необходимости, фильт­
руют через стеклянную воронку с бумажным фильтром. 1 см’ раствора ферментного препарата имеет
глюкоамилазную активность 10 Ед. При необходимости активность препарата глюкоамилазы про­
веряют по ГОСТ 20264.4.
      Раствор ферментного препарата хранят не более суток при температуре от плюс 2 до минус
4 ”С.
      2.3. Проведение испытания
      Навеску испытуемой пробы массой 1 г помещают в коническую колбу вместимостью 100 см5.
Затем приливают 25 см5 дистиллированной воды температурой 37 "С, 3 см5 ацетатного буфера и
2 см' раствора ферментного препарата. Колбы выдерживают в биологическом термостате 1 ч при
37 ‘С, периодически, примерно через 15 мин, перемешивая их содержимое. После этого отбирают
10 см5 недосадочной жидкости и переносят в коническую колбу, куда предварительно наливают
10 см5 раствора Фединга 1 и 10 см5 раствора Фединга 2. Полученную смесь нагревают до кипения
на электроплитке или газовой горелке и кипятят 3 мин, при этом выпадает осадок закиси меди
красно-бурого цвета. После охлаждения до комнатной температуры в колбу с осадком вносят 20 см5
раствора серной кислоты, приготовленной по п. 2.2.6, и 2 г йодистого калия.
      Выделившийся свободный йод быстро оттитровывают раствором гипосульфита натрия, приго­
товленного по п. 2.2.5, до кофейной окраски, после чего вносят I см’ раствора растворимого
крахмала и снова титруют до молочно-белой окраски.
      Параллельно опыту ставят контрольный опыт, в котором вместо недосадочной жидкости берут
10 см3 дистиллированной воды, остальные операции проводят в той же последовательности, что и
для опытной пробы.
      2.4. Обработка результатов
      Количество глюкозы (Л) в миллиграммах в 1 г сухого вещества анализируемой пробы вычис­
ляют по формуле
                                        ( * , - * „ ) - 3 0 - 3.3 К
                                   Х~         1 0 ( 1 - W)
где NK — объем гипосульфита натрия, израсходованный на титрование контрольной пробы, см5;
    iVu — объем гипосульфита натрия, израсходованный на титрование опытной пробы, см5;
    30 — объем исходной суспензии в колбе, см3;
   3,3 — коэффициент пересчета 0,1 моль/дм5 раствора гипосульфита натрия на глюкозу, установ­
          ленный экспериментальным путем;
     К — поправочный коэффициент к титру гипосульфита натрия;
    10 — количество гидролизата, израсходованное на анализ;
    W - массовая доля влаги в анализируемой пробе, г.
      Вычисления проводят до первого десятичного знака с последующим округлением до целого
числа.
      За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое значение результа­
тов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны пре­
вышать 10 % от среднеарифметического результата.