ГОСТ 30726-2001

ГОСТ 30726-2001


                         М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й        С Т А Н Д А Р Т




                                     ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

                             Методы выявления и определения количества
                                   бактерий вида Escherichia coli


                                              Издание официальное




                                                    Ст*1щарттфо|ш
                                                         2010




независимая экспертиза

ГОСТ 30726-2001

                                            Предисловие

    1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овоше-
сушилыюй промышленности (ВНИИКОП) и МТК 93 «Продукты переработки плодов и овошей»

      ВНЕСЕН Госстандартом России

     2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации
(протокат № 19 от 24 мая 2001 г.)

       За принятие проголосовали:

              Н аим енование   ю сударстм         Н ам м с n o u n н е   н ац и о н ал ьн о го орган а   no   c iiiH ja p iM u u iiH



     Азербайджанская Республика                   Азгосстандарт
     Республика Армения                           Арм госстанд арг
     Беларусь                                     Госстандарт Республики Беларусь
     Грузия                                       Грузсгандарт
     Республика Казахстан                         Госстандарт Республики Казахстан
     Кыргызская Республика                        Кыргызстанларт
     Республика Молдова                           Молдовастандарт
     Российская Федерация                         Госстандарт России
     Республика Таджикистан                       Таджиксгандарт
     Туркменистан                                 Глав!осслужба «Туркмснсгандарглары*
     Республика Узбекистан                        Узгосстандарт
     Украина                                      Госстандарт Украины


     3 Постаноазением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации и
метрологии от 27 июля 2001 г. № 297-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 30726—2001 введен
в действие в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 июля 2002 г.

      4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

      5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2010 г.




                                                                    © ИПК Издательство стандартов, 2001
                                                                         © СТАНДАРТИНФОРМ. 2010

     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения
Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
II                                              104

ГОСТ 30726-2001

М Е Ж       Г   О С    У    Д А     Р С     Т В     Е      Н   Н    Ы    Й       С Т А Н Д А Р Т



                                       ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

             Методы выявления н определения количества бактерий вида Escherichia coli

                   Food-stulTs. Methods for detection and determination of Escherichia coli




                                                                                  Дата введения 2002—07—01

     1 Область применения
     Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает метод выявления
в определенной навеске пищевого продукта бактерий вида Escherichia coli (E.coii) и три метода
определения их количества: метод наиболее вероятного числа (НВЧ) и методы посева в или на агарн-
зованные селективно-диагностические среды.
     Выбор метода определения количества E.coii зависит от предполагаемой обсемеиенности про­
дукта бактериями семейства Enterobacteriaceae и осуществляется в соответствии с требованиями
ГОСТ 30518*.

     2 Нормативные ссылки
     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     ГОСТ 9284-75 Стекла предметные для микропрспаратон. Технические условия
     ТОСТ 10444.1-84 Консервы. Приготовление растворов реактивов, красок, индикаторов и
питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе
     ГОСТ 24104—88** Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические
условия
     ГОСТ 26668-85 Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологичес­
ких анализов
     ГОСТ 26669—85 Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических
анализов
     ГОСТ 26670—91 Продукты пищевые. Методы культивирования микроорганизмов
     ГОСТ 29184-91 Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий
семейства Enterobacteriaceae
     ГОСТ 30425—97 Консервы. Метод определения промышленной стерильности
     ГОСТ 30518-97/ГОСТ Р 50474—93 Продукты пищевые. Метолы выядтения и определения коли­
чества бактерий группы кишечных палочек (кодиформных бактерий)
     ГОСТ 30519-97/Р 50480-93*** Продукты пищевые. Метод выяатения бактерий рода Salmonella

     3 Сущность методов
     Методы выяатения и определения НВЧ E.Coli основаны на высеве определенного количества
продукта и (или) разведений навески продукта в жидкую селективную среду с лактозой, инкубирова­
нии посевов, учете положительных колб (пробирок), пересеве культуратьной жидкости на поверх-

       * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52816—2007.
      " С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001. На территории Российской Фсдсрашш действует
ГОСТ Р 53228-2008.
    *** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52814—2007 (ИСО 6579:2002).

Издание официальное
                                                     105                                                 1

ГОСТ 30726-2001

иость агариэованной селективно-диагностической среды для дальнейшего подтверждения по
биохимическим и культуральным признакам роста принадлежности выделенных колоний к E.coli.
      Методы определения количества E.coli посевом в или на ави зо ван н ы е селективно-диагности­
ческие среды основаны на высеве определенного количества продукта или его разведений в или на
агаризованную селективно-диагностическую среду, инкубировании посевов, подсчете типичных для
E.coli колоний, подтверждении по биохимическим и культуральным признакам роста принадлежности
выделенных колоний к E.coli.

     4 Отбор и подготовка проб

     Отбор и подготовка проб — по ГОСТ 26668. ГОСТ 26669.

     5 Аппаратура, материалы, реактивы (в т. ч. индикаторы)

      Для проведения анализа применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 10444.1 со
следующими дополнениями:
      весы лабораторные обшего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания до
1 кг и допустимой погрешностью ±10 мг (для взвешивания продукта) и весы с наибольшим пределом
взвешивания 200 г. 2-го класса точности (для взвешивания реактивов);
      микроскоп биологический с приспособлением для фазово-контрастного микроскопирования,
обеспечивающий увеличение 9 0 0 - 1000х:
      петлю бактериологическую;
      поплавки (трубки Дархема);
      стекла предметные по ГОСТ 9284;
      термостаты с диапазоном рабочих температур 28-55 "С. позволяющие поддерживать заданную
температуру с допустимой погрешностью ±1 *С;
      бриллиантовый зеленый;
      генцнанвиолет;
      желчь говяжью сухую или натуральную;
      магний сернокислый;
      метиловый красный;
      метиловый фиолетовый;
      натрий-аммоний фосфорнокислый дву замешенный;
      сорбзтт;
      феноловый красный;
      целлобиоза.

     6 Подготовка к анализу

     6.1 Приютовлеиие растворов и реактивов
     6.1.1 Реактив Кларка: 0,1 г метилового красного растворяют в 300 см3 этилового спирта и
доба&ляют 200 см5дистиллированной воды. Реактив хранят в посуде из темного стекла не более I мес
при температуре (4±2) *С.
     6.1.2 Реактивы Ковача и Эрлиха готовят по ГОСТ 30519.
     6.1.3 Спиртовой раствор а-нафтола готовял по ГОСТ 30519.
     6.1.4 Приготовление индикаторных бумажек для обнаружения индола: 3—5 г парадиметиламино-
бензальдегнда, 10 см ’ концентрированной фосфорной кислоты и 50 см3 этилового спирта тщательно
перемешивают в фарфоровой ступке. В полученном растворе смачивают полоски фильтровальной
бумаги, высушивают и нарезают узкими полосками шириной около I см. Цвет полученных
бумажек — желтый. Индикаторные бумажки хранят не белее 1 мес в темном месте.
     6.1.5 Раствор гидроокиси калия массовой концентрации 400 г/дм3: 40 г гидроокиси кдлня пере­
носят в мерную колбу вместимостью 100 см' и растворяют в дистиллированной воде. Раствор доводят
до метки.
     6.1.6 Реактивы и растворы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1.
2                                              106