ГОСТ 33036-2014

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
                                                         (МГС)
                            INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION
                                                           (ISC)




                                                                                         ГОСТ
                                     МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ
                                          СТАНДАРТ                                       33036    -



                                                                                         2014



                             МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ
                         ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ
                                ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
                                    Определение острой токсичности
                                         для дождевых червей



                                                    Издание официальное




                                                               Москва
                                                           Стандартинформ
                                                                2019




сертификация продукции

ГОСТ 33036— 2014


                                                                     Предисловие
     Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандар­
тизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения»
и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила
и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления
и отмены»

         Сведения о стандарте

     1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский
научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и
веществ» (ФГУП «ВНИЦСМВ») на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии
документа, указанного в пункте 5
     2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
     3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации
(протокол от 20 октября 2014 . № 71-П)

         За принятие проголосовали:

     К ра тко е н а и м е н о в а н и е стр а н ы         Код стр а н ы по               С о кр а щ е н н о е н а и м е н о в а н и е н а ц и о н а л ь н о го
        по М К (И С О 3 1 6 6 ) 0 0 4 — 97          М К (И С О 3 1 6 6 ) 0 0 4 — 97                   о р га н а по с т а н д а р ти за ц и и

     Азербайджан                                                  AZ                  Азстандарт
     Армения                                                      AM                  Минэкономики Республики Армения
     Беларусь                                                     BY                  Госстандарт Республики Беларусь
     Киргизия                                                     KG                  Кыргызстандарт
     Молдова                                                      MD                  Молдова-Стандарт
     Россия                                                       RU                  Росстандарт
     Таджикистан                                                  TJ                  Таджикстандарт

     4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 20 ноября
2014 г. № 1695-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33036— 2014 введен в действие в качестве на­
ционального стандарта Российской Федерации с 1 августа 2015 г.
     5 Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD, Test No. 207:1984 «Опреде­
ление острой токсичности для дождевых червей» («Earthworm, Acute Toxicity Tests, IDT).
     Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного между­
народного документа для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6)
     6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
     7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2019 г.




     Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изме­
нений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных
стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответству­
ющих национальных органов по стандартизации.
     В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая ин­
формация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по
стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге «Межгосударственные стандарты»



                                                                                       © Стандартинформ, оформление, 2015, 2019

                                               В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью
                                          или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве офи­
                                          циального издания без разрешения Федерального агентства по техническому
                                          регулированию и метрологии
II

ГОСТ 33036—2014

М   Е     Ж   Г    О   С    У   Д   А    Р   С   Т   В    Е   Н   Н    Ы   Й            С   Т    А   Н      Д   А   Р   Т



        МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ
                             ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

                           Определение острой токсичности для дождевых червей

                  Test methods for chemicals of environmental hazard. Acute toxicity tests for earthworms


                                                                                       Дата введения — 2015—08—01



        1 Область применения
     Настоящий стандарт устанавливает метод определения острой токсичности химических веществ
для дождевых червей.


        2 Термины и определения
     В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
     2.1 медианное значение летальной концентрации (LC50): Концентрация химического веще­
ства в пищевом рационе, которая приводит к 50 %-ной гибели тестируемых животных.
      П р и м е ч а н и е — Для контактного теста концентрацию вещества выражают в миллиграммах на квадрат­
ный сантиметр, для теста с искусственной почвой — в миллиграммах на килограмм (сухой массы почвы).


        3 Принцип теста
     Скриннинговый тест (контактный тест с фильтровальной бумагой) включает воздействие на чер­
вей тестируемого вещества, нанесенного на влажную фильтровальную бумагу, и позволяет идентифи­
цировать вещества, потенциально токсичные для дождевых червей.
     Тест с искусственной почвой включает экспозицию дождевых червей в специально приготовлен­
ной искусственной почве, содержащей тестируемое вещество в определенном диапазоне концентра­
ций. Гибель дождевых червей оценивается на 7-й и 14-й день после применения тестируемого ве­
щества.
     В серии тестируемых концентраций вещества одна концентрация не должна вызывать гибели, а
еще одна — должна приводить к гибели всех червей.


        4 Информация о тестируемом веществе
        Должна быть известна следующая информация о тестируемом веществе:
        - растворимость в воде;
        - давление паров;
        - структурная формула;
        - чистота;
        - стабильность в воде, почве и на свету;
        - коэффициент распределения н-октанол/вода;
        - результаты теста на способность к биоразложению.




Издание официальное
                                                                                                                            1

ГОСТ 33036— 2014


     5 Вещество сравнения
     Вещество сравнения в тесте для определения 1_С50 должно выбираться по собственному усмо­
трению и гарантировать, что лабораторные условия, в которых проводят опыты, соответствуют требо­
ваниям и не подвержены существенным временным изменениям. Оптимальным веществом сравнения,
удовлетворяющим этим условиям, является хлорацетамид.


     6 Достоверность теста
     Тест считается достоверным, если гибель червей в контроле не превышает 10 % к концу испы­
тания.


     7 Описание теста
     7.1 Оборудование и материалы
      Обычное лабораторное оборудование и специальные принадлежности:
      - культура дождевых червей (см. 7.2);
      - фильтровальная бумага среднего качества толщиной примерно 0,2 мм и плотностью от 80 до
85 г/м2;
      - искусственный почвенный субстрат, приготовленный следующим образом:
      10 % сфагнового сухого и тонко растертого торфа (pH 5,5— 6,0; без видимых растительных остат­
ков);
      20 % каолиновой глины (с содержанием каолина около 30 %);
      70 % промышленного песка (предпочтителен мелкий песок с преобладанием частиц размером от
50 до 200 микрон — более 50 %).
      pH в искусственном субстрате регулируют в пределах 6,0 ± 0,5 карбонатом кальция [1]. Сухие со­
ставные части тщательно смешивают в строго установленных пропорциях, каждый раз взвешивая общую
массу. Влажность смеси определяют при высушивании небольшого количества образца при температуре
105 °С. Деионизированную воду добавляют к полученной смеси до влажности примерно 35 % сухой
массы таким образом, чтобы при сжатии субстрата в руке не выделялась вода. Для некоторых видов
торфа приемлемым будет и более высокое содержание влаги.
      Сосуды, используемые в тесте, должны быть стеклянными вместимостью около 1 л и должны
быть покрыты стеклянными крышками или перфорированной пленкой.
      Освещение лабораторной комнаты или камеры должно контролироваться в пределах от 400 до
800 Люкс, температура — (20 ± 2) °С.

     7.2 Экспериментальные животные
      Рекомендуемый вид дождевых червей для теста — Eisenia foetida (Michaelsen). Этот вид не
совсем типичен для традиционных типов почв и обычно обитает в почвах, богатых органическим веще­
ством. Он чувствителен к химическим веществам, имеет короткий жизненный цикл — черви выводятся
из коконов за 3— 4 недели и достигают половой зрелости за 7— 8 недель при температуре окружающей
среды 20 °С. Вид очень плодовитый, взрослый червь производит от 2 до 5 коконов в неделю, из кото­
рых выводятся другие черви. Коконы можно приобрести или разводить, разделив популяцию на части
(см. приложение А).
      Eisenia foetida существует в виде двух рас червей, морфологически сходных между собой [2]. Но
одна раса — Е. foetida foetida имеет типичные поперечные полоски на сегментах, а другая — Е. foetida
andrei не имеет таковых и более красного цвета. В тесте используют Е. foetida foetida, однако возможно
использование и другой расы.
      Для опытов берут взрослых червей (в возрасте от двух месяцев) и живой массой от 300 до 600 мг.

     7.3 Выполнение теста
     7.3.1 Тест с фильтровальной бумагой
     Рекомендуются плоскодонные стеклянные колбы с плоским дном или другие стеклянные сосуды,
высотой 8 см и диаметром 3 см с плоским дном, стенки которых покрывают фильтровальной бумагой,
нарезанной таким образом, чтобы ее края частично перекрывали друг друга.
2