ГОСТ 9.023-74

Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й С Т А Н Д А Р Т
                                                      С О Ю З А ССР




                                         ЕДИНАЯ СИСТЕМА ЗАЩИТЫ
                                         ОТ КОРРОЗИИ И СТАРЕНИЯ.
                                            ТОПЛИВА НЕФТЯНЫЕ
          МЕТОД ЛАБОРАТОРНЫХ ИСПЫТАНИЙ БИОСТОЙКОСТИ
      ТОПЛИВ, ЗАЩИЩЕННЫХ ПРОТИВОМИКРОБНЫМИ ПРИСАДКАМИ

                                                      ГОСТ 9.023—74

                                                     Издание официальное
uox




                                              ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СТАНДАРТОВ
                                                     СОВЕТА МИНИСТРОВ СССР
                                                          Мо с и н а
      программа и методика испытаний

УДК МЗ.Ш.ООМ|МЭ.74)                                                   Группа TW

Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й         С Т А Н Д А Р Т       С О Ю З А      С С Р

     ЕДИНАЯ СИСТЕМА ЗАЩИТЫ ОТ КОРРОЗИИ
                  И СТАРЕНИЯ
              ТОПЛИВА НЕФТЯНЫЕ
Метод лабораторных испытаний бкостойкостм толлма,
    защищенных протмаоммкробными присадками
                                                               ГОСТ
       Unified system of corrosion and ageing
                                                            9.023—74
             protection. Oil fuels. Method
           of laboratory testing bioslability
      of fuels protected by aniimicrobe additives

Постановлением Государстваиного комитата стандартов          Совета     Министров
СССР от 1* апреля 1974 г. N9 900 срок действия установлен
                                                                  с 01.07 1975 г.
                                                                 до 01.07 1980 г.
               Несоблюдение стандарта преследуется по закону

   Настоящий стандарт распространяется на нефтяные дистил­
лятные топлива и устанавливает метод лабораторных испытаний
биостойхости топлив, защищенных протнвомикробными присад­
ками.
   Метод применяют также для определения протнвомикробного
действия различных присадок.
   Сущность метода заключается в инкубации топлив с присад­
кой в контакте с водно-минеральной средой (в дальнейшем —
среда), зараженной специально подобранными микроорганизмами,
активно развивающимися за счет данного топлива без присадки.
Инкубацию проводят в условиях, оптимальных для развития мик­
роорганизмов.

                       1. МЕТОДЫ ОТБОРА ОБРАЗЦОВ

    1.1. Образцами являются:
   топливо, защищенное противомикробной присадкой — при оцен­
ке его биостойкости:
   топливо, не защищенное присадкой — при оценке противомик-
робного действия присадок.
    1.2. Образцы топлив отбирают по ГОСТ 2517—69 в количестве
500 мл я испытывают без предварительной очистки и стерилиза­
ции.

Издание официально*                                     Перепечатка воспрещена
                         Переиздана*. Декабрь 1974 г.
  ★                                       © Издательство стандартов, 1975

Стр. 2 ГОСТ *.021—74


                       2. КУЛЬТУРЫ МИКРООРГАНИЗМОВ

    2.1. Для испытаний применяют чистые культуры гриба Clado-
sporium resinae и бактерии Pseudomonas aeruginosa (руосудпса).
    Кроме того, допускается применять чистые культуры различных
видов микобактерий (род Mycobacterium) и дрожжей Candida
 (С. guilliermondir, С. lipolytica, С. tropicalis), а также накопитель­
ные культуры, состав которых определяется источником их по­
лучения и нефтепродуктом, за счет которого они формируются.
    2.2. Чистые культуры грибов и бактерий получают из коллек­
ций или выделяют из накопительных культур.
    2.3. Накопительные культуры выращивают на минеральной
среде с испытуемым топливом без присадки; для этого зараженную
минеральную среду смешивают с топливом в следующих соотно­
шениях:
    при выращивании на дизельных топливах и топливах для реак­
тивных двигателей (в дальнейшем реактивное топливо) — по
3 мл среды и топлива;
    при выращивании на бензинах — 10 мл среды и 1 мл бензина.
    2.4. Заражение минеральной среды производят почвой, заг­
рязненной нефтепродуктами, или волно-топливной смесью, пора­
женной микроорганизмами.
    2.5. Для испытаний отбирают наиболее агрессивные штаммы
чистых культур микроорганизмов и накопительные культуры, кото­
рые дают обильный рост на топливе без присадки нс более чем
через 14 суток культивирования. Для гриба Cladosporium resinae.
допустимо получение обильного роста не более чем через 30 суток.
    2.6. Для испытаний отбирают культуры, дающие одинаково
обильный рост при многократных последовательных пересевах на
среду с топливом без присадки.
    2.7. Культуры микроорганизмов, отобранных для испытаний,
хранят на среде с топливом без присадки; пересев культур произ­
водят не реже одного раза в 4 месяца, а в перерывах между пере­
севами храпят при 2—5°С. Число пересевов не должно превы­
шать 10.
                       3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЯМ

   3 1. Материалы, реактивы, оборудование и посуда, применя­
емые для испытаний, приведены в приложении 1.
   3.2. Посуду, вымытую и высушенпую, закрывают ватными
пробками, заворачивают в бумагу н стерилизуют я сушильном
шкафу при 160°С в течение 2 ч.
   3.3. Для выращивания культур и испытаний готовят среды в
соответствии с приложением 2.

гост «Лаз— U стр. з

    3.4.     Минеральные среды для предварительного выращивания
Pseudomonas aeruginosa, микобактерии, дрожжей к накопитель­
ных культур разливают в пробирки:
    для испытаний реактивных и дизельных топлив — по 3 мл;
    для испытаний бензинов — по 10 мл.
    3.5. Д ля предварительного выращивания гриба Cladosporium
resinae сусловый агар разливают в пробирки по 7—8 мл.
    3.6. Минеральные среды, водопроводную воду и корковые
пробки стерилизуют в автоклаве при 12ГС (1 ати), а сусловый
агар при 11.2Х (0,5 ати) в течение 20—30 мин.
     После стерилизации сусловый агар охлаждают в наклонном
положении для получения скошенной поверхности.
     3.7. В пробирки со средами, приготовленными по пп. 3.3 и
3.5, добавляют испытуемое топливо без присадки (каждое в от­
дельную пробирку):
     реактивного или дизельного топлива — 3 мл;
     неэтилированного бензина — 1 мл.
     В приготовленные среды с топливом пересевают пипеткой куль­
 туры бактерий, дрожжей или накопительные культуры в коли­
 честве 0,3 мл.
     3.8. На скошенную поверхность суслового агара, приготовлен­
 ного по пп. 3.4—3.5, пересевают бактериологической петлей гриб
 Cladosporium resinae, I петлю на пробирку.
     3.9. Пробирки с пересеянными культурами помещают в термо­
 стат на 10 суток при 29±2°С для выращивания культур, которые
 служат посевным материалом для испытаний.
     Содержание клеток в 1 мл посевного материала для культур
 Pseudomonas aeruginosa, микобактерий, дрожжей и накопитель­
 ных культур должно быть не менее 1 • 10е.
     3.10. Для испытаний допускается использовать ранее выращен­
 ные культуры, хранящиеся в холодильнике по л. 2.7.
      3.11. Для   испытаний    готовят   суспензию   спор    гриба
 Cladosporium resinae, выращенного по п. 3.9, переносом их бакте­
 риологической петлей со скошенного суслового агара в стерильную
  водопроводную воду из расчета 3—4 пеглн на 10 мл воды.
      Суспензия пригодна для использования в течение 6 ч с момента
  приготовления.
      3.12. Для определения противомикробного действия других
  присадок их вносят в образцы топлив в количествах, соответствую­
  щих программе испытаний.
      3.13. Минеральные среды для испытаний разливают:
      для испытаний реактивных и дизельных топлив — в колбы
  вместимостью 100 мл по 20 мл;
      для испытаний бензинов — в колбы вместимостью 250—300 мл
  по 50 мл.