ГОСТ Р ИСО 20395-2023

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

                                       ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ




                                               НАЦИОНАЛЬНЫЙ                        ГО СТР
                                                  СТАНДАРТ
                                                                                   ИСО 20395—
                                                РОССИЙСКОЙ
                                                 ФЕДЕРАЦИИ                         2023




                                             БИО ТЕХНО ЛО ГИЯ

                                 Требования к оценке эффективности методов
                              количественного определения последовательностей
                                        нуклеиновых кислот-мишеней.
                                     Количественная ПЦР и цифровая ПЦР
                                                   (ISO 20395:2019, ЮТ)



                                                    Издание официальное




                                                           Москва
                                              Российский институт стандартизации
                                                             2023




технические условия скачать

ГОСТ Р ИСО 20395— 2023


                                           Предисловие
      1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным бюджетным учреждением «Российский инсти­
тут стандартизации» (ФГБУ «Институт стандартизации») на основе собственного перевода на русский
язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 4

     2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 326 «Биотехнологии»

     3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому ре­
гулированию и метрологии от 17 августа 2023 г. № 679-ст

     4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 20395:2019 «Биотехнология.
Требования к оценке эффективности методов количественного определения последовательностей ну­
клеиновых кислот-мишеней. Количественная ПЦР и цифровая ПЦР» (ISO 20395:2019 «Biotechnology —
Requirements for evaluating the performance of quantification methods for nucleic acid target sequences —
qPCR and dPCR», IDT).
     Международный стандарт разработан Техническим комитетом ИСО/ТК 276 «Биотехнология»
Международной организации по стандартизации (ИСО).
     При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных междуна­
родных стандартов соответствующие им национальные и межгосударственные стандарты, сведения о
которых приведены в дополнительном приложении ДА

     5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     6 Некоторое элементы настоящего стандарта могут являться объектами патентных прав




     Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона
от 29 июня 2015 г. № 162-ФЗ «О стандартизации в Российской Федерации». Информация об из­
менениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего
года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официальный текст изменений
и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае
пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет
опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные
стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в ин­
формационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по
техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.rst.gov.ru)




                                                                                      © ISO, 2019
                                               © Оформление. ФГБУ «Институт стандартизации», 2023

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и рас­
пространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническо­
му регулированию и метрологии

ГОСТ Р ИСО 20395— 2023


                                                                              Содержание
1 Область прим енения..................................................................................................................................................1
2 Нормативные ссы лки................................................................................................................................................. 2
3 Термины и о п ред ел ения...........................................................................................................................................2
4 План проведения о п р е д е л е н и я ............................................................................................................................. 6
5 Контроль качества пробы. Количество общей нуклеиновой кислоты, целостность и ч и с то та .............. 11
6 Метод анализа и оптимизация для количественного определения последовательностей-мишеней
    нуклеиновой ки сл о ты ............................................................................................................................................. 14
7 Контроль качества данных (QC) и анализ д а н н ы х .........................................................................................18
8 Валидация метода количественного определения нуклеиновых к и с л о т .................................................. 19
9 Прослеживаемость и сопоставимость измерений количественного определения нуклеиновых
   ки с л о т..........................................................................................................................................................................23
10 Неопределенность измерений (MU) в измерениях кПЦР и цП Ц Р ............................................................ 23
11 Отчеты........................................................................................................................................................................25
Приложение А (справочное) Спектроф отометрия.............................................................................................. 26
Приложение В (справочное) Целостность нуклеиновой кислоты ....................................................................28
Приложение С (справочное) Эффективность П Ц Р ............................................................................................ 29
Приложение D (справочное) Неопределенность и зм е р е н и й .......................................................................... 31
Приложение Е (справочное) Карты контроля MIQE и d M IQ E .......................................................................... 33
Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов
                           национальным и межгосударственным ста нд артам ............................................................40
Б ибл иограф ия...............................................................................................................................................................41

ГОСТ Р ИСО 20395— 2023


                                          Введение
      Настоящий стандарт разработан для подтверждения аналитических требований в отношении ко­
личественного определения специфических последовательностей (мишеней) нуклеиновых кислот. Он
также может быть применим для расширенного биопроизводства, биологических исследований и раз­
работок, промышленной биотехнологии, инженерной биологии и передовой терапии, где необходимо
продемонстрировать качество продукции, основываясь на измерениях и количественном определении
специфических последовательностей-мишеней нуклеиновых кислот.
      Количественное определение последовательностей-мишеней нуклеиновых кислот — это сквоз­
ное функциональное измерение, которое оказывает широкое воздействие на многие аспекты биотехно­
логии. Например, количественное определение биомаркеров нуклеиновых кислот с целью мониторинга
эффективности биопроцессов и их соответствия качеству по расчетным параметрам для биофармати-
ческого производства и промышленной биотехнологии, характеристика чистоты и качества клеточных
лекарственных препаратов для передовой терапии (ATMPs); оценка числа копий гена для оценивания
активности и терапевтической эффективности генной терапии и аналитики контроля процессов для
применения при редактировании генома и инженерной биологии.
      Основополагающий метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) изменил сферу анализа нуклеи­
новых кислот благодаря ее надежности и простоте. Научно-техническое развитие оборудования оказа­
ло воздействие на широкий спектр методов/приборов для количественного определения нуклеиновых
кислот, основанных на ПЦР, и привело к последующему развитию таких методов, как:
      - количественная ПЦР в реальном времени (кПЦР), предлагающая методы количественной оцен­
ки молекул ДНК и РНК относительно калибровочного материала или независимой пробы;
      - цифровая ПЦР (цПЦР), предлагающая возможность выполнения количественного определения,
отслеживаемого до СИ, посредством метода молекулярного подсчета, без необходимости построения
калибровочной кривой.
      Однако, проведение количественного определения нуклеиновых кислот на высоком уровне ана­
литического качества может быть проблематичным. Например, широко известно, что загрязненные
или разложенные экстракты нуклеиновой кислоты могут повлиять на точность количественной оценки.
Так же, плохо проработанный анализ кПЦР или цПЦР с низкой производительностью амплификации
и специфичностью праймера может повлиять на точность количественной оценки. Кроме того, такие
аспекты, как калибровочные растворы, градуировочные кривые, корректировка данных и обработка,
могут оказать сильное влияние на точность количественной оценки последовательностей-мишеней ну­
клеиновых кислот.
      Настоящий стандарт позволит улучшить достоверность получаемых данных, будет способство­
вать выбору и оптимизации процедур и обеспечит поддержку рабочих параметров, которые можно
использовать при проведении количественного определения последовательностей-мишеней нуклеи­
новых кислот. Данные отраслей биотехнологии и биологической науки с высокой достоверностью из­
мерений обеспечат взаимосогласованность данных, улучшенное качество продукции, сниженные риски
и затраты и будут способствовать международной торговле.
      В настоящем стандарте использованы следующие формулировки:
      - «должен» указывает на требование;
      - «следует» — на рекомендацию;
      - «возможно» — на разрешение;
      - «может» — на возможность или способность.
      Более подробные данные приведены в Директивах ИСО/МЭК, часть 2.




IV