ГОСТ 26968-86

ГОСТ 26968-86


                                  М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й         С Т А Н Д А Р Т




                                                         САХАР

                                        МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА



                                                      Издание официальное




                                                                 Москва
                                                             Стандартинформ
                                                                  2012




вологодские кружева презентация

УДК 664.1:006.354                                                                            Группа Н49


М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й                                         С Т А Н Д А Р Т


                                    САХАР                                               ГОСТ
                    Методы микробиологического анализа                                26968-86
                                    Sugar.
                       Methods of microbiological analysts

МКС 67.180.10
ОКСТУ 9109


Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам or I августа 1986 г. Nt 2321 дата введения
установлена
                                                                                             с 01.07,87

Ограничение срока действия снято по протоколу № 2—92 Межгосударственного совета по стандартизации, метро­
логии н сертификации (МУС 2—93)

     Настоящий стандарт распространяется на сахар-песок, сахар-рафинад, рафинированный са­
хар-песок и жидкий сахар и устанавливает методы определения общего количества меюфильных аэ­
робных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, количества дрожжей и плесневых грибов.
     Методы основаны на высеве определенного количества раствора сахара в агаризованную пита­
тельную среду, выращивании посевов, подсчете всех выросших видимых колоний, а для дрожжей и
плесневых грибов — колоний, типичных по макро- или микроскопической морфологии и определе­
нии микроорганизмов в 1 г сахара.
     (Измененная редакция, Изм. .\е 1).

                                  I. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ

     1.1. Отбор проб сахара для микробиологического анализа проводят по ГОСТ 12569—99* и
ГОСТ 26668-85**.
     Пробы от продуктов отбирают асептическим способом, исключающим микробное загрязнение
продукта из окружающей среды.
     При отборе проб жидкого сахара из резервуара, оснащенного краном, кран сначала промыва­
ют. вытирают ватой, пропитанной этиловым спиртом, и обжигают в пламени. Затем выпускают до
500 см3 жидкого сахара (в зависимости от вместимости резервуара и диаметра крана) и только после
этого отбирают пробы в посуду, заполняя 3/4 ее объема.
     Широко гордую посуду закрывают ватными пробками, сверху пробки накладывают чистую бу­
магу и плотно прижимают ее к горлу посуды. Банки закрывают крышками, предварительно обрабо­
танными этиловым спиртом, маркируют этикетками с указанием номера резервуара и крана, даты
отбора проб и доставляют на анализ.
     1.2. Пробы отбирают стерильным пробоотборником в стерильную посуду (банки, полиэтиле­
новые пакеты).
     Посуду, инструменты и материалы, соприкасающиеся с продуктами во время отбора проб,
предварительно стерилизуют одним из следующих способов:
     насыщенным паром в стерилизаторе при температуре (1212.2) *С 30 мин;
     горячим воздухом в стерилизаторе: с принудительной циркуляцией воздуха при температуре
170—175 *С в течение 60 мин;
     без принудительной циркуляции воздуха при температуре 180—185 *С в течение 15 мин, при
температуре 165—170 *С в течение 120 мин.
      • Утратил силу на территории РФ. с 01.01.2013 пользоваться ГОСТ Р 54640—2011.
     ** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 54004 —2010,
Издание официальное                                                                Перепечатка воспрещена
           Издание (март 2012 г.) с Ихчепением Л? I, утвержденным в апреле 1995 г. (ИУС 7—95)
                                                                      © Издательство стандартов, 1986
                                                                       © СТЛНДАРТИНФОРМ, 2012
                                                      148

ГОСТ 26968-86 С. 2

     Допускается инструменты обрабатывать погружением в этиловый спирт с последующим
обжиганием.
     1.3. Отобранные пробы, предназначенные для анализа вне предприятия-изготовителя, плом­
бируют и опечатывают печатью организации, отвечающей за контролируемую продукцию, и транс­
портируют в лабораторию. Пробы снабжают актом отбора проб, в котором указывают наименования
продукта, предприятия-изготовителя, номер партии, дату отбора проб, цель микробиологического
анализа, подписи лиц. отбиравших пробу. Время перевозки до 12 ч с момента отбора проб.
     Отбор, транспортирование в лабораторию и вскрытие проб проводят в условиях, исключающих
вторичную микробиальную обсеменость сахара, в соответствии с методами, утвержденными в
установленном порядке.
      1.1 —1.3. (Измененная редакция, Изм. № 1).
      1.4. Анализ проводят сразу же после доставки сахара в лабораторию.
      1.5. Перед вскрытием полиэтиленового пакета с сахаром его перемешивают 10-кратным пере­
ворачиванием или круговым движением.
     Пробы сахара в полиэтиленовых пакетах вскрывают на столе, предварительно обработанном
раствором этилового спирта.
     Полиэтиленовые пакеты вскрывают стерильными ножницами, скальпелем или другим инстру­
ментом в месте, предварительно обработанном тампоном, смоченным раствором этилового спирта,
горлышко банки до и после вскрытия обжигают в пламени спиртовой горелки.
      1.6. После вскрытия пакета или банки с сахаром содержимое перемешивают, стерильными
ложкой или шпателем отбирают навеску и переносят ее в предварительно взвешенную стерильную
посуду.
     Навески сахара отбирают немедленно после вскрытия упаковки, в непосредственной близости
от огня.
      1.5. 1.6. (Измененная редакция, Изм. № 1).

                        2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ
   2.1. Для проведения анализа используют следующие аппаратуру, материалы и реактивы:
   микроскоп;
   термостат;
   шкаф сушильный с терморегулятором, обеспечивающим нагрев до 190 "С;
   баню водяную;
   весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104-2001*;
     рефрактометр;
    pH-метр;
    колбы 2 - 1 0 0 - 2 по ГОСТ 1770-74 и колбы К н -2 -2 5 0 -3 4 ТС и К н - 2 - 1000-42 ТС по
ГОСТ 25336-82;
    палочки стеклянные;
    пипетки вместимостью 1, 2 или 5 см3;
    пробирки 111- 1 6 - 1 5 0 ХС по ГОСТ 25336-82;
    стекла покровные по ГОСТ 6672—75;
    стекла предметные по ГОСТ 9284—75;
    термометры стеклянные ртутные от 0 до 50 'С и от 50 до 100 ‘С по ГОСТ 28498—90 и норматив­
ным документам;
    цилиндры 1(3)-100 по ГОСТ 1770-74;
    чашки ЦБН-2 (Петри) по ГОСТ 25336-82;
    бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026—76;
    вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556—81;
    марлю медицинскую по ГОСТ 9412—93;
    лупу складную карманную по ГОСТ 25706—83;
    ножи и скальпели медицинские по ГОСТ 21240—89;
    пинцеты по ГОСТ 21241-89;
    спиртовку по ГОСТ 25336—82 или газовую горелку;
    мясо-пептонный бульон (ММБ);

    ♦ На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228 —2008.

                                               149

С. 3 ГОСТ 26968-86

     агар микробиологический по ГОСТ 17206—% ;
      воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72;
     спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5%2—67*;
     спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300—87;
     сусло солодовое неохмеленное;
      кислоту лимонную по ГОСГ 908—79. раствор с массовой долей 20 %\ готовят следующим обра­
зом: 20 г лимонной кислоты переносят в мерную колбу, доводят объем водой до 100 см1, рапивают в
пробирки или колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) “С в течение 20 мин;
      пробоотборник или щуп из нержавеющей стали;
      чашка нейзильберовая вместимостью 150 см3.
     Допускается применение другой аппаратуры, лабораторной посуды с метрологическими и тех­
ническими характеристиками не ниже установленных в настоящем стандарте.
      (Измененная редакция, Изм. Ns 1).

                                 3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

      3.1. Подготовка посуды и материалов
      3.1.1. Посуду, предназначенную для микробиологического анализа, моют, а новую — допол­
нительно кипятят в подкисленной воде (раствор соляной кислоты массовой долей 1—2 %) в течение
15 мин. затем ополаскивают дистиллированной водой и стерилизуют.
      Посуду стерилизуют в сушильном шкафу при температуре 170 "С в течение 2 ч или в стерилиза­
торе при температуре (121 • 2) ‘С в течение 30 мин с последующим подсушиванием.
      Чашки Петри, пипетки стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах. В ко­
нец пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в
стерилизаторе, завернутыми в бумагу.
      Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах.
      3.1. 3.1.1. (Измененная редакция, Изм. № 1).
      3.2. Приготовление питательных сред
      3.2.1. Приготовление мясо-пептонного агара
      К 1000 см3 мясо-пептонного бульона прибавляют 20 г агара, нагревают на водяной бане до рас­
творения. фильтруют через вату, рапивают в колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) *С в
течение 15 мин.
      3.2.2. Приготовление солодового сусла-агара
      1000 см5 иеохмеленного солодового сусла, разбавленного питьевой водой до массовой доли су­
хих веществ 8—10 %, фильтруют через вату, прибавляют 20 г агара, нагревают на водяной бане до рас­
плавления агара, затем рапивают в стерильные колбочки и стерилизуют 15 мин при температуре
(1I5 il) *С.
      Среду охлаждают до (45—55) 'С и устанавтивают pH З.бд.0, I. добаатяя 2—3 см' раствора лимонной
кислоты с массовой долей 20 %. Готовую среду хранят в холодильнике при температуре (4±1) *С не
более 7 сут. Если по истечении 7 сут среда остается стерильной, то допускается хранение ее в течение
1 мес.
      3.3. Проведение серии десятикратных разведений
      В нейзильберовой чашке, предварительно обработанной этиловым спиртом и обожженной над
спиртовкой, взвешивают 10 г сахара, записывая результат взвешивания до второго десятичного знака.
      Навеску переносят в плоскодонную колбу с 90 см' стерильной волы, взбалтывают до полного
растворения и получают первое (исходное) разведение.
      Второе разведение готовят из одной части первого разведения и девяти частей стерильной волы
путем смешивания в стерильной колбе или пробирке.
      Разведения готовят до такой степени, чтобы можно было определить предполагаемое количес­
тво микроорганизмов в 1 г сахара.
      При приготовлении разведений растворы перемешивают стерильной пипеткой путем десяти­
кратного насасывания и выдувания из нее содержимого.
      Интервал между приготовлением навесок или их разбавлений и высевом в питательные среды
не должен превышать 30 мин.
      (Измененная редакция, Изм. Ns 1).

     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652—2000.

                                                150