ГОСТ Р 51459-99

ГОСТ Р 51459-99

                         Г ОСУДАР СТ ВЕ ННЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й С К О Й ФЕДЕ РАЦИИ




                                    СЫР И СЫР ПЛАВЛЕНЫЙ

                         Метод определения массовой доли лимонной кислоты


                                                Издание официальное




                                                          Москва
                                                      Стандартинформ
                                                           2011




набор прочности бетона

ГОСТ Р 51459-99

                                        Предисловие

     1 РАЗРАБОТАН Государственным учреждением Всероссийским научно-исследовательским
институтом молочной промышленности (ГУ ВНИМИ)

     ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 186 «Молоко и молочные продукты»

     2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабря
1999 г. № 614

     3 Настоящий стандарт гармонизирован с международным стандартом ИСО 2%3—97 «Сыр и
сыр плавленый. Определение содержания лимонной кислоты. Ферментативный метод*

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2011 г.




                                                        © ИПК Издательство стандартов, 1999
                                                             © СТЛНДЛРГИНФОРМ, 2011

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техни­
ческому регулированию и метрологии
II                                        48

ГОСТ Р 51459-99


 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                        СТАНДАРТ               РОССИЙСКОЙ                   ФЕДЕРАЦИИ



                                      СЫ Р И СЫ Р ПЛАВЛЕНЫЙ

                        Метод определения массовой доли лимонной кислоты

                                   Cheese and processed cheese products.
                            Method for determination o f mass percent o f citric acid




                                                                                        Дата введения 2002—07 —01

      1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на сыр и плавленый сыр и устанавливает метод опреде­
ления массовой доли лимонной кислоты.
     Метод определения массовой доли лимонной кислоты в сыре и сыре плавленом основан на
обработке экстракта навески продукта нитрат-лмалой для превращения лимонной кислоты в уксус­
ную и щавелевоуксусную кислоты. Полученный раствор обрабатывают малатдегидрогеназой (МДГ)
и лактатдегидрогеназой (ЛДГ) в присутствии никотинамидадениндинуклеотнда (НЛДН) восстанов­
ленной формы, для ферментативного катализа восстановления щавелевоуксусной кислоты и про­
дукта ее декарбоксилирования — пировиноградной кислоты, соответственно с L-яблочпой и
L-молочной кислот. При этом НЛДН превращается в окисленную форму (НАД*). Снижение кон­
центрации НЛДН в исследуемом растворе устанавливают измерением оптической плотности при
длине волны 340 нм. Массовая доля лимонной кислоты при этом пропорциональна снижению кон­
центрации НЛДН.

     2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, про­
бирки. Общие технические условия
     ГОСТ 3652—69 Кислота лимонная моногидрат и безводная. Технические условия
     ГОСТ 3769—78 Аммоний сернокислый. Технические условия
     ГОСТ 4201—79 Натрий углекислый кислый. Технические условия
     ГОСТ 4328—77 Натрия гидроокись. Технические условия
     ГОСТ 4529—78 Цинк хлористый. Технические условия
     ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия
     ГОСТ 12026—76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
     ГОСТ 19881—74 Анализаторы потенциометрические для контроля pH молока и молочных
продуктов. Общие технические условия
     ГОСТ 24104—88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические
условия
     ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные пара­
метры и размеры
     ГОСТ 26809—86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подго­
товка проб к анализу
     ГОСТ 29169—91 (ИСО 648—77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
     ГОСТ 29227—91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуирован­
ные. Часть 1. Общие требования
     ИСО 707—97** Молоко и молочные продукты. Методы отбора проб

      * С I июля 2002 г. ввел с н в дсПствис ГОСТ 24104—2001. На территории Российской Федерации действует
ГОСТ Р 53228-2008.
*• Действует до введения в действие ГОСТ Р. разработанного на основе соответствующего ИСО. С II августа
2008 г. действует ИСО 707:2008.

Издание официальное

                                                          49                                                    I

ГОСТ Р 51459-99

     3 Определение
     В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующим определением:
     массовая доля лимонной кислоты: Отношение массы лимонной кислоты, определенной в соот­
ветствии с настоящим стандартом в навеске продукта, к массе навески продукта, умноженное на
100 и выраженное в процентах.

     4 Аппаратура, материалы и реактивы
      4.1 Анализатор потенциометрический по ГОСТ 19881.
      4.2 Баня водяная с обогревом, позволяющая поддерживать температуру от 20 до 25 *С, со
стойкой для удерживания кюветы спектрофотометра в процессе термостатирования.
      4.3 Спектрофотометр, обеспечивающий проведение измерений на длине волны 340 нм, с
шириной полосы пропускания не более 10 нм. оснащенный кюветами длиной оптического пути
I см.
      4.4 Устройство измельчающее с угловой скоростью вращения от 500 до 3000 м ш г 1. позволя­
ющее измельчать пробу без ее нагрева, потери или поглощения влаги.
      4.5 Весы лабораторные по ГОСТ 24104 общего назначения 2-го класса точности.
      4.6 Пластиковые мешки для размешивания смеси исследуемого образца с ферментом непос­
редственно в кювете спектрофотометра.
      4.7 Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026 диаметром фильтра 15 см.
      4.8 Воронка типа ВФ по ГОСТ 25336 диаметром 75 мм.
      4.9 Пипетки градуированные по ГОСТ 29227, 2-го класса точности вместимостью 10 см3.
      4.10 Пипетки по ГОСТ 29169 2-го класса точности вместимостью 25, 10, 5, 2, I, 0,1 и
0,02 см3.
      4.11 Колбы конические по ГОСТ 25336 вместимостью 100 см5 с притертыми стеклянными
пробками.
      4.12 Колбы мерные по ГОСТ 1770 2-го класса точности вместимостью 100 и 1000 см3.
      4.13 Стаканы химические стеклянные по ГОСТ 25336 вместимостью 50 см3.
      4.14 Цилиндр мерный по ГОСТ 1770 вместимостью 50 см3.
      4.15 Кислота трихлоруксусная (СС1дСООН) по [!|.
      4.16 Натрия гидроокись (NaOH) по ГОСТ 4328. ч.д.а.
      4.17 Цинк хлористый <ZnCI2) по ГОСТ 4529. ч.д.а.
      4.18 Диглицин <H2NCH2C 0N H C H 2C 0 2H) по |2J.
      4.19 Натрий углекислый кислый (NaHCO,) по ГОСТ 4201, х.ч.
      4.20 Сольдинатриевая никотинамидадениндинуклеотида (C2,H 27N TOl4P,Na2) по |3|, х.ч.
      4.21 Аммоний сернокислый (NH4),S 0 4 по ГОСТ 3769, ч.д.а*.
      4.22 Малатдегндрогеназа из сердца* поросенка К.Ф. 1.1.1.37 по |4|.
      4.23 Лактатдегидрогеназа из мышц кролика К.Ф. 1.1.1.27 по |4|.
      4.24 Цитрат-лиаза (Лиофнлизат из Aerolonter aerogenes) К.Ф.4.1.3.6 по |4|.
      4.25 Моногидрат лимонной кислоты (С6НхО, • Н20 ) по ГОСТ 3652.
      4.26 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода деминерализованная, вода бндистилли-
рованная.
      Допускается применять другие средства измерений с метрологическими характеристиками и
оборудование с техническими характеристиками не хуже, а также реактивы по качеству не ниже
указанных.

     5 Метод отбора проб
     Отбор проб — по ГОСТ 26809, для экспортно-импортных операций — по ИСО 707.

     6 Подготовка к определению
     6.1 Приготовление растворов
     6.1.1 Раствор трихлоруксусной кислоты
      В мерную колбу вместимостью 10(H) см3 вносят 200.0 г трихлоруксусной кислоты (С'С1,СООН)
по 4.15, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
     6.1.2 Раствор А гидроокиси натрия концентрации 5.0 моль/дм3
      В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 200,0 г гидроокиси натрия (NaOH) по 4.16.
растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
2                                          50