ГОСТ Р 50479-93

ГОСТР 50479—93

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ
И ОВОЩЕЙ

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ВИТАМИНА РР

Издание официальное

Москва

Ca Стандартинформ
2010

УДК 664.841/.851.001.4:006.354 Группа Н59

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРОДУКТЫ TEPEPABOT KH
ОДОВ И ОВОЩЕ ГОСТР

Метод определения содержания витамина PP 50479—93

Fruit and vegetable products.
Method for determination of vitamin PP (niacin) content

MKC 67.080.01
OKCTY 9109

Дата введения 01.01.94

Настоящий стандарт распространяется на продукты переработки плодов и овощей и устанав-
ливает фотометрический метод определения содержания витамина РР (ниацина).

1. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ
Отбор проб — по ГОСТ 26313, подготовка проб к анализу — по ГОСТ 26671.

2. СУЩНОСТЬ МЕТОДА

Метод основан на освобождении витамина РР путем гидролиза, очистке гидролизата от
мешающих определению веществ, количественном получении окрашенного глутаминового альде-
гида, интенсивность окраски которого измеряют фотометрически,

3. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

Колориметр фотоэлектрический лабораторный по НТД с пределами измерений оптической
плотности 0—2 и пределом допускаемой основной абсолютной погрешности при измерении коэф-
фициента пропускания не более +1 %, со светофильтром с длиной волны, соответствующей
максимуму пропускания (400—425) нм, и кварцевыми кюветами рабочей длиной 30 мм; или спек-
трофотометр с диапазоном измерения, позволяющим проводить измерения оптической плотности
‘раствора при длине волны 420 им с допускаемой абсолютной погрешностью измерений коэффици-
ента пропускания не более 1 %, снабженный кварцевыми кюветами с рабочей длиной 10 мм.

Весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*,
с наибольшим пределом взвешивания до 200 г, 2-го класса точности.

Весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*,
с наибольшим пределом взвешивания до | кг, 3-го класса точности.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919 или газовая горелка.

Баня водяная.

Баня ледяная.

Бюретки по НТД исполнений 1—2—25-—0,1 или 2~2—25—0,1, или 3—2—25—0,1; исполнений
1-2—50—0,1 или 2—2—50—0,1 или 3—2—50—0,1.

Колбы по ГОСТ 1770 2—100—2, 2—250—2, 2-—500—2, 2—1000—2.

Колбы по ГОСТ 25336 Кн-1--100—14/23 TC, Ku-1—1000—24/29 ТС.

Цилиндры по ГОСТ 1770 1—50, 1—100.

Стаканы по ГОСТ 25336 13—1—1000 TC, B-1—2000 TC.

С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104—2001. С | января 2010 г. на территории Российской Федерации
действует ГОСТ Р 53228—2008.

Издание официальное
* © Издательство стандартов, 1993
© СТАНДАРТИНФОРМ, 2010

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен
в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и
‘метрологии

234

ГОСТ P 50479—93 C. 2

Воронки Бюхнера 2, 3 или 4 по ГОСТ 9147.

Воронки по ГОСТ 25336 B-36—80 ХС или B-56—80 ХС.

Термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 28498 с пределами измерения 0—100 °С, с
пределом допускаемой погрешности 2 °C.

Пипетки no НТД 6—1-—5, 6—1—10.

Пипетки no НТД 2—1—1 или 3 1, 2—1—2 или 3—1-2.

Эксикатор по ГОСТ 25336 с подходящим агентом для сушки.

Палочки из химико-лабораторного стекла по ГОСТ 21400.

Пробирки по ГОСТ 1770 2—20—14/23 ХС, 2—25—14/23 ХС.

Ступка по ГОСТ 9147 № 2.

Витамин РР (ниацин) по ФС 42—2357,

Кислота серная по ГОСТ 4204, x. ч., растворы с (H,SO,) = 0,05 моль/дм?, е (H;SO,) =
=1,0 моль/дм? и с (Н;$О4) = 2,5 моль/дм?.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, x. ч., растворы с (HCI = 0,5 моль/дм? и с (HCI) = 5 моль/дм?.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, x. ч., растворы с (NaOH) = 4,0 моль/дм?, с (NaOH) =
=10 моль/дм?.

Бром по ГОСТ 4109, х. ч.

Калий роданистый по ГОСТ 4139, x. ч., или аммоний роданистый по ГОСТ 27067, x. 4., растворы
массовой концентрации 100 г/лм? и 10 г/лм?.

Кальций углекислый по ГОСТ 4530, x. ч.

Кальция гидроокись по ГОСТ 9262, ч.

Метол по ГОСТ 25664, перекристаллизованный, раствор массовой концентрации 80 г/дм? в
соляной кислоте с (НС) = 0,5 моль/дм$.

Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.

Цинк сернокислый по ГОСТ 4174, x. ч., раствор массовой концентрации 800 г/дмз.

Фенолфталеин по ГОСТ 4919, | раствор массовой концентрации 10 г/дм?.

Уголь активированный.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Фильтры обеззоленные по НТД.

Примечание. Допускается использование другой аппаратуры, реактивов и материалов с технически-
ми и метрологическими характеристиками не ниже указанных.

4. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

4.1. Приготовление основного стандартного раствора витамина РР
концентрации 0,1 мг/см?

Навеску витамина РР массой 0,050 г помещают в мерную колбу вместимостью 500 смз,
добавляют 300 см? воды и 5 см? раствора серной кислоты (Н,5О.) = 2,5 моль/дм?. После раство-
рения витамина РР ‘доводят объем до метки волой, тщательно перемешивают и переносят в склянку
из темного стекла с притертой пробкой. Хранят раствор в холодильнике не более 3 мес.

4.2. Приготовление рабочего стандартного раствора витамина РР
концентрации 2 мкг/см?

В день провеления анализа 2 cm? основного стандартного раствора витамина РР (п. 4.1)
пипеткой вносят в мерную колбу вместимостью 100 cu, объем доводят водой до метки и тщательно
перемешивают.

4.3. Приготовление бромной воды

За 5 дней до проведения анализа в склянку темного стекла с притертой пробкой вносят 100 смз
воды и (в вытяжном шкафу) 5—6 см? брома. энергично встряхивают. Склянку с бромной водой
хранят в вытяжном шкафу в защищенном от света эксикаторе.

4.4. Приготовление роданбромидного раствора

Роданбромилный раствор готовят в вытяжном шкафу непосредственно перед применением.

К охлажденной на льлу бромной воде (п. 4.3), взятой в объеме, необходимом для анализа,
прибавляют по каплям охлажденный раствор роданистого калия или аммония массовой концент-
рации вначале 100 г/дм?, затем 10 г/дм? до полиого обесивечивания брома.

После этого постепенно, небольшими порциями вносят углекислый кальций до прекращения
выделения пузырьков газа и образования осадка. Раствор фильтруют в склянку из темного стекла с
притертой пробкой и оставляют на ледяной бане.

235

С. 3 ГОСТР 50479—93

4.5. Перекристаллизация метола

В стакане вместимостью 1000 см? нагревают до кипения 500 см? раствора серной кислоты
с (H,SO,) = 0,05 моль/лм?, добавляют 100 г метола и продолжают нагревать смесь до начала кипения.
Если раствор сильно окрашен, то к нему добавляют 10 г активированного угля, перемешивают и
сразу же фильтруют через воронку для горячего фильтрования или воронку Бюхнера, предварительно
нагретую кипящей водой, в химический стакан вместимостью 2000 cm}.

К фильтрату добавляют 700 см? этилового спирта. перемешивают, стакан помещают в ледяную
баню и оставляют в темноте на 4—5 ч. Выпавший осадок фильтруют через воронку Бюхнера,
кристаллы на фильтре промывают небольшими (по 30—40 cx) количествами охлажденного спирта
и высушивают на воздухе в темноте.

Перекристаллизованный метол сохраняют в склянке из темного стекла с притертой пробкой в
зашищенном от света месте.

4.6. Приготовление раствора метола

Непосредственно перед применением в мерной колбе вместимостью 100 см? растворяют 8,0 г
перекристаллизованного метола в растворе соляной кислоты с (HCI) = 0,5 моль/лм?. Доводят объем
до метки раствором соляной кислоты.

5. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

5.1, В зависимости от вида исследуемого продукта для освобождения связанных форм витамина
РР используют различные способы гидролиза.

5.1.1. При анализе продуктов переработки плодов и овощей без и с добавлением круп, молока
и творога применяют щелочной гидролиз.

Навеску пробы массой 1,0—10,0 г растирают в фарфоровой ступке с 1,5 г гидроокиси кальция.
Затем количественно переносят содержимое ступки в коническую колбу вместимостью 100 cx,
смывая 50—60 см? воды небольшими порциями. Колбу с пробой нагревают в течение 90 мин на
кипящей водяной бане, предварительно закрыв горлышко колбы маленькой воронкой или специ-
альной стеклянной пробкой-вкладышем, периодически встряхивая. После нагревания колбу охлаж-
дают до комнатной температуры. Затем объем гидролизата доводят водой ло 75 ex, перемешивают,
охлаждают 2 ч на ледяной бане или оставляют на ночь в холодильнике. Охлажденный гидролизат
фильтруют или центрифугируют.

25 сем? фильтрата помешают в цилиндр вместимостью 50 смз, добавляют 1—2 капли раствора
фенолфталеина и по каплям раствор серной кислоты с (H)SO,) = 2,5 моль/дм? до обесцвечивания.
Далее проводят обработку, как указано в п. 5.2.

$: При анализе продуктов переработки овощей с добавлением мяса, рыбы, яиц применяют
кислотный гидролиз.

Навеску пробы массой 1,0—10,0 г количественно переносят в коническую колбу вместимостью
100 смз, смывая 50—60 смз раствора серной кислоты с (H,SO,) =1 моль/дм? небольшими порциями.

Колбу с пробой нагревают в течение 90 мин на кипящей водяной бане, предварительно закрыв
горлышко колбы маленькой воронкой или специальной стеклянной пробкой-вкладышем. периоди-
чески встряхивая. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры. Объем гидролизата доводят
водой до 75 см?, тщательно перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр (первые 5—6 см?
фильтрата отбрасывают). 25 см? фильтрата помещают в цилиндр вместимостью 50 см?, добавляют
1—2 капли фенолфталеина и нейтрализуют раствором гидроокиси натрия с (NaOH) = 10 моль/дм*
до слабо-розового окрашивания и охлаждают. Избыток щелочи устраняют добавлением 1—2 капель
раствора серной кислоты с (Н;$0.) = 2,5 моль/дм?.

Далее проводят обработку, как указано в п. 5.2.

к Если фильтраты интенсивно окрашены, то рН раствора доводят до 8 по универсальной
индикаторной бумаге растворами кислоты или шелочи тех же концентраций, которые применялись
при гидролизе,

5.2. Очистка фильтрата

В колбу с нейтральным фильтратом вносят 2 см? раствора сернокислого цинка и затем раствор
гидроокиси натрия с (МаОН) = 4 моль/дм? по каплям 20 слабо-розового окрашивания. Тшательно
перемешивают, удаляют розовое окрашивание добавлением 1—2 капель раствора серной кислоты
с (H,SO,) = 2,5 моль/дм?, выдерживают в течение 10 мин, затем добавляют 1—2 капли этилового
спирта для устранения пены. Объем доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют через
складчатый фильтр.

236