ГОСТ Р 50928-96

ГОСТ Р 50928-96


                ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ Р О С С И Й СК О Й ФЕ Д Е Р АЦ ИИ




                                    ПРЕМИКСЫ
                       Методы определения витаминов A, D, Е


                                       Издание официальное




                                      ГОССТАНДАРТ РОССИИ
                                           М оск в а




воротник цена

ГОСТ I» 50928-96                                                       Электронная версия

                                      Предисловие

     1 РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН МТК 4. АООТ «Всероссийский научно-исследовательский
институт комбикормовой промышленности» (АООТ «ВНИИКП»)

    2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 29 июля 19% г.
№ 487

     3 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

     4 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России
II                                         148

ГОСТ Р 50928-96

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ                  СТАНДАРТ               РОССИЙСКОЙ             Ф ЕД Е Р АЦ И И



                                         ПРЕМИКСЫ

                           Методы определения витаминов A, D, Е

                                            Premixes.
                           Methods lor determination of vitamins A. D. E




                                                                           Дата введения 1997—01—01



     1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на премиксы и устанавливает хроматографические
методы определения витаминов A, D, Е в премиксах с различными наполнителями из одной
навески.


     2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, про­
бирки. Технические условия
     ГОСТ 4166—76 Натрий сернокислый. Технические условия
     ГОСГ 5962—67 Спирт этиловый ректификованный. Технические условия
     ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия
     ГОСТ 9412—93 Марля медицинская. Технические условия
     ГОСТ 13496.0—80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб
     ГОСТ 18300—87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия
     ГОСТ 19627—74 Гидрохинон (парадиоксибензол). Технические условия
     ГОСТ 24104—88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические
условия
     ГОСТ 24363—80 Калия пироокись. Технические условия
     ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные пара­
метры и размеры
     ГОСТ 26573.0—85 Премиксы. Технические условия
     ГОСТ 29169—91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
     ГОСТ 29227—91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие
требования

     3 Определение витаминов А, Е обращенно-фазной высокоэффективной
     жидкостной хроматографией
     Сущность метода заключается в экстракции витаминов А (ретинола ацетат) Е (а-токоферола
ацетат) из премикса изопропиловым спиртом и последующем анализе содержания витаминов с
использованием жидкостного хроматографа «Милихром».




Издание официальное
                                                149                                               I

ГОСТ I» 50928-96                                                            Электронная версия

     3.1. А п п а р а т у р а , м а т е р и а л ы и р е а к т и в ы
     Хроматограф жидкостный микрокодоночный «Милихром» по нормативному докуме1гту |1|
или его последующие модификации со спектрофотометрическим детектором и спектральным
диапазоном 190—360 нм.
     Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы 186—1100 нм.
     Колонка хроматографическая одного из указанных размеров: 2x64, 2x80. 2x120 мм с числом
теоретических тарелок не менее 4 тыс., заполненная одним из следующих сорбентов: Силасорб С
18, Силасорб РНС 18, Сепарон С 18.
     Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104.
     Насос водоструйный по ГОСТ 25336.
     Баня водяная с терморегулятором.
     Колбы конические со шлифом вместимостью 25. 50 см3, КН-2-25-18МХС по ГОСТ 25336.
     Пипетки 1-1-(1, 2)-! по ГОСТ 29169.
     Пипетки 1-1-1(2)-1(10) по ГОСТ 29227.
     Цилиндры 1(2, 3, 4)-100. 1(2, 3, 4)-500 по ГОСТ 1770.
     Колбы мерные 2-25-1(2) (исполнения 2, вместимостью 25 cmj , 1-го или 2- го класса точности)
по ГОСТ 1770.
     Колбы мерные 2-50-1(2) по ГОСТ 1770.
     Воронка ВФО-40-ПОР 16 ХС по ГОСТ 25336.
     Холодильник ХПТ-1-100-18 ХС по ГОСТ 25336.
     Ретинол ацетат по нормативному документу' |11|.
     Витамин Е-ацетат по нормативному документу |12|.
     Спирт изопропиловый (пропанол-2), х. ч. по нормативному документу' |2 |.
     Спирт пропнловый (пропанол-1), х. ч. по нормативному документу |3).
     Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч. по нормативному документу |4|.
     Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
     Допускается использование другой аппаратуры, реактивов и материалов с техническими и
метрологическими характеристиками не ниже указанных.
     3.2 П о р я д о к п о д г о т о в к и к п р о в е д е н и ю к о н т р о л я
     3.2.1 Отбор проб - по ГОСТ 13496.0
     3.2.2 Чриготов.\ение элюента От хроматографии
     Трехкомпонентный элюент готовят смешиванием ацетонитрила, пропилового спирта и
дистиллированной воды в объемном соотношении 42:50:8. Для этого в склянку вместимостью
1000 см 5 вносят цилиндром 500 см3 пропилового спирта, 420 см3 ацетонитрила и 80 см3
дистиллированной воды.
     Приготовленную смесь растворителей фильтруют через стеклянный фильтр и помешают в
стеклянный сосуд с притертой пробкой. Полученный раствор можно хранить в течение I мес.
     3.2.3 Подготовка хроматографической колонки
     При использовании новой колонки или колонки после длительного перерыва в работе
из нее следует удалить воздух и тщательно промыть элюентом до получения стабильной
нулевой линии. Дтя этого через колонку пропускают элюент в количестве 20—30 свободных
объемов колонки, т.е. два полных шприца насоса хроматографа при расходе элюента сначала
50 мкдм3/м и н , а затем 100 мкдм'/мин. Промывку колонки заканчивают при получении
стабильной нулевой линии.
     После промывки колонки проводят ее насыщение витаминами А, Е. для этого выполняют
7—10 анализов наиболее концентрированных градуировочных растворов витаминов А. Е. Насыще­
ние колонки прекращают, когда отношение разности между двумя последовательными определе­
ниями концентрации витамина А(Е) к среднему арифметическому значению этих операций не
превышает 3%.
     При правильной эксплуатации колонка выдерживает 500—600 анализов.
     3.2.4 Приготовление растворителя Оля экстракции витаминов Л, Е из п/>е.иикса
     Для экстракции витаминов используют двухкомпонентный экстрагент состава: изопропило­
вый спирт и дистиллированную воду в объемном соотношении 97:3. Для этого в мерную колбу
вместимостью 1000 см3 вносят пипеткой 30 см3 дистиллированной волы и доводят до метки
изопропиловым спиртом.
     Хранят в стеклянной емкости с притертой пробкой до полного использования экстрагента.
2                                             150