ГОСТ 28087-89

ГОСТ 28087—89

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ВАКЦИНА ПРОТИВ БОТУЛИЗМА НОРОК

ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ И МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ

Издание официальное

53 1- 2005

УДК 616.981.553—085.371:619:006.354

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

Грушиа P3t

стад АРТ.

ВАКЦИНА ПРОТИВ БОТУЛИЗМА НОРОК

Технические требования и методы контроля

Уассте for mink botulism

гост
28087—89

Technical requirements and methods of control

MKC 11.220
OKCTY 9382

Дата введения 01.01.90

Настоящий стандарт распространяется на вакцину против ботулизма норок, изготовленную из
культуры штамма Cl, botulinum типа С-альфа, инактивированную формалином и осажденную алю-
мокалиевыми квасцами и предназначенную для профилактической иммунизации норок.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

По физико-химическим и иммунобиологическим свойствам вакцина должна соответствовать
требованиям и нормам, указанным в табл. 1.

Таблица 1

Наименование показателя

Характеристика и норма

1. Внешний вид

2. Концентрация
ионов (pH)

водородных

3. Типичность микрофлоры

4. Стерильность

5. Безнрелность

6. Иммуногенная активность

Суспензия серовато-белого цвета. после отстаивания на дне флакона
вы падает рыхлый осадох светло-серого цвета, легко разбивающийся при
встряхивании в гомогенную взвесь. Не допускается наличие примесей,
плесени, нерззбившихся хлопьев, трещин флаконов

7.97.2
В мазках. окрашенных по Граму. крупные (4,6 «0.8—1,2 мкм) грампо-

ложительные палочки с закругленными кониами. овальные споры или
палочки со спорой, имеющие характерную форму теннисной ракетки

В посевах из вакцины на питательных средах не дол:
бактериальной и грибковой микрофлоры

но быть роста

Подкожное введение вакцины белым мышам в дозе | ем? и морским
свинкам в дозе 2 см? не должно вызывать их заболевания и гибели в
течение 10 сут наблюдения

Доза вакцины в холичестве (,071—0,21 см? предохраняет от гибели
50 & белых мышей при введении им через 21 сут 10 ДЛМ ботулического
токсина типа С, при гибели 60 &—100 % невакцинированных (конт-
рольных) живозных, которым вводят токсин в дозе 1.0 ДЛМ

Излание официальное

Перепечатка воспрещена

© Излательство стандартов, 1989
© Станлартинформ, 2007

С. 2 ГОСТ 28087—89

2. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
2.1. Отбор проб

2.1.1. Для проверки качества вакцины против ботулизма норок из разных мест каждой серии
отбирают 20 флаконов, из которых 10 используют для проведения испытания, а 10 — хранят вархи-
ве государственного контролера в пределах срока тодности препарата.

2.1.2, Пробы, направляемые в архив, опечатывают и снабжают документом установленной
формы с указанием:

наименования биопрепарата;

даты изготовления;

номера серии;

номера контроля;

даты отбора проб;

объема серии;

срока годности;

обозначения настоящего стандарта;

должности и подписи липа, отобравшего пробу.

2.2. Определение внешнего внда

Внешний вид определяют визуально. Каждый флакон с вакциной встряхивают, просматрива-
JOT в проходящем свете и олновременно проверяют герметичность укупорки, наличие трещин и
правильность этикетирования.

2.3. Определение концентрации водородных нонов (рН)

Для проведения испытания используют два флакона с вакциной.

Концентрацию водородных ионов вакцины определяют электрометрическим методом, приме-
HAA потенциометры. Порядок определения — в соответствии с правилами, приложенными к при-
бору.

2.4. Определение типичности микрофлоры

Сущность метода заключается в определении типичности микрофлоры при микроскопичес-
ком исслеловании окрашенных мазков из вакцины.

2.4.1. Аппаратура и материалы

Микроскоп биологический с иммерснонной системой по НТД.

Стекла предметные по ГОСТ 9284.

Масло иммерсионное по ГОСТ 13739.

Набор бактериологических красок.

2.4.2. Проведение испытания

Мазки готовят на предметных стеклах из 3 флаконов с вакциной. Мазки окрашивают по Граму
и просматривают под иммерсионной системой микроскопа.

2.4.3. Обработка результатов

Наличие грамположительных палочек с закругленными концами, овальных спор или палочек
со спорой в форме теннисной ракетки свидетельствует о типичности данной микрофлоры.

2.5. Определение стерильности

Сущность метода заключается в определении отсутствия роста бактериальной и грибковой
микрофлоры в посевах из вакцины на питательные среды.

2.5.1. Аппаратура, материалы и реактивы — по ГОСТ 28085.

2.5.2. Проведение испытания

Для определения стерильности используют 10 флаконов с вакциной. Перед проведением ис-
пытания флаконы с вакциной встряхивают до получения гомогенной взвеси.

Испытание проводят путем посева из каждого флакона по 1,0 см? вакцины в 3 пробирки с
МПБ, МПА, МППБ под вазелиновым маслом, агаром Сабуро или Чапека и по 2,0 см? в два флако-
на с МПБ и МПИБ под вазелиновым маслом.

Через 20 сут инкубирования из посевов во флаконах проводят пересев на все вышеуказанные
среды.

2.5.3. Обработка результатов.

Отсутствие роста бактериальной и грибковой микрофлоры в посевах вакцины на питательных
срелах после их выдерживания в термостате в течение 35 сут и в пересевах в течение 15 сут при тем-
пературе (37 + 0,5) °С. для среды Сабуро или Чапека при (22 + 1) °С, свидетельствует о стерильности
вакцины.

ГОСТ 28087—89 С. 3

2.6. Определение безв

Сущность метода заключается в определении реакции у лабораторных животных на введение
вакцины в тест-дозе.

2.6.1. Аппаратура и материалы

Шприцы вместимостью 2 и 5 см? по ГОСТ 22967.

Иглы инъекционные по ГОСТ 25377*.

Флаконы стеклянные вместимостью 200 смз.

Пипетки стеклянные мерные вместимостью 1, 5 и 19 см?.

2.6.2. Подготовка к испытанию

Для проведения испытания используют 10 флаконов с вакциной. Из каждого флакона после
тщательного встряхивания отбирают по 5—10 см? вакцины в стерильной флакон, объединяя
пробы.

2.6.3. Проведение испытания

Для определения безвредности вакцины используют белых мышей живой массой 18—20 ги
морских свинок живой массой 350—400 г. Десяти белым мышам вакцину вводят подкожно в облас-
ти спины по 1 см? и пяти морским свинкам подкожно в области живота по 2 смз.

2.6.4. Обработка результатов

Вакцину считают безвредной, если в течение 10 сут после ее введения не наступает гибель или
заболевание животных. Допускается на месте введения вакцины образование припухлости.

2.1. Определение нммуногенной активности

Сущность метода заключается в определении специфической активности вакцины в сравне-
нии с референс-препаратом.

2.7.1. Аппаратура и реактивы

Шприцы вместимостью | см? по ГОСТ 22967.

Иглы инъекционные по ГОСТ 25377.

Флаконы стеклянные вместимостью 100 смз.

Пипетки стеклянные мерные вместимостью 5 и 10 смз.

Референс-препарат сухой.

Токсин ботулический типа С.

.2. Подготовка к испытанию

Для определения иммуногенной активности вакцины используют 10 флаконов с вакциной.
Объединенную пробу вакцины для испытания готовят по п. 2.6.2.

2.7.3. Проведение испытания

Иммуногенную активность вакцины определяют на белых мышах живой массой 18—20 гв па-
раллельном опыте в сравнении с референс-препаратом.

Референс-препарат представляет собой сухую вакцину против ботулизма норок, фасованную в
ампулы по 2 смз, с определенной иммуногенностью.

Вакцину и референс-препарат вводят однократно подкожно двум группам белых мышей по
40 голов в каждой группе. Одну группу белых мышей вакцинируют испытуемой вакциной, а вторую
группу референс-препаратом. Мышей обеих групп иммунизируют дозами 0,05; 0,1; 0,2 и 0,4 om. ис-
пользуя по 10 белых мышей на каждую дозу испытуемой вакцины и референс-препарата.

Через 21 сут после вакцинации животным обеих групп вводят подкожно ботулический токсин
типа С в дозе 10 ДЛМ. Одновременно токсин вводят 5 контрольным белым мышам такой же живой
массой в дозе по 1 ДЛМ, которым не вводилась испытуемая вакцина и референс-препарат. Резуль-
таты учитывают в течение 120 ч с момента введения токсина.

2.7.4. Обработка результатов

Подсчитывают по каждой дозе в группе животных, вакцинируемых испытуемой серией вакии-
ны, и группе животных, привитых референс-препаратом. отношение количества выживших живот-
ных к их числу, взятому для опыта.

Значения отношений суммируют по каждой группе отдельно.

По сумме отношений по табл. 2 находят дозу испытуемой серии вакцины и дозу референс-пре-
парата, предохраняющих от гибели 50 % вакционированных белых мышей, а также прививочную

дозу для норок.

* ГОСТ 25377—82 действует только на территорин Российской Федерации (здесь и лалес).