ГОСТ 8756.22-80

ГОСТ 8756.22-80

                       М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й        С Т А Н Д А Р Т




                           ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ
                                    И ОВОЩЕЙ
                                  МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРОТИНА



                                           Издание официальное




                                                     Москва
                                                 Стаидартимформ
                                                       2010




сертификат на краску

УДК 664.8/.9:547.979.8.06:006.354                                                                 Группа 1159

М   Е   Ж   Г     О   С   У   Д   А    Р   С   Т   В   Е    Н   Н   Ы   Й        С Т А Н Д А Р Т


 ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ
                 Метод определения каротина                                           ГОСТ
                                                                                  8756.22-80
                   Fruit and vegetable products.
                Method for determination of carotene

МКС 67.080.01
ОКСТУ 9109

                                                                                       Дата введения 01.01.81


     Настоящий стандарт распространяется на плодоовощные консервированные продукты и
устанавливает метод определения каротина.
     Метод основан на фотометрическом определении массовой концентрации каротина в растворе,
полученном после экстрагирования каротина из продуктов органическим растворителем и очищен­
ном от сопутствующих красящих веществе помощью колоночной хроматографии. Нижний предел
определения 0,1 мкг/см3.

                                           1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
     1.1. Отбор проб и подготовка их к испытаниям — по ГОСТ 26313 и ГОСТ 26671.
     (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
                              2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ, МАТЕРИАЛЫ
     2.1. Дтя проведения испытания используют следующие аппаратуру, реактивы и материалы:
     - фотоэлектроколорнметр или спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны
450 им н абсолютной погрешностью измерения коэффициента пропускания не более 1 %;
     - весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г, с повероч­
ной ценой деления 2.0 мг;
     - весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 500 г, с повероч­
ной ценой деления 5,0 мг;
     - электрошкаф сушильный лабораторный с диапазоном нагрева от 40 до 200 "С, обеспечиваю­
щий поддержание заданной температуры в пределах ± 5 'С;
     - испаритель ротационный ИР-1М:
     - насос водоструйный по ГОСТ 25336 или насос Комовского;
     - колбы с тубусом для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336. вместимостью 250 или
500 см3;
     - ступку фарфорову ю по ГОСТ 9147;
     - фильтры стеклянные по ГОСТ 25336;
     - воронки диаметром 36 или 56 мм и воронки делительные цилиндрические, вместимостью
100 или 200 см3 по ГОСТ 25336;
     - палочки стеклянные по ГОСТ 21400;
     - стаканы типов В и Н по ГОСТ 25336, вместимостью 50 см3;
     - колбы мерные II класса по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 50 и 100 см3:
     - пипетки по НТД, вместимостью 1, 5 см3 и 10 см3;

      * С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104—2001. С 1 января 2010 г. на территории Российской Федерации
действует ГОСТ Р 53228-2008.

Издание официальное                                                                   11срсисча гка воспрещена
       ★
                                                                            © Издательство стандартов, 1980
                                                                             © СТАНДАРТИНФОРМ, 2010

                                                       70

ГОСТ 8756.22-80 С. 2

     - трубка стеклянная для хроматографической колонки длиной 200—250 мм, диаметром широ­
кого конца 15 мм. суженного — 5 мм;
     - пробирки типов ГМ и М2 по ГОСТ 25336;
     - эксикатор по ГОСТ 25336;
     - ацетон по ГОСТ 2603;
     - эфир петролейный или бензин авиационный по ГОСТ 1012 с температурой кипения 70—
90 ‘С. или гексан;
     - натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166. прокаленный в течение 1 ч, при 100 "С;
     - алюминия окись безводная, ч. д. а., для хроматографии, размер частиц (86 ± 5) мкм, ней­
тральная, или окись алюминия по Брокману И, нейтральная;
     - магния окись по ГОСТ 4526;
     - спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*;
     - калия гидроокись, х. ч., раствор с массовой долей 50 %; раслюр с массовой долей 10 % в
этиловом спирте, свежеприготовленный;
     - р-каротин, стандартный раствор или азобензол, ч. д. а., или калия бихромат, х. ч. по
ГОСТ 4220;
     - воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
     - песок кварцевый по ГОСТ 7031. прокаленный;
     - вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
     - бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026;
     - эфир этиловый;
     - кислоту аскорбиновую;
     - фенолфталеин, раслюр с массовой долей 1 % в этиловом спирте.
     (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).

                              3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

      3.1. П р и г о т о в л е н и е с т а н д а р т н о г о р а с т в о р а
      10 мг кристаллического каротина растворяют в гексане в мерной колбе вместимостью 100 см3
и доводят до метки растворителем. Перед построением градуировочного графика готовят рабочий
раствор следующим образом: 1 см3 стацдарлюго раствора разбавляют до 100 см3 гексаном; 1 см3
такого раствора содержит 1 мкг каротина;
      или 14,5 мг азобензола, перекристаллизованного из спиртового раствора, растворяют в 50 см3
элыового спирта и доводят объем до 100 см3; 1см3 такого раствора по окраске соответствует 2,35 мкг
каротина в 1 см3;
      или 36 мг бихромата калия растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 см' и доводят
объем до метки; 1 см3 такого раствора по окраске соответствует 2.08 мкг {)-каротина в 1 см3.
      (Измененная редакция, Изм. № 2).
      3.2. П р и г о т о в л е н и е а д с о р б е н т а
      Порцию окиси алюминия (или магния) высушивают в течение 60 мин при температуре 180 "С.
Добавляют 1 % днстллиропанной воды, встряхивают до получения однородной массы в закрытой
банке. В случае плохого разделения, адсорбент не увлажняют и используют сразу после высушивания.
      (Измененная редакция, Изм. № 1).
      3.3. П р и г о т о в л е н и е а д с о р б ц и о н н о й к о л о н к и
      В нижнюю часть стеклянной трубки для хроматографической колонки, вставленной в пробку ,
помешают небольшой кусочек ваты. Трубку наполняют окисью алюминия или окисью магния на
высоту 5—7 см. В качестве обезвоживающего вещества сверху насыпают безводный сернокислый
натрий высотой слоя 2 см. Трубку вставляют в колбу для отсасывания и смачивают растворителем,
используемым для экстракции каротина.
      3.4. П о с т р о е н и е г р а д у и р о в о ч н о г о г р а ф и к а
      Готовят серию растворов сравнения. Ятя этого в ряд пробирок налипают 1,0; 1.5; 2,0; 2,5; 3,0;
3.5; 4,0 см3 свежеприготовленного рабочего раствора каротина и доводят объем растворов до 10 см3
гексаном. Полученные растворы содержат соответственно 0.10; 0,15; 0,20; 0.25; 0.30; 0.35; 0,40 мкг
     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652—2000.

                                                71

С. 3 ГОСТ 8756.22-80

каротина в I см3. Измеряют на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре оптическую плот­
ность полученных растворов по отношению к гексану в кюветах с расстоянием между рабочими
гранями I см при длине волны 450 нм. Строят график зависимости оптической плотности раствора
от массовой концентрации каротина (мкг/см3) D = /(с ) .
     При отсутствии кристаллического каротина градуировочный график строят, используя стан­
дартный раствор азобензола или бихромата калия. При использовании азобензола оптическую
плотность растворов сравнения измеряют по отношению к спирту, а бихромата калия по отношению
к воде при длине волны 450 нм.
     Построение градуировочного графика повторяют не реже одного раза в 6 мес.
     (Измененная редакция, Изм. № 2).

                              4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

     4.1. Э к с т р а к ц и я к а р о т и н а
     Из пробы консервированного продукта берут в ступку навеску массой 1—3 г (в зависимости
от предполагаемого содержания каротина) с погрешностью не более ± 0,01 г. Растирают в ступке с
равным количеством кварцевого песка и 5—7 см3 ацетона. Ацетоновую вытяжку, не затрагивая
осадка, фильтруют в делительную воронку через стеклянный фильтр. Экстракцию проводят до
обесцвечивания последней порции ацетона. Ацетоновый фильтрат встряхивают в делительной
воронке с 15 см3 второго экстрагента, в качестве которого используют петролейный эфир, бензин
или гексан. Каротин переходит из нижнего ацетонового в верхний слой второго экстрагента. Если
после встряхивания слои полностью не разделяются, добавляют 1—2 см5 воды. После разделения
слоев нижний водоацетоновый слой отбрасывают, а верхний слой промывают водой до полного
удаления ацетона.
     Жидкие продукты (соки, сиропы) в количестве 10,0—20,0 г сразу вносят в делительную воронку
с 20 см3 ацетона. Экстракт встряхивают в делительной воронке и добавляют 15 см3 гексана.
Встряхивают осторожно во избежание образования эмульсии.
     В продуктах, содержащих жир свыше 5 %. проводят горячее омыление жира. Пробу
продукта, растертую с песком, помешают в круглодонную колбу с обратным холодильником,
добавляют около 1 г аскорбиновой кислоты и 30 см3 раствора гидроокиси калия в этиловом
спирте. Смесь доводят до кипения на водяной бане и выдерживают в течение 30 мин. После
охлаждения содержимое количественно переносят в делительную воронку, ополаскивая колбу
20 см3 воды. Затем экстрагируют каротин путем добавления гексана (бензина, петролейного
эфира) порциями по 5—7 см-5 при встряхивании до обесцвечивания последней порции. Собирают
экстракты в другую делительную воронку и промывают водой до отсутствия щелочной реакции
по фенолфталеину, тщательно сливая воду.
     4.2. О ч и с т к а э к с т р а к т а к а р о т и н а
     Экстракт каротина, полученный по п. 4.1, пропускают через адсорбционную колонку со
скоростью 1.0—1,5 см3 в минуту. Колонку промывают растворителем, используемым для второй
экстракции до тех пор, пока не начнет выходить бесцветный элюат. На колонке остаются красящие
вещества, адсорбционная способность которых выше, чем у каротина. Элюат каротина переносят в
мерную колбу на 25 или 50 см3, доводят до метки растворителем и определяют в нем концентрацию
каротина на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре при длине волны 450 нм.
     В случае неотделения (i-каротина в растворитель добаазяют 1—2 % ацетона.
     При анализе продуктов из моркови и моркови в смеси с компонентами, не содержащими
Р-каротин, очистку экстракта на колонке не производят.
     4.1, 4.2. (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
     4.3. О п р е д е л е н и е м а с с о в о й к о н ц е н т р а ц и и к а р о т и н а
     Измеряют оптическую плотность исследуемого раствора на фотоэлектроколориметре или
спектрофотометре при длине волны 450 нм, в кюветах с расстоянием между рабочими гранями К) мм
против чистого растворителя.
     По гравировочному графику находят массовую концентрацию каротина (мкг/см3). Если
оптическая плотность исследуемого раствора превышает 0,45, делают соответствующее разведение.

                                              72