ГОСТ 25011-81

ГОСТ 25011-81


                        М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й          С Т А Н Д А Р Т




                               МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

                                    МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКА



                                            Издание официальное




                                                      Москва
                                                 С тан дар т нформ
                                                       2010




испытания конструкций

УДК 637.52:006.354                                                                            Группа 1119


М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й                                          С Т А Н Д А Р Т


                     МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ
                                                                                        ГО СТ
                         Методы определения белка
                                                                                     25011-81
            Meat and meat products. Methods o f protein determination


МКС 67.120.10
ОКСТУ 9209

Постановлением Государственного комитета СССР но станларгам от 27 ноября 1981 г. № 5145 дата введения
установлена
                                                                                             01.01.83

Ограничение срока действия снято но протокол) № 3—93 Межгосударственного совета но стандартизации,
метрологии и сертификации (ИУС 5-6—93)


     Настоящий стандарт распространяется на мясо и мясные продукты, а также консервы на
мясной основе для детского питания и устанавливает фотометрический метод определения белка и
метол определения содержания белков по Кьельдалю.
     Настоящий стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 2787—80.
     (Измененная редакция, Изм. № 1).

                                  1. ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД
      1.1. Сущность метода
      Метод основан на минерализации пробы по Кьельдалю и фотометрическом измерении интен­
сивности окраски индофенолового синего, которая пропорциональна количеству аммиака в мине­
рал изате.
      1.2. Методы отбора и подготовки проб
      1.2.1. Отбор проб мяса — по ГОСТ 7269—79. отбор проб мясных продуктов — по ГОСТ 9792—73*.
Отобранные пробы мяса и мясных продуктов дважды измельчают на бытовой или электрической
мясорубке с отверстиями решетки диаметром 3 мм и тщательно перемешивают.
      Отбор и подготовка проб консервов на мясной основе для детского питания — по
ГОСТ 8756.0-70.
      (Измененная редакция, Изм. № 1).
      1.2.2. Подготовленную для анализа пробу помещают в стеклянную банку вместимостью
200-400 см3, заполнив се полностью, и закрывают крышкой.
      Пробу хранят при температуре от 3 до 5 "С до окончания анализа.
      1.3. Аппаратура, реактивы и материалы
      Весы лабораторные общего назначения 1-го класса точности с наибольшим пределом взвеши­
вания 200 г по ГОСТ 24104-88**.
      Спектрофотометр марок СФ-4, СФ-26 или фотоэлектроколориметр марки 56 ИМ или других
аналогичных марок.
      Мясорубка бытовая с отверстиями решетки диаметром не более 4 мм по ГОСТ 4025—95 или
электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469—95.
     * На территории Российской Федерации дополнительно действует ГОСТ Р 51447—99.
    ** С I июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001 (здесь и далее).

Издание официальное                                                              Перепечатка воскрешена

          Издание (январь 20Ю г.) с Изменением А?> /. утвержденным в декабре 1987г. (ИУС 4—88).
                                                                        © Издательство стандартов, 1981
                                                                         © СТАНДАРТИНФОРМ. 2010
                                                      60

ГОСТ 25011-81 С. 2

     Промывалка стеклянная лабораторная.
      Штатив химический.
     Пробирки П 4 -1 5 -1 4 /2 3 ХС или 11 4 -2 0 -1 4 /2 3 ХС по ГОСТ 25336-82.
     Колбы Кьельдаля 1 -5 0 -1 4 /2 3 ТС или 1-100-14/23 ТС, 2 - 5 0 - 1 4 ТХС или 2 -1 0 0 -1 4 ТХС
по ГОСТ 25336-82.
     Колбы К н-1 -1 0 0 -1 4 /2 3 ТС по ГОСТ 25336-82.
     Пипетки 4—1—1 или 4—2—1, 4—1—5 или 4—2—5.
      Колбы мерные 2 -1 0 0 - 2 , 2 - 2 5 0 - 2 по ГОСТ 1770-74.
      Воронки В-56-80 ХС или В-75-110 ХС по ГОСТ 25336-82.
     Стаканы В -1-600 ТС по ГОСТ 25336-82.
     Стаканчики для взвешивания С В -14/8 по ГОСТ 25336—82.
     Бумага универсальная индикаторная.
     Фильтры обеззоленные.
     Кислота серная по ГОСТ 4204—77, х. ч., плотностью 1,84 г/см'.
     Кислота соляная по ГОСТ 3118—77, х. ч., раствор с (Н О ) = I моль/дм3.
      Водорода перекись по ГОСТ 10929—76.
     Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.
     Аммоний сернокислый по ГОСТ 3769—78. х. ч.
     Известь хлорная по ГОСТ 1692—85.
     Натрия гидроокись по ГОСТ 4328—77. ч. д. а.
     Фенол по ТУ 6 -0 9 -5 3 0 3 -8 6 , ч.
      Натрий нитропруссидиый, ч.
      Натрий сериоватистокислый (тиосульфат натрия) по ГОСТ 244—76, раствор с (Na2S20v5H 20 )=
= 0.1 моль/дм3.
     Натрия гипохлорит.
     Калий йодистый по ГОСТ 4232—74, ч. д. а.
     Натрий углекислый безводный по ГОСТ 83—79, ч. д. а.
     (Измененная редакция, Изм. К? 1).
      1.4. Подготовка к испытанию
      1.4.1. Приготовление реактива 1
      10 г фенола и 0,05 г ннтропруссида натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3
дистиллированной водой, обьем колбы доводят до метки.
      1.4.2. Приготовление реактива 2
     5 г гидроокиси натрия растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью
1000 см3, после охлаждения добавляют количество исходного раствора гипохлорита натрия из
расчета его содержания 0,42 г/дм3 или 0.2 г днхлоризоцианурата натрия и доводят обьем колбы
дистиллированной водой до метки.
      1.4.3. Приготовленные реактивы хранят в темной посуде в холодильнике не более 2 мес.
      1.4.4. Приготовление исходного гипохлорита натрия
      В стакане вместимостью 500 см3 перемешивают 150 г хлорной извести с 250 см3 дистиллиро­
ванной воды; в другом стакане в 250 см3 дистиллированной воды растворяют 105 г углекислого
натрия, затем сливают оба раствора при постоянном перемешивании. Масса сначала густеет, затем
разжижается. Полученную суспензию оставляют на 1—2 суг. для отстаивания, затем надосадочную
жидкость сливают и отфильтровывают.
     Полученный реактив имеет концентрацию активного хлора около 60—100 г/дм3 и может
храниться в склянке из темного стекла до 1 года. В полученном реактиве определяют концентрацию
активного хлора. Для этого I см3 прозрачного фильтрата разбавляют в конической колбе вмести­
мостью 100 см3 дистиллированной водой до 40—50 см3, прибавляют 2 г калия йодистого и К) см3
соляной кислоты 1 моль/дм3 (1 и.). Образовавшийся йод оттитровывают 0,1 моль/дм3 (0,1 и.) рас­
твором серноватнстокислого натрия, приготовленного из фиксанала, до исчезновения вишневой
окраски (1 см3 0.1 моль/дм3 (0,1 и.) раствора серноватнстокислого натрия соответствует 0,00355 г
хлора).
     (Измененная редакция, Изм. № 1).
      1.4.5. Определение количества гипохлорита натрия в исходном растворе
     Перед приготовлением реактива 2 необходимо определить содержание гипохлорита натрия в
исходном растворе, учитывая неустойчивость его при хранении.
                                                61

С. 3 ГОСТ 25011-81

      По количеству израсходованного на титрование тиосульфата натрия определяют количество
раствора гипохлорита натрия, необходимого для приготовления реактива 2.
      П р и м е р расчета:
      Количество раствора тиосульфата натрия концентрации 0,1 моль/дм3 (0,1 и.), израсходованно­
го на титрование 1 см* исходного раствора гипохлорита натрия, составляет, например. 12.09 см».
      Эквивалентная масса гипохлорита натрия равна половине молекулярной массы гипохлорита
натрия и состаатяет 74.4:2 = 37,2 г. Следовательно, количество гипохлорита натрия в исходном
растворе гипохлорита натрия состаатяет 1,209 х 37,2 = 44.97 г.
      Учитывая, что реактив 2 должен содержать 0,42 г гипохлорита натрия, из пропорции опреде­
ляем:
      в 1000 см3 исходного раствора — 44.97 г
               X                    - 0,42 г

                                       X = '1000 0.42
                                              44Л17 '
                                                      * 9,4 см3 .

      Следовательно, для приготовления 1 дм3 реактива 2 требуется 9,4 см3 исходного раствора
гипохлорита натрия.
      1.4.6. Приготоатение стандартного раствора сернокислого аммония для построения градуиро­
вочной кривой
     0.236 г сернокислого аммония, предварительно высушенного до постоянной массы при тем­
пературе 60 *С, вносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, растворяют в дистиллированной воде
и доводят объем до метки.
      Этот раствор яатяется стандартным и содержит 0,1 мг азота в 1 см3.
      1.4.7. Проведение цветной реакции
      В мерные колбы вместимостью по 100 см ’ вносят следующие количества стандартного раствора
в см3: 1.0; 1.5; 2,0; 2,5; 3,0: 3,5: 4.0; 4.5; 5.0. После доведения объемов колб дистиллированной водой
до метки получают серию рабочих растворов концентрации; 1,0; 1,5: 2,0; 2,5; 3.0; 3,5; 4,0; 4.5; 5,0 мкг
азота в 1 см3.
     Для проведения цветной реакции в пробирки берут по 1 см3 рабочего раствора, добаазяют 5 см3
реактива 1 и 5 см3 реактива 2. перемешивают и через 30 мин измеряют величину оптической
плотности на спектрофотометре при длине волны 625 нм или на фотоэдектроколориметре с красным
светофильтром в кювете с толщиной поглощающего свет слоя I см в отношении контрольного
опыта.
      Повторность проведения цветной реакции трехкратная. Для каждого определения готовят
новый стандартный раствор.
      1.4.8. Построение градуировочного графика
      По полученным средним из трех стандартных раствороп строят на миллиметровой бумаге
размером 20 х 20 см градуировочный график.
      На оси абсцисс откладывают величину концентрации азота (мкг/см3), на оси ординат —
соответствующую ей оптическую плотность. Градуировочный график должен проходить через начало
координат.
      1.5. Проведение испытания
      Навеску продукта рассчитывают по разности, для этого часть измельченной объединенной
пробы помешают в бюксу, закрывают крышкой и взвешивают с допустимой погрешностью не более
0,0002 г. Затем из бюксы скальпелем отбирают 0,4—0,5 г продукта на листок беззольного фильтра и
вместе с ним осторожно опускают в колбу Кьельдаля. Бюксу закрывают, взвешивают и рассчитывают
точную массу продукта, взятого для анализа.
     Такой же листок беззольного фильтра помешают в контрольную колбу Кьельдаля. Затем в обе
колбы добавляют 10 см3 концентрированной серной кислоты. 1—2 г сернокислого калия и проводят
минерализацию, периодически добавляя для интенсивности процесса в охлажденную пробу пере­
кись водорода (5—7 см3 в течение всей минерализации). Допускается применение других катализа­
торов. обеспечивающих точность определения.
      После минерализации колбы охлаждают и содержимое количественно переносят в мерные
колбы вместимостью 250 см3, после охлаждения объем доводят до метки и содержимое перемеши­
вают.
      5 см3 полученного минерализата переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят
до метки дистиллированной водой, получая вторично разбавленный минерализат. Для проведения
                                                  62