ГОСТ Р ИСО 20391-2-2023

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                      ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                              НАЦИОНАЛЬНЫЙ                          ГО С ТР
                                СТАНДАРТ
                               РОССИЙСКОЙ
                                                                    ИСО 20391-2—
                                 ФЕДЕРАЦИИ                          2023




                                 Биотехнология

                             П О Д С ЧЕТ КЛЕТО К
                                        Ч а с т ь    2



               Планирование эксперимента и статистический
               анализ количественной оценки эффективности
                             метода подсчета

                                 (ISO 20391-2:2019, IDT)



                                   Издание официальное




                                            Москва
                               Российский институт стандартизации
                                              2023




написание ту

ГОСТ Р ИСО 20391-2— 2023


                                         Предисловие
      1 ПОДГОТОВЛЕН Ф едеральны м государственны м бю джетным учреж дением «Российский инсти­
тут стандартизации» (Ф ГБУ «И нститут стандартизации») на основе собственного перевода на русский
язы к англоязы чной версии стандарта, указанного в пункте 4

     2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 326 «Биотехнологии»

     3 У ТВЕ РЖ Д ЕН И ВВЕДЕН В Д Е Й С Т В И Е Приказом Ф едерального агентства по техническом у
регулированию и метрологии от 10 августа 2023 г. № 632-ст

       4 Н астоящ ий стандарт идентичен м еж дународном у стандарту ИСО 20391-2:2019 «Биотехнология.
Подсчет клеток. Часть 2. П ланирование эксперим ента и статистический анализ количественной оценки
эф ф ективности метода подсчета» («B iotechnology — Cell counting — Part 2: Experim ental design and
statistical analysis to quantify counting m ethod perform ance», IDT).
       М еж дународны й стандарт разработан Техническим комитетом ИС О /ТК 276 «Биотехнология»
М еж дународной организации по стандартизации (ИСО).
       При применении настоящ его стандарта реком ендуется использовать вместо ссы лочного м еж ду­
народного стандарта соответствую щ ий ем у национальны й стандарт, сведения о котором приведены в
дополнительном прилож ении Д А

     5 ВВЕДЕН ВП ЕРВ Ы Е

     6 Н екоторые элементы настоящ его стандарта могут являться объектам и патентны х прав




     Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона
от 29 июня 2015 г. № 162-ФЗ «О стандартизации в Российской Федерации». Информация об из­
менениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего
года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официальный текст изменений
и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае
пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет
опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные
стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в ин­
формационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по
техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.rst.gov.ru)




                                                                                         © ISO, 2019
                                             © О ф орм ление. Ф ГБУ «И нститут стандартизации», 2023

     Н астоящ ий стандарт не может бы ть полностью или частично воспроизведен, тираж ирован и рас­
пространен в качестве оф ициального издания без разреш ения Ф едерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии

ГОСТ Р ИСО 20391-2— 2023


                                                                                   Содержание
1 О бласть п р и м е н е н и я ........................................................................................................................................................... 1
2 Н ормативны е с с ы л к и ........................................................................................................................................................... 1
3 Термины, определения, обозначения и с о кр а щ е н и я ................................................................................................1
4 С ущ ность экспе р и м е н та ...................................................................................................................................................... 7
5 План экспе р и м е н та ............................................................................................................................................................... 9
6 С татистические м е т о д ы .................................................................................................................................................... 13
7 О т ч е т н о с т ь ............................................................................................................................................................................18
П рилож ение А (справочное) М етод оценки вклада погреш ности пипетирования
                         в надеж ность р азб а вл е н и я...................................................................................................................20
П рилож ение В (обязательное) Метод вы числения сглаж енны х погреш ностей esmoothed
                         при получении набора изм еренны х долей разбавления OFmeasured.....................................23
П рилож ение С (справочное) П рим ерны е ф орм улы для вы числения PI ...........................................................25
П рилож ение D (справочное) С ценарий 1. О ценка качества разового процесса подсчета к л е т о к ......... 27
П рилож ение Е (справочное) С ценарий 2. С опоставление качества нескольких процессов
                         подсчета кл е т о к ........................................................................................................................................32
П рилож ение Д А (справочное) Сведения о соответствии ссы лочного м еж дународного
                           стандарта национальном у с т а н д а р т у ...........................................................................................43
Б и б л и о гр а ф и я ........................................................................................................................................................................ 44

ГОСТ Р ИСО 20391-2— 2023


                                             Введение
       Подсчет клеток влияет на многие аспекты биотехнологии, от биопроизводства до м едицинской
диагностики и передовой терапии. Подсчет клеток вы полняет ф ункции технологического контроля каче­
ства, или его результаты использую т в процессе принятия реш ений. П одсчитанное количество клеток
также является важным параметром многих анализов, включая оценку удельной активности и ж и зн ен ­
ного потенциала, которые часто норм ализую т к подсчитанном у количеству клеток для обеспечения воз­
можности сравнения данных.
       О бы чно подсчитанное количество клеток вы раж аю т как концентрацию , отраж аю щ ую общ ее ко­
личество клеток в популяции (общ ее количество клеток в суспензии) или субпопуляции (диф ф ерен­
циальное количество клеток). Развитие технологий приборостроения привело к появлению целого
ряда методик и специальной аппаратуры для подсчета общ его и/или диф ф еренц иального количества
клеток. При отсутствии до ступн ы х стандартны х образцов или эксперим ентально проверенны х данны х
трудно определить точность метода изм ерений. С итуацию усугубляет слож ность приготовления био­
логических препаратов (например, поиск необходим ы х типов клеток, определение источников поставок
и т. д.). С ущ ествую т несколько стандартов, устанавливаю щ их методы подсчета количества клеток, от­
раж аю щ их специф ику их конкретного прим енения или использования особы х изм ерительны х систем
(см. ИСО 20391-1 и [16]). В некоторы х из этих методов прим еняю т подход сопоставим ости, при котором
результат каж дого нового метода испы таний для подсчета количества клеток сравниваю т с результа­
тами, полученны ми при вы полнении более распространенного метода подсчета. Но несмотря на то,
что такой сопоставим ы й подход позволяет сравнивать данны е новы х исследований с результатами
традиционны х методов, он не отраж ает аспекты качества этих изм ерительны х процессов [17]. В связи с
отсутствием стандартны х образцов или стандартны х методов [17] остается необходим ость разработки
методов обеспечения качества определения количества клеток.
       Н астоящ ий стандарт устанавливает метод оценки аспектов качества определения количества
клеток за счет использования серии разбавлений при проведении эксперим ента. По этой схеме вы би­
рают показатели качества для оценки эф ф ективности метода определения количества клеток. В част­
ности, показатели качества даю т возм ож ность оценить точность и пропорциональность метода опре­
деления количества клеток. Этот подход особенно полезен при невозм ожности определения точности
(например, при отсутствии отслеж иваем ы х связей со стандартны м методом или стандартны м о браз­
цом), а такж е он применим в общ ем плане к таким аспектам , как валидация и м ониторинг качества про­
цедуры определения количества клеток [17].
       Требования, приведенны е в настоящ ем стандарте, определяю т достоверность данны х вы бран­
ного метода определения количества клеток. Этот подход использую т для вы бора или оптим изации
процесса изм ерения заданного клеточного препарата. Также этот подход позволяет получить вспом о­
гательные параметры эф ф ективности, которые можно использовать при аттестации характеристик эф ­
ф ективности конкретного метода определения количества клеток.




IV