ГОСТ 26573.1-93

ГОСТ 26573.1-93


                     М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й             С Т А Н Д А Р Т




                                          ПРЕМИКСЫ
                               Методы определения витамина А


                                             Издание официальное




                                        МЕЖГОСУДАРСТВЕ1ШЫЙ СОВЕТ
                               ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
                                                   Ми н с к




проектный институт

ГОСТ 2 6 5 7 3 .1 -9 3


                                          Предисловие

      1 РАЗРАБОТАН Госстандартом России

     ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного Совета по стандартизации, мет­
рологии и сертификации

     2 ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации
21 октября 1993 г.

      За принятие проголосовали:

               Млнмемонлнис госуларстна                 Наим снопамне национального органа
                                                                 на стандартизации

 Киргизская Республика                        Киргизстандарт
 Республика Молдова                           Молдовастаидарт
 Российская Федерации                         Госстандарт России
 Республика Таджикистан                       Таджиктоссгандарт
 Туркменистан                                 Главная государственная инспекция Туркменистана
 Украина                                      Госстандарт Украины

     3 Постановлением Комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сер­
тификации от 2 июня 1994 г. № 160 межгосударственный стандарт ГОСТ 26573.1—93 введен в
действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 января
1995 г.

      4 ВЗАМЕН ГОСТ 26573.1-85

      5 ПЕРЕИЗДАНИЕ




     Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и
распространен на территории Российской Федерации в качестве официального издания без
разрешения Госстандарта России

Группа С19


М   Е   Ж    Г   О   С     У   Д   А   Р   С   Т   В   Е     Н   Н   Ы   Й   С Т А Н Д А Р Т


                                   П РЕМ И КСЫ

                      Методы определения витамина А                                   ГОСТ
                         Premixes. Methods lor determination                        26573.1-93
                                    of vitamin A


ОКСТУ 9209

                                                                              Дата введения 1 9 9 5 -0 1 -0 1


    Настоящий стандарт устанавливает методы определения витамина Л в премиксах, предназна­
ченных для обогащения комбикормов, белково-витаминных добавок и кормовых смесей.

     1. Отбор проб
     Отбор проб - по ГОСТ 13496.0.

     2. Определение витамина А методом обрашенно-фазной высокоэффективной
     жидкостной хроматографии
     Сущность метода заключается в экстракции витамина А (ретинола ацетат) из премикса
экстрагентом и хроматографическом анализе содержания витамина в испытуемом растворе с
использованием жидкостного хроматографа.
     Метод применим в диапазоне концентраций витамина А 20—10000 международных единиц
(ME) на 1 г премикса. Предельная погрешность метода — 10 %.
     2.1. Ап п а р а т у р а и р е а к т и в ы
     Хроматограф жидкостный микроколоночный «Милихром» по ТУ 25—05.2830 или его после­
дующие модификации со спекгрофотометрическим детектором и спектральным диапазоном 190—
360 нм.
     Колонка хроматографическая одного из указанных размеров: 2 х 64. 2 х 80. 2 х 120 мм с числом
теоретических тарелок не менее 4000 (по прилагаемому к колонке паспорту), заполненная одним
из следующих сорбентов: Силасорб Q g. Силасорб SPHC|S. Сепарон C |S.
     Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104.
     Баня водяная, обеспечивающая постоянство температуры (75±1) "С.
     Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы 186—1100 нм.
     Колбы конические со шлифом вместимостью 25 см3, КН-2—25—18 МХС по ГОСТ 25336.
     Пипетка 4—1(2)—1 (исполнения 4. 1-го или 2-го класса, вместимостью I см3).
     Пипетка 6—1(2)—К) или 7—1(2)—10.
     Пипетка 2(3)—1(2)—50.
     Колбы мерные 2—25—1(2) (исполнения 2, вместимостью 25 см3. 1-го или 2-го класса точности)
по ГОСТ 1770.
     Колбы мерные 2 -5 0 -1 (2 ) по ГОСТ 1770.
     Цилиндры 1(2, 3. 4 )-1 0 0 . 1(2, 3, 4 )-5 0 0 по ГОСТ 1770.
     Воронка ВФО-40-ПОР 16 ХС по ГОСТ 25336.



Издание официальное
                                                        39

С . 2 ГО С Т 2 6 5 7 3 .1 -9 3                                                       Электронная версия

    Холодильник ХПТ-1—100—18 ХС по ГОСТ 25336.
    Насос водоструйный по ГОСТ 25336.
    Бюретка 6—2—2 (исполнения 6. 2-го класса точности, вместимостью 2 см3).
    Склянки с притертой пробкой.
    Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.
    Спирт этиловый абсолютированный по ТУ 84—11—99.
    Спирт изопропиловый (пропанол-2), х. ч., по ТУ 6—09—402.
    Спирт пропиловый (пропанол-1), х. ч., по МРТУ 6—09—6628.
    Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч., по ТУ 6—09—06—1092.
    Ретинола ацетат в масле. 3.44 %-ный раствор с активностью 90000—110000 МЕ/см3 по
фармакопее.
    Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
     П р и м е ч а н и е . При проведении испытаний допускается ис полью ват ь импортные аппаратуру, мате­
риалы и реактивы с характеристиками не ниже отечественных аналогов.
     2.2. П о д г о т о в к а к и с п ы т а н и ю
     2.2.1. Приготовление элюента для х/юматографии
     Трехкомпопентный эдюент готовят смешиванием пропилового спирта, дистиллированной
воды и ацетонитрила в соотношении 50:8:42 (% об.). Для этого в склянку вместимостью 1000 см3
вносят цилиндром 500 см3 пропилового спирта. 420 см3 ацетонитрила и 80 см3 дистиллированной
воды.
      Приготовленную смесь растворителей фильтруют через стеклянный фильтр для удаления
возможных механических примесей и пузырьков воздуха и помешают в стеклянный сосуд с
притертой пробкой. Полученный раствор можно хранить в течение 1 мес.
     2.2.2. Подготовке хроматографической колонки
      При работе на неиспользованной ранее колонке или колонке, которая не была подключена к
прибору «Милихром*. из нее следует удалить воздух и тщательно промыть элюептом до получения
стабильной нулевой линии. Для этого через колонку пропускают элюент в количестве 20—30
свободных объемов колонки, т. е. два полных шприца насоса хроматографа при расходе элюента
сначала 50 мкдм3/мии, а затем 100 мкдм3/мин. Промывку колонки заканчивают при получении
стабильной нулевой линии.
      После промывки колонки проводят ее насыщение витамином А. Для этого выполняют 7—10
анализов наиболее концентрированного градуировочного раствора витамина А. Насыщение колон­
ки прекращают, когда отношение разности между двумя последовательными определениями
концентрации витамина А к среднему арифметическому значению этих операций не превышает
3 % отн.
      При правильной эксплуатации колонка выдерживает до 500—600 анализов.
     2.2.3. Приготовление растворителя для экстракции витамина А из премикса
     Для экстракции витамина А из премиксов используют двухкомпонентный экстрагент состава:
изопропиловый спирт и дистиллированная вода в соотношении 97:3 (% об.). Для этого в мерную
колбу вместимостью 1000 см3 вносят пипеткой 30 см3 дистиллированной волы и доводят до метки
изопропиловым спиртом. Хранят в стеклянной емкости с притертой пробкой.
     2.2.4. Приготовление абсолютного этилового спирта
      К этиловому ректификованному спирту прибавляют в соотношении 4:1 свежепрокаленную
при температуре 800—1000 *С в течение 2 ч окись кальция. Смесь кипятят с обратным холодиль­
ником в течение 2—3 ч. Затем смесь перегоняют, отбрасывая начальную и конечную порции отгона
(по 20—30 см3). Перегнанный абсолютный спирт при измерении на спектрофотометре относитель­
но дистиллированной волы в кювете с толщиной слоя 1 см должен иметь значение оптической
плолгости. не превышающее 0.01 единиц в области 320—350 нм и 0.05 при 280—300 нм.
      Если спирт не отвечает вышеуказанным требованиям, процесс обезвоживания повторяют.
     Этиловый абсолютный спирт промышленного изготоатения перегоняют над твердой гидроо­
кисью натрия или калия (К) г шелочи на 1 дм3 спирта) и проверяют, как указано выше.
     2.2.5. Определение активности витамина Л в масляном препарате
     0,1 г масляного препарата витамина А растворяют в абсолютном этиловом спирте в мерной
колбе вместимостью 50 см3, перемешивают. Отбирают 1 см3 раствора в колбу вместимостью 50 см3,
                                                    40