ГОСТ 23231-90

ГОСТ 23231-90


                 М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й        С Т А Н Д А Р Т




                            КОЛБАСЫ И ПРОДУКТЫ
                              МЯСНЫЕ ВАРЕНЫЕ

                    МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНОЙ АКТИВНОСТИ
                               КИСЛОЙ ФОСФАТАЗЫ



                                     Издание официальное




                                               mctm
                                           Стдидчупч форм
                                                2009




черное кружево

УДК 637.523.001.4:006.354                                                                               Группа 1119

М   Е       Ж    Г    О   С   У   Д   А   Р   С   Т   В   Е   Н   Н   Ы   Й              С Т А Н Д А Р Т

                     КОЛБАСЫ И ПРОДУКТЫ МЯСНЫЕ ВАРЕНЫЕ

            Метод определения остаточной активности кислой фосфатазы                                 ГОСТ
                             Sausages and cooked meat products.                                    23231-90
                Method for determination of residual activity of acid phosphatase


MKC67.I20.10
ОКСТУ 9209
                                                                                              Дата введения 01.07.91

      Настоящий стандарт распространяется на вареные колбасы, сосиски, сардельки и пареные про­
дукты нзсвинины и устанавливает метод определения остаточной активности кислой фосфатазы.
      Метод основан на фотометрическом определении в продукте интенсивности развивающейся
окраски, зависящей от остаточной активности кислой фосфатазы, выраженной массовой долей фе­
нола.
      Метод применяют в случае сомнения в проваренности продукта.

                                          1. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ

     1.1. Отбор проб - по ГОСТ 9792.
     1.2. Точечные пробы продуктов из свинины должны быть освобождены от жировой ткани и
шкурки, а точечные пробы вареных колбас, сосисок и сарделек — от оболочки и шпика.
     1.3. Для составления объединенной пробы точечные пробы соединяют, дважды измельчают на
бытовой или электрической мясорубке и тщательно перемешивают.
     Объединенну ю пробу помещают в стеклянную или пластмассовую банку вместимостью
200—400 см5, заполнив ее полностью, и закрывают крышкой.
     1.4. Объединенную пробу, подготовленную для испытания, хранят при температуре (4 ± 2) ’Сдо
окончания испытаний.

                                  2. АППАРАТУ РА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

     Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469 с отверстиями
решетки диаметром от 3 до 4 мм.
     Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104* 2-го класса точности, с наибольшим
пределом взвешивания 200 г.
     Потенциометр с погрешностью измерения ± 0.06 pH.
     Калориметр фотоэлектрический лабораторный с устройством для отсчитывания значения опти­
ческой плотности и светофильтром с >,^=(600 ± 10) нм или спектрофотометр дтя измерения в
видимой области спектра.
     Ультратермостат или водяная баня, обеспечивающие регулирование температуры от 30 до 99 'С.
     Воронки В-36-80 ХС\ В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.
     Колбы мерные 2—500—2, 2—1000—2 по ГОСТ 1770. вымеренные на наливной объем.
     Пипетки 4 - 2 - 1 , 4 - 2 - 2 , 7 - 2 - 5 , 7 - 2 - 1 0 по ГОСТ 29169.
     Холодильник ХШ -1-40 0 -2 9 /3 2 ХС по ГОСТ 25336.
     Колба К -1-2000-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

     * С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104—2001.
Издание официальное                                                                          Перепечатка воспрещена
        *
                                                                                    © Издательство стандартов, 1990
                                                                                     © СГЛНДАРТИНФОРМ. 2009

ГОСТ 23231-90 С. 2

     Пробирки ПI —16—150 ХС, П 1 -2 1 -2 0 0 ХС, 111-25-200 ХС по ГОСТ 25336.
     Папочки стеклянные.
     Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
     Груша резиновая.
     Кислота лимонная по ГОСТ 3652. х. ч.
     Натрий лимоннокислый 5-водный по ГОСТ 22280, ч. д. а.
     Феннлфосфорной кислоты динатриевая еш ь по ТУ 6—09—3752, свежеприготовленный раствор
2 г/дм’.
     Кислота трихлоруксусная кристаллическая по ТУ 6—09—1926. растворы 50 и 200 г/дм1.
     Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. х. ч., гранулированная, раствор с (NaOH) = 0,5 моль/дм'.
     Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
     Фенол по ТУ 6—09—5303, ч. д. а.
     Толуол по ГОСТ 5789. ч. д. а.
     Натрий вольфрамовокислый 2-водный по ГОСТ 18289. х. ч.
     Натрий молибденовокислый по ГОСТ 10931, ч.д.а.
     Литий сернокислый I-водный по ТУ 6—09—5299, х. ч.
     Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, х. ч., плотностью 1.72 г/см'.
     Кислота соляная по ГОСТ 3118, х. ч., плотностью 1,19 г/см'.
     Бром по ГОСТ 4109, х. ч.
     Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и
оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов с качественными показателями
не ниже указанных в настоящем стандарте.

                               3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

      3.1. П р и г о т о в л е н и е н и т р а т н о г о б у ф е р а
       В мерной колбе вместимостью 1000 см' в дистиллированной воде растворяют 13,88 г лимоннокис­
лого натрия и 0.588 г лимонной кислоты, доливают водой до метки и перемешивают. pH буфера 6.5.
Затем добавляют 1 см’ толуола. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4 ± 1) "С не более
12 суг.
      3.2. П р и г о т о в л е н и е р е а к т и в а Ф о л и н а
       100 г вольфрамовокислого натрия и 25 г молибденовокислого натрия растворяют в 700 см1
дистиллированной воды. К раствору добавляют 50 см1 ортофосфорной кислоты и 100 см1соляной
кислоты. Смесь осторожно кипятят в течение К) ч в колбе вместимостью 2000 см4с обратным холо­
дильником. после чего охлаждают и добавляют 150 г сернокислого лития, 50 см1 воды и несколько
капель брома. Остаток брома отгоняют кипячением смеси без холодильника в вытяжном шкафу,
охлаждают, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см1, доводят объем дистиллированной
водой до метки, перемешивают и фильтруют. Реактив должен быть золотисто-желтого ивета без зеле­
ного оттенка. Реактив хранят в склянке с притертой пробкой в темном месте не более 6 мес.
      3.3. П р и г о т о в л е н и е с т а н д а р т н о г о р а с т в о р а
      2 г фенола (результат взвешивания записывают до третьего десятичного знака) растворяют в
воде в мерной колбе вместимостью 1000 с м \ доводят объем до метки и перемешивают. Отбирают
пипеткой с помошыо резиновой груши 5 см' раствора в колбу вместимостью 500 см1, добавляют около
3(H) см1дистиллированной воды, вносят 25 г кристаллической три.хлоруксусной кислоты. После раство­
рения содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Полученный
раствор содержит 20 мкг фенола в 1 см'.
      3.4. П о с т р о е н и е г р а д у и р о в о ч н о г о г р а ф и к а
       В пробирки вносят следующие объемы стандартного раствора: 0: 0,25: 0,5: 1.0: 1,5; 2,0 см', что
соответствует массе фенола: 0; 5; 10; 20: 30; 40 мкг. Доводят объем в каждой пробирке до 2.5 см \
добавляя соответствующий объем 50 г/дм' раствора три.хлоруксусной кислоты (2,5; 2,25; 2,0; 1.5; 1,0;
0,5 см') и перемешивая. В каждую пробирку добавляют 5 см' 0.5 моль/дм1раствора гидроокиси натрия,
перемешивают, выдерживают 10 мин и добавляют 1,5 см' реактива Фол и на, разведенного дистиллиро­
ванной водой в соотношении 1:2 и перемешивают.
      Через 30 мин измеряют оптическую плотность растворов по отношению к 50 г/см* раствору
трихлоруксусной кислоты на фотоэлектрическом калориметре с применением светофильтра с
Х1и=(600 ± 10) нм в кювете с расстоянием между рабочими гранями 10 мм или на спектрофотометре
при длине волны 600 нм в кювете аналогичного размера.

С. 3 ГОСТ 23231-90

     По полученным средним данным по трем стандартным растворам на миллиметровой бумаге раз­
мером 20x20 см строят градуировочный график. На оси абсцисс откладывают значение массовой доли
фенола (микрограмм в 9 см* окрашенного раствора); на оси ординат — значение соответтлвуюшей
оптической плотности (О). Градуировочный график должен проходить через начало координат. Пример
градуировочного графика приведен в приложении.

                                4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

     4.1. От объединенной пробы, подготовленной к испытанию, берут две навески массой по I г
(результат взвешивания записывают до третьего десятичного знака) и переносят в две пробирки (одна
— контрольная, другая — опытная).
      В пробирки вносят по 10 см' цитратного буфера pH 6.5, тщательно перемешивают стеклянной
палочкой и настаивают в течение 20 мин при комнатной температу ре, периодически перемешивая.
      В контрольную пробирку добаатяют 5 см' 200 г/дм3раствора трихлоруксусной кислоты, переме­
шивают и добаатяют 5 см* 2 г/дм' раствора динатриевой соли фенилфосфориой кислоты, выдерживают
10 мин и фильтруют.
      В опытную пробирку добаатяют 5 см12 г/дм1раствора динатриевой соли фенилфосфориой кисло­
ты и помещают в ультратермостат при температуре (39 ± I) "С на 1 ч, затем добаатяют 5 см* 200 г/дм*
раствора трихлоруксус ной кислоты, выдерживают 10 мин и фильтруют.
     Для проведения цветной реакции из контрольной и опытной пробирок отбирают по 2,5 см3
беэбелкового фильтрата. Цветную реакцию проводят по п. 3.4.
      Массовую долю фенола определяют по градуировочному графику.

                                 5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

     5.1. Массовую долю фенола .V, %, вычисляют по формуле

                                       X - (ml ~ /»2)*20-100
                                               т 2.510е*
где 1Я, — масса фенола в опытной пробирке, найденная по градуировочному графику, мкг;
     тг — масса фенола в контрольной пробирке, найденная по градуировочному графику, мкг;
    т — масса анализируемой пробы, г;
   10ь — коэффициент пересчета в граммы;
    20 — разведение, см1;
   2.5 —объем фильтрата, отобранный для цветной реакции, см*.
      Вычисление проводят до четвертого десятичного знака.
      5.2. За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух
параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми при Р = 0,95 не должно превы­
шать 10 % по отношению к среднеарифметическому.
      Окончательный результат определяют до третьего десятичного знака.
      5.3. Допускаемое расхождение между результатами испытаний, проведенных в двух разных лабо­
раториях, при Р = 0,95 не должно превышать 25 % по отношению к среднеарифметическому значе­
нию.
      5.4. Значение среднего квадратического отклонения случайной составляющей погрешности изме­
рений массовой доли фенола одной и той же пробы в разных лабораториях при допускаемых методи­
кой изменениях влияющих факторов составляет 0,0002 X .