ГОСТ Р 51425-99

ГОСТ Р 51425-99
                                                                   (ИСО 6 8 7 0 -8 5 )


                    ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й С К О Й ФЕ Д Е Р АЦ ИИ




                                К О РМ А , К О М Б И К О Р М А ,
                               КО М БИ КО РМ О ВО Е СЫ РЬЕ

                        Метод определения массовой доли зеараленона


                                           Издание официальное




                                          ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                                Москва




ленточные кружева

ГОСТ Р 514 2 5 -9 9

                                       Предисловие

     1 РАЗРАБОТАН Творческим коллективом с участием представителей Технического комитета
по стандартизации ТК 4 «Комбикорма, белково-витаминные добавки, премиксы»

     ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации Т К 4 «Комбикорма, белково-витамин­
ные добавки, премиксы*

     2 ПРИ Н ЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабря
1999 г. № 580-ст

     3 Настоящий стандарт представляет собой аутентичный текст международного стандарта ИСО
6870—85 «Корма для животных. Определение содержания зеараленона», за исключением разде­
лов 3, 6

     4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Сентябрь 2005 г.




                                                       © И П К Издательство стандартов. 2000
                                                                   © Стандарт»! нформ, 2005

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разре­
шения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
II

ГОСТ Р 51425-99
                                                                                           (ИСО 6870-85)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                       СТАНДАРТ              РОССИЙСКОЙ                    ФЕДЕРАЦИИ


                      КОРМА, КОМ БИКОРМ А, КО М БИ КО РМ О В О Е С Ы РЬЕ

                           Метод определения массовой доли зеараленона

                              Fccdstuflfs, compound feeds, feed raw materials.
                        Method for determination of zearalcnone fraction of total mass



                                                                                   Дата введения 2001—01—01



     1 Область применения

     Настоящий стандарт распространяется на корма, комбикорма, комбикормовое сырье и уста­
навливает метод определения массовой доли зеараленона.
     Предел обнаружения зеараленона составляет около 50 мкг/кг.


     2 Сущность метода
      Анализируемое вещество экстрагируют из навески испытуемого продукта смесью ацетонитрила
>i раствора хлористого калия, фильтруют, берут аликвоту и обезжиривают ее изооктаном с после­
дующей очисткой смесыо ацетонитрила, воды, ацетата свинца и диатомовой земли; после фильтро­
вания экстрагируют аликвотное количество хлороформом, который впоследствии испаряется.
      Растворяют сухой экстракт смесью бензола и ацетонитрила, аликвотную порцию этого раствора
подвергают двухмерной тонкослойной хроматографии. Содержание зеараленона определяют визу­
ально или путем измерения интенсивности флуоресценции пятна в ультрафиолетовом излучении и
сравнения с известными количествами зеараленона, нанесенными п ату же пластину, что и экстракт
испытуемой пробы.
      Подтверждение идентичности зеараленона проводят с помощью бисдиазотированного бензи-
дина.

     3 Нормативные ссылки

     ГОСТ 13496.0—80* Комбикорма, сырье. Методы отбора проб


     4 Реактивы

    Все реактивы должны быть квалификации х. ч. или ч. д. а:
    вода дистиллированная;
    ацетонитрил;
    изооктан;
    хлороформ:
    смесь бензола и ацетонитрила в объемном соотношении 98 ; 2;
    Предупреждение — Бензол токсичен при вдыхании и контакте с кожей. Огнеопасен.


     * Действует до введения в действие ГОСТ Р, разработанного на основе ИСО 6497 П|.


Издание официальное
                                                                                                          1

ГОСТ Р 514 2 5 -9 9

     проявляющие растворители (смесь толуола, этилацетата и муравьиной кислоты в объемном
соотношении 6 : 3 : 1 и смесь хлороформа и этанола в объемном соотношении 95 : 5);
     раствор хлористого калия массовой концентрации 40 г/дм ';
     раствор уксуснокислого свинца готовят следующим обратом:
     200 г уксуснокислого свинца помешают в мерную колбу с одной отметкой вместимостью
1000 см1, добавляют 3 см3 уксусной кислоты, доводят водой до метки и перемешивают;
     бисднатотнрованный бензидиновый реактив.
     Приготовление раствора бензидина массовой концентрации 5 г/дм 3.
     В мерную колбу вместимостью 100 см3 приливают 20 см3 воды. 1,5 ext3 соляной кислоты и
вносят 0,5 г бензидина. доводят водой до метки и перемешивают.
     Раствор следует хранить в защищенном от света месте в склянке из темного стекла.
     Приготовление реактива
     Равные объемы растворов бензидина и нитрита натрия массовой концентрации 100 г/дм3
охлаждают примерно до температуры от 0 до минус 5 ‘С, тщательно перемешивают. Полученный
раствор мутный и имеет тем но-пурпурный цвет. Перед использованием его доводят до температуры
окружающей среды, раствор приобретает желтый цвет.
     Реактив готовят непосредственно перед использованием;
     Предупреждение — Бензидин является канцерогенным веществом. Токсичен при вдыхании,
контакте с кожей, приеме внутрь.
     диатомовая земля (цеолит 545). промытая соляной кислотой;
     азот;
     зеараленон, стандартный раствор в бензоле массовой концентрации И) мкг/см3.
     На спектрометре определяют спектр поглощения раствора в диапазоне длин волн 300 и 330 нм.
используя кювету толщиной просвечиваемого слоя 10 мм относительно бензола; регистрируют
максимальное поглощение Л. которое должно составлять примерно 317 нм.
     Массовую концентрацию зеараленона с, мкг/см3, рассчитывают по формуле

                                           318/11000                                      п \

                                        С ж ""бВбо— »                                     {)

где 318 — молярная масса зеараленона, г/моль;
   6060 — коэффициент молярной экстинкнии, дм 3/м оль см.


     5 Оборудование и материалы

     Для проведения испытания применяют обычное лабораторное оборудование:
      мельницу для измельчения продукта до такой степени, чтобы он полностью проходил через
сито, диаметр отверстий которого равен I мм;
      встряхнватель со скоростью встряхивания 100 колебаний в минуту;
     бумагу фильтровальную средней плотности (рыхлая фильтровальная бумага дает мутный рас­
твор. плотная фильтровальная бумага будет забиваться);
      испаритель ротационный с круглодонной колбой;
     оборудование для тонкослойной хроматографии, т. е. оборудование для подготовки пластин и
нанесения пятен (капиллярные пипетки или микрошприцы), емкость для проявления и распылитель
для напыления реактива на пластины (пульверизатор);
      пластины стеклянные для тонкослойной хроматографии размером 200 х 200 мм подготавлива­
ют следующим образом: 30 г силикагеля G-HR помещают в коническую колбу, приливают 60 см3
воды, закрывают и тщательно перемешивают в течение 1 мин. Полученную суспензию наносят на
пластины таким образом, чтобы получить равномерный слой толщиной 0,25 мм. Высушивают слой
на воздухе и хранят атастины в эксикаторе. Перед использованием пластины активируют, выдер­
живая их в печи при температуре 110 “С в течение I ч.
      Указанного количества суспензии силикагеля достаточно для подготовки 5 пластин.
     Допускается использовать пластины промышленного применения, если результаты, получен­
ные с их применением, будут сравнимы с результатами, полученными на пластинах, подготовленных
по вышеописанному способу;
     лампы ультрафиолетовые с короткой длиной волны (253 им).
->