ГОСТ 29267-91

ГОСТ 2 9 267-91


                     М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й          С Т А Н Д А Р Т




                                КАРТОФЕЛЬ СЕМЕННОЙ
                            ОЗДО РОВЛЕННЫ Й ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ

                                 ПРИЕМКА И МЕТОДЫ АНАЛИЗА




                                          Издание официальное




                                                Стандарта ифпцм
                                                     2010




украшение кружевом

УДК 635.21:631.531:006.354                                                                          Группа С49

М   Е   Ж   Г   О   С    У   Д    А   Р    С   Т    В   Е    Н    Н   Ы   Й       С Т А Н Д А Р Т

                         КАРТОФЕЛЬ СЕМЕННОЙ
                     Оздоровленный исходный материал

                         Приемка и методы анализа                                             ГОСТ
                                                                                            29267-91
                    Seed potatoes. Normalized initial material.
                    Acceptance rules and methods of analysis

МКС 65.020.20
ОКСТУ 9731

                                                                                         Дата введения 01.01.93


     Настоящий стандарт устанавливает правила приемки и методы определения качества оздоровлен­
ного исходного материала картофеля.
     Требования настоящего стандарта являются обязательными.

                                                   1. ПРИЕМКА

       1.1. Оздоровленный исходный материал картофеля принимают партиями. Партией считают любое
количество оздоровленного исходного материала картофеля одного ботанического сорта, одного метода
получения, предъявленное к приемке одновременно и оформленное одним документом о качестве —
аттестатом (см. приложения 1-2).
       При обнаружении очагов карантинных болезней и вредителей в областях, краях и республиках,
не имеющих областного деления, каждую партию сопровождают карантинным сертификатом.
       1.2. Я зя контроля качества оздоровленного исходного материала картофеля отбирают пробы рас­
тений. клубней.
       1.3. Порядок отбора проб
       1.3.1. От исходных растений, полученных в культуре in vitro из микрочеренков, для оценки
по внешним признакам и методом иммуноферментного анализа (ИФА) отбирают пробы из разных
мест партии методом случайного отбора. Размер пробы должен составлять не менее 1 % растений по
счету.
       1.3.2. Контроль качества микроклубней методом ИФА проводят в стадии роста растений in vitro.
Пробы отбирают no п. 1.3.1.
       1.3.3. Пробы в поле, теплице для ИФА отбирают равномерно по диагонали участка:
      в теплице - не менее чем от 1 % растений;
      в поле (первая полевая репродукция) - не менее чем от 50 растений с гектара.
       В питомниках отбора исходных растений отбирают листья с каждого растения, намечаемого к
отбору.
       1.3.4. От партии клубней, выращенных в пазе или теплице, пробы для клубневого и иммунофер-
ментного анализов отбирают по ГОСТ 11856 с учетом следующих дополнений.
       При реализации клубней по счету количество точечных проб отбирают в соответствии с требова­
ниями табл. 1.




И манне официальное                                                                     Перепечатка воспрещена
                                                                              <Ё Издательство стандартов. 1992
                                                                                О СТАНДАРТЫ НФОРМ , 2010
                                                        79

С. 2 ГОСТ 29267-91

                                                                                            Таблица I

   Количсс!»» клубней о партии, тыс. шт.                    Количеств точечных проб. шт.

                      До 20                                               К)
               Св. 20 до 40                                               15
               . 40                           15 и дополнительно по 2 точечные пробы от каждых последую­
                                           щих 20 тыс. клубней

     Размер точечной пробы для ИФЛ — не менее 20 клубней, объединенной пробы - не менее
200 клубней.
      1.4. Клубни, отобранные для проведения иммуноферментного и клубневого анализов (за исклю­
чением больных и поврежденных), после проведения анализов присоединяют к исследуемой партии.
      1.5. При разногласиях по результатам анализов проводят повторный контроль на вновь отобран­
ной по п. 1.3.3 или 1.3.4 удвоенной пробе.
      1.6. Результаты повторного контроля являются окончательными.
      1.7. Результаты проверки распространяют на всю партию.

                               2. МЕТОДЫ ОП РЕДЕЛЕН ИЯ КАЧЕСТВА

        2.1. Качество оздоровленного исходного материала определяют методами: визуазьной оценки
растений, клубневого анализа и иммуноферментного анализа показателей скрытой зараженности ви­
русной и бактериальной инфекциями. Наличие бактериальной инфекции определяют только в сомни­
тельных случаях (при нечетких внешних симптомах и при повышенной чувствительности сорта к
бактериозам).
        При завозе картофеля из хозяйств, где встречается стеблевая нематода, после проведения клубне­
вого анализа при неясном ее определении проводят дополнительную диагностику тепличного и поле­
вого материалов на наличие стеблевой нематоды вороночным методом.
        2.2. Аппаратура
        2.2.1. Инструменты и материалы для проведения клубневого анализа - по ГОСТ 11856.
        2.2.2. При проведении ИФЛ используют:
        полистирольные 96-луночиые микроплаты;
        пипетки-дозаторы отечественного или зарубежного производства объемом 0,002—0.02 см*,
0 ,0 2 -0 .2 см3, 0 ,2 -1 .0 см3 по ГОСТ 1770, ГОСТ 6859;
        пипетки стеклянные вместимостью 1 - 10 см 3 по ГОСТ 29227;
        ступку фарфоровую диаметром 5 см по ГОСТ 9147;
        фотометры А ИФ-Ц-01С. АКИ-С-01;
        набор реактивов для ИФЛ;
        приспособление для отжатия соков - пресс электрический, ножной или ручной по ГОСТ 7236*;
        приемники для листьев (пластмассовые патроны, трубчатые контейнеры, ячеистые ящики, план­
шеты из пленки или ткани с кармашками);
        посуду мерную вместимостью I; 0.5; 0,2; 0.1: 0.05; 0.01 дм 3 по ГОСТ 1770:
        весы аналитические или торсионные по ГОСТ 29329**;
        термостат;
        холодильник бытовой по ГОСТ 26678;
        приемники для выжатого сока (пробирки, пластины с углублениями) по ГОСТ 19908.
        2.2.3. При диагностике стеблевой нематоды используют:
        микроскоп или бинокуляр по ГОСТ 8074;
        скальпель или нож столовый;
        воронки диаметром 10—15 см;
        пробирки диаметром 1,0—1,2 см. длиной 5 —6 см по ГОСТ 19908;
        ткань капроновую (размер ячеек 0,5—2,0 мм) по ГОСТ 23114;
        марлю по ГОСТ 11109 или молочные (ватные) фильтры;
        синьку метиленовую:
        стекла предметные по ГОСТ 9284.

      * На территории Российской Федерации в части рада. 4. 6 действует ГОСТ Р 52786—2007, в части разд. 2.
3. 5. приложений 1. 2 ГОСТ Р 52787-2007.
      ** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228—2008.
                                                    80

ГОСТ 292 6 7 -9 1 С. 3

       2.3. Метод визуальной оценки
       2.3.1. Метод заключается в диагностике зараженности растений и клубней по признакам, види­
мым невооруженным глазом. При тщательном осмотре вываляют патологические отклонения от нормы
по окраске, форме и фактуре листьев, стеблей, общему развитию куста, пробирочного растения,
форме и окраске клубней.
       2.3.2. Визуальную оценку оздоровленного исходного материала проводят.
       непосредственно перед реализацией в соответствии с требованиями п. 1.3.1 - для растений
in vitro:
       во время приемки в установленном порядке —для посадок в поле:
       сплошным осмотром растений — в теплине;
       при клубнепом анализе — для клубней.
       Результаты оценки в поле, теплице оформляют актом приемки исходного оздоровленного мате­
риала (см. приложение 3).
       2.3.3. Описания основных внешних признаков грибных, бактериальных и функциональных (не­
паразитарных) болезней клубней картофеля приведены в ГОСТ 11856. вирусных болезней растений и
клубней - в приложениях 4, 5.
       2.4. Метод клубневого анализа
       2.4.1. Клубневой анализ проводят по ГОСТ 11856. определяя показатели качества в соответствии
с требованиями ГОСТ 29268*.
       2.4.2. Тепличные клубни разрезают только п сомнительных случаях.
       2.5. Метод иммуноферментного анализа
       2.5.1. Подготовка к анализу
       2.5.1.1. Для проведения ИФЛ отбирают пробы:
       на вирусы — листовой материал (проба листьев с верхнего, среднего и нижнего ярусов расте­
ний) или ростки клубней длиной 1—2 см;
       на бактерии — стебли длиной 5 - 10 см. срезанные во время уборки на уровне корневой шейки,
или кусочки ткани размером I - 2 см, вырезанные в столонной части клубия.
       Пробирочные растения диагностируют только на вирусы.
       2.5.1.2. Клубни проращивают при температуре 18—20 *С до появления ростка длиной 1—2 см. Если
клубни находятся в состоянии глубокого покоя, то его прерывают обработкой в парах риндита (1 см 1
на I кг клубней) в течение 48 ч при температуре 25 *С в герметической камере или обработкой
раствором с ростовыми веществами — (10 г тиомочевины и 5 мг гиббереллина на 1 дм ' поды) в
течение 20—30 мин.
       2.5.1.3. Отобранные пробы (листья, кусочки стеблей или клубней) измельчают до кашицеобраз­
ного состояния в сту пке или отжимают сок прессом.
       2.5.1.4. Приготовление рабочих растворов из набора реактивов для ИФЛ
       2.5.1.4.1. Приготоаление покровного буфера. Содержимое флакона «покровный буфер* растворя­
ют в 100 см ' дистиллированной воды.
       2.5.1.4.2. Приготовление антител. 0,1 см* концентрированного раствора антител разводят в 10 см3
покровного буфера. Для приготовления концентрированного расгвора антител сухое содержимое фла­
кона с этикеткой «антитела» растворяют в I см3 покровного буфера.
       2.5.1.4.3. Приготоаление промывочного буфера. Содержимое флакона с этикеткой «промывоч -
ный буфер» растворяют в 2 дм 3 дистиллированной воды, добааляют 0,5 см3 детергента на 1 дм3
буферного раствора.
       2.5.1.4.4. Приготовление буфера для проб и разведения конъюгата. К 250 см ' промывочного буфе­
ра добавляют 1,0 г бычьего сывороточного альбумина (содержимое флакона).
       2.5.1.4.5. Приготоаление конъюгата. 0,02 см 1 концентрированного раствора из флакона «конь-
югат» смешивают с 10 см3 пробно-конъюгатного буфера.
       2.5.1.4.6. Приготоаление положительного контроля. Содержимое флакона «положительный конт­
роль* растворяют в 1 см3 пробно-конъюгатного буфера.
       2.5.1.4.7. Приготовление субстрата. I объем буферного концентрата из флакона «субстратный бу­
фер* разбавляют 4 объемами дистиллированной воды. В 10 см3 буферного раствора растворяют 4 мг
содержимого флакона «субстрат*.


     * На территории Российской Федерации рекомендуется использовать ГОСТ Р 53136—2008.
                                                 81