ГОСТ 23481-79

ГОСТ 23481-79

                          М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й        С Т А Н Д А Р Т




                                           МЯСО птицы
                                   МЕТОД ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА



                                              Издание официальное




                                                        М осква
                                                    Стамдартинформ
                                                          2009




строительство в области

УДК 637.54:543.06:006.354                                                                 Группа 1119

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й                                      С   Т А Н Д        А Р     Т


                                 МЯСО ПТИЦЫ
                                                                               ГОСТ
                      Метод гистологического анализа
                                                                             23481-79
                                   Poultry meat.
                            Method o f hystological analysis

М КС 67.120.10
О КС ТУ 9210

                                                                               Дата введения 01.07.80


      Настоящий стандарт распространяется на мясо птицы (тушки кур, цыплят, цыплят-бройле-
рон. цесарят, цесарок, перепелов, уток, утят, гусей, гусят, индеек, индюшат) и устанавливает метод
гистологического анализа при определении степени свежести мяса при сомнении в оценке его
качества.
     (Измененная редакция, Изм. № 2).

                                               1. ОТБОР ПРОБ

     1.1. (Исключен, Изм. № 1).
     1.2. Отбирают три образца (тушки). Мороженные тушки размораживают. Из образцов выре­
зают пробы мышечной ткани площадью не менее I см2 на всю глубину мышиы, почки и легкие.
Места взятия проб предварительно обрабатывают этиловым спиртом с массовой долей % % по
ГОСТ 5962*.
     (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
     1.3. Пробу вырезают из мест, наиболее быстро подвергающихся порче:
     из внутренних брюшных мышц;
     из мышц в области шейного зареза;
     из почек и легких при наличии их в тушках;
     из любых других участков тушки, сомнительных по свежести.
     1.4. К каждой пробе со стороны противоположной наружной ее поверхности прикрепляют с
помощью иголки и нитки этикетку из плотной белой бумаги, заполненную графитным каранда­
шом. с указанием номера пробы и даты ее взятия.
     1.5. При отправке проб в лабораторию, расположенную вне предприятия, все пробы с этикет­
ками помещают в стеклянную банку и заливают водным раствором формалина с массовой долей
К) %, который готовят добавлением к одной части раствора формалина с массовой долей 40 % по
ГОСТ 1625 четырех частей питьевой воды по ГОСТ 2874*4. Банку с пробами плотно укупоривают
и сопровождают документом, в котором указывают:
     наименование предприятия, выработавшего мясо птицы:
     номер пробы, вид птипы, номер образца, наименование мышцы или место взятия пробы,
органолептическую характеристику партии мяса птицы по ГОСТ 7702.0*44';
     наименование предприятия, на котором отобраны образцы;
     причины и цели анализа;

     * На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652 —2000 (здесь и далее).
       На территории Российской Ф едерации действует ГОСТ Р 51232—98.
   *** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51944 —2002.

Издание официальное                                                           Перепечатка воспрещена
       ★
                                                                  © Издательство стандартов. 1979
                                                                   © СТАНДАРТИНФОРМ, 2009

ГОСТ 23481-79 С. 2

      подписи и должности лиц. отобравших пробы;
      дату и час взятия пробы.
      (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).

                             2.   АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

     2.1.      Микротом замораживающий типа X с металлическим шлангом, набором ножей и при­
надлежностями для точки микротомпых ножей (два камня и ремень) и двуокисью углерода газооб­
разной по ГОСТ 8050 или замораживающим устройством с селеновым выпрямителем ТОС-И.
     Микроскоп ТУ 3—3, ЭД1—404—87 или другого аналогичного типа:
     Осветитель ОИ-19.
     Весы лабораторные второго класса по ГОСТ 24104*.
     Ножницы медицинские по ГОСТ 21239.
     Иглы препаровальные гистологические.
     Скальпель медицинский по ГОСТ 21240.
     Пинцет медицинский по ГОСТ 21241.
     Иглы препаровальные или зонды зубоврачебные.
     Бапьзам пихтовый по ГОСТ 2290.
     Метиленовый синий.
     Эозин спирторастворимый.
     Бура по ГОСТ 8429.
     Кислота уксусная ледяная, х.ч., по ГОСТ 61.
     Ксилол по ГОСТ 9949.
     Ацетон по ГОСТ 2603.
     Глицерин дистиллированный по ГОСТ 6824.
     Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
     Белок свежего яйца.
     Тимол.
     Масло вазелиновое медицинское по ГОСТ 3164.
     Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.
     Тушь черная.
     Кальций углекислый по ГОСТ 4530.
     Формалин технический по ГОСТ 1625.
     Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
     Стекла покровные дтя микропрепаратов по ГОСТ 6672.
     Стекла предметные дтя микропрепаратов по ГОСТ 9284.
     Цилиндр 1-100 по ГОСТ 1770.
     Колба К н-1-100 29/32 ТС по ГОСТ 25336.
     Чашка Ч К Ц -1-100 по ГОСТ 25336.
     Стаканчик CB-34/I2 или СН-85/15 по ГОСТ 25336.
     Чашка ЧБН-2 по ГОСТ 25336.
     Банки для медикаментов широкогорлые с притертыми пробками.
     Воронка ВФ -3-100 ХС по ГОСТ 25336.
     Спиртовка СЛ-1 по ГОСТ 25336.
     Пипетка 4(5)—1—5 по НГД.
     Допускается применение аналогичных средств измерения с метрологическими характеристи­
ками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а реактивов по качеству не ниже
указанных в настоящем стандарте.
     (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).

                                       3.   ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

    3.1. П о д г о т о в к а п о с у д ы
    Вся посуда для гистологического андтиза должна быть тщательно вымыта и высушена. Пред­
метные и покровные стекла подвергают обезжириванию в спирте.
    3.2. П р и г о т о в л е н и е с п и р т о в о г о р а с т в о р а м е т и л е н о в о й с и н и с м а с с о в о й
долей 1%
     1 г метиленовой сини растворяют в 100 см3 этилового спирта с массовой долей 70 %.

      • С I июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001.

С. 3 ГОСТ 23481-79

      3.3. П р и г о т о в л е н и е с п и р т о в о г о р а с т в о р а э о з и н а с м а с с о в о й д о л е й I %
      1 г спирторастворимого эозина растворяют в 100 см3 этилового спирта с массовой долей 70 %.
      3.2, 3.3. (Измененная редакция, Изм. № 2).
      3.4. П р и г о т о в л е н и е в о д н о г о р а с т в о р а м е т и л е н о в о й с и н и с б у р о й
      2 г буры и I г метиленовой сини растворяют в 100 мл подогретой дистиллированной воды. Рас­
твору дают один раз вскипеть и оставляют на длительное время (месяц и больше) для созревания.
      3.5. П р и г о т о в л е н и е с м е с и д л я о к р а ш и в а н и я с р е з о в
      Смесь составляют из трех растворов: первого — спиртового раствора метиленовой сини с мас­
совой долей 1 %: второго — спиртового раствора эозина с массовой долей 1 %: третьего — водного
раствора метиленовой сини с бурой.
      Сливают равные объемы первого и второго растворов (по 10—15 капель каждого), 5—10 капель
третьего раствора и дистиллированную воду в двукратном отношении к общему объему трех
растворов.
      Смесь готовят непосредственно перед употреблением.
      (Измененная редакция, Изм. № 2).
      3.6. П о д г о т о в к а п р о б ы к а н а л и з у
      3.6.1. Из пробы вырезают кусочки 0.5 см2 на всю глубину ее, прикрепляют к ним этикетку в
соответствии с п. 1.4. помешают их в колбу с раствором формалина с массовой долей 10 %, взятым в
десятикратном объеме, и подогревают в вытяжном шкафу до появления пузырьков воздуха. Содер­
жимое слегка встряхивают и вновь подогревают до появления пузырьков. Эту операцию повторяют
3 раза.
      (Измененная редакция, Изм. № 2).
      3.6.2. Формалин сливают, в колбу вставляют стеклянную воронку и промывают пробы холод­
ной проточной водой в течение 5—7 мин.
      3.6.3. Промытые пробы помешают на столик замораживающего микротома и ориентируют
его так, чтобы в срез попадали все слои пробы по глубине, а мышечные волокна по своей длине рас­
полагались параллельно лезвию ножа. Срезы готовят толщиной 15—30 мкм. Почки и легкие
ориентируют только по глубине.
      3.6.4. Срезы осторожно снимают кисточкой с лезвия ножа и помешают в чашку Петри с дистил­
лированной водой на несколько секунд для распрямления. Под неповрежденные среды подводят пред­
метное стекло, предварительно покрытое смесью белка яйна с глицерином (2:1). поочередно извлекают
срезы из воды с помощью препаровальной иглы и расправляют их на предметном стекле. Выравненные
срезы аккуратно накрывают сложенной в три слоя фильтровальной бумагой и. нажимая пальцами,
приклеивают их к предметному стеклу.
      Предметные стекла со срезами помешают в чашку Петри.
      3.6.5. Наклеенные срезы окрашивают смесью метиленовой сини с эозином. Красящую смесь
набирают в пипетку и наносят ровным слоем на срезы, находящиеся на предметном стекле. Через
20—30 мин срезы промывают дистиллированной водой из пипетки.
      Для дифференцирования срезы обрабатывают водой, подкисленной уксусной кислотой
(1—2 капли кислоты на 100 см3 воды) в течение 1 мин, после чего их промывают дистиллированной
водой в течение 5—10 мин.
      3.6.6. После окрашивания последовательно наносят пипеткой на срезы обезвоживающие рас­
творы, составленные из смеси ацетона с ксилолом и ксилола по табл. 1.
                                                                                                      Таблица      I

                                                                                            П родолхн тел ытость
       Номер раствора          Количество частей ацетона   Количество частей ксилола
                                                                                                 обработки

              1                           95                            5                        4 0 -6 0 с
              2                           70                           30                        5—6 мин
              3                           30                           70                       5— 10 м ин
              4                           —                           100                         5 м ин

     Остатки растворов со срезов на предметных стеклах удаляют фильтровальной бумагой.
     3.6.7.     Окрашенные и обезвоженные срезы заключают нанесением капли пихтового бальзама
и покрывают покровным стеклом с помощью прямой препаровальной иглы или анатомического
пинцета так, чтобы избежать образования пузырьков воздуха между предметным и покровным
стеклами.
     На готовый препарат наклеивают этикетку с указанием номера пробы.