ГОСТ 10444.8-88

Межгосударственный стандарт

Продукты пищевые. Метод определения Bacillus cereus

Food products. Method for determination of Bacillus cereus

Редакционная карточка ГОСТНОРМ. Полный текст публикуется только при подтверждённом праве использования. Метаданные сверяются по нескольким источникам.

Область применения

Область применения пока не подтверждена.

Страница 1

ГОС Т 1 0 4 4 4 . 8 - 8 8


                             М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й            С Т А Н Д А Р Т




                                         ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

                                             МЕТОД ОПР ЕД ЕЛ Е Н И Я
                                               BACILLUS CER E US




                                                  Издание официальное




                                                        С 1Ш Щ *рт^ О | И
                                                              2010




методы оценки недвижимости

Страница 2

УДК 6 6 3 /.6 6 4 :5 4 3 .9 :0 0 6 .3 5 4 Группа 1109

М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й С Т А Н Д А Р Т

ПРОДУКТЫ П И Щ ЕВЫ Е ГОСТ
Метод определения 10444.8-88
Bacillus ccrcus

Food products. Method for determination o f Bacillus ccrcus

МКС 07.100.30
ОКСТУ 9109

Дата введения 01.01.90

Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает метод определения
Bacillus cereus, в том числе близких к нему видов В. aruhracis. В. thuringiensis, В. cereus var. mycoides.
Метод основа)! на выделении В. cereus из колонии, полученных при поверхностном посеве
продукта, его разведения или культуральной жидкости на селективные среды. Принадлежность выде
ленных колоний к В. cereus определяют по морфологическим и биохимическим свойствах!. В зависимо
сти от требований нормативного документа подсчитывают количество или учитывают присутствие
(отсутствие) В. cereus в исследуемом продукте.
Метод предназначен для:
установления соответствия микробиологических показателей качества пищевого продукта требо
ваниям нормативного документа:
исследования продукта по санитарно-эпидемиологическим показаниям;
анализа микрофлоры посевов (культуральной жидкости), в которых обнаружены мезофильные
факультативно-анаэробные микроорганизмы, при необходимости подтверждения присутствия в
посевах В. cereus.

1. О ТБО Р И ПОДГОТОВКА ПРОБ

1.1. Отбор проб пищевых продуктов по ГОСТ 26668, ГОСТ 26809.
1.2. Подготовка проб пищевых продуктов к анализу — по ГОСТ 26669.
Консервы проверяют на герметичность по ГО С Т 8756.18.
Полные консервы, нормальные по внешнему виду, перед испытанием термостатнруют при
30—3 7 'С в таре вместимостью до 1 д м ' включительно не менее 5 сут, в rape вместимостью свыше
1 дм1 - не менее 7 сут.
Пищевые продукты, в которых нормируется допустимое количество В. cereus, термоетатировамню
не подлежат.
Масса (объем) навески, предназначенной для пригото&зения гомогената продукта или исходного
разведения. — не менее (10,0±0,1) г (см3).
Исходные разведения продуктов, с массовой долей NaCI более 5 %, готовят с использованием
пептониой воды: исходные разведения мясных, молочных продуктов и молока готовят с использова
нием физиологического раствора. Для приготовления последующих десятикратных разведений исполь
зуют пептон но-солевой раствор. Пептонную воду и пептон но-солевой раствор готовят по ГОСТ 26669.
физиологический раствор - по ГОСТ 10444.1.
Из пробы пищевого продукта, в котором нормируется количество В. cereus, ш и его исходного
разведения готовят ряд разведений в соответствии с допустимым количеством В. cereus. указанном в
нормативно-технической документации на конкретный вид пищевого продукта. Культуральную жид
кость разводят так, чтобы получить при высеве раздельные колонии.

Издание официальное Iкреоечатка воспрещена
★
£ ' Издательство стандартов. 1988
€> СТАНДАРТИНФОРМ, 2010

266

Страница 3

ГОСТ 1 0 4 4 4 .8 -8 8 С. 2

                         2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

     2.1. Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по ГОСТ 10444.1,
а также аппаратуру, материалы и реактивы, указанные ниже:
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*.
с наибольшим пределом взвешивания до 200 г и поверочной ценой деления не более 2 мг (для
взвешивания реактивов);
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*,
с наибольшим пределом взвешивания до 200 г и поверочной ценой деления не более 20 мг (для
взвешивания продукта);
     микроскоп световой биологический с приспособлением для фазовоконтрастного мнкроскопиро-
вания:
     стекла предметные по ГОСТ 9284;
     стекла покровные по ГОСТ 6672.
     петлю бактериологическую;
     термостат с диапазоном рабочих температу р от 28 до 55 *С. позволяющий поддерживать заданную
температуру с погрешностью ±1 *С;
     шпатели стеклянные;
     калия гидроокись по ГОСТ 24363;
     креатин;
     полимиксин В сульфат во флаконах по 25 мг (250000 ЕД) и по 50 мг (500000 ЕД);
     полимиксин М сульфат во флаконах по 500000 ЕД;
     кислоту 5-амино-2-нафтален сульфоновую;
     кислоту сульфаниловую;
     феноловый красный, индикатор;
     цинк - порошок по ГОСТ 3640.

                                3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

      3.1. Приготовление растворов
      3.1.1. Раствор массовой концентрацией пироокиси калия 400 г/дм'; 40 г гидроокиси калия
переносят, смывая дистиллированной водой, в мерную посуду вместимостью 100 см\ доводят объем
дистиллированной водой до метки.
      Применяют для постановки реакции на образование ацетилметилкарбинола.
      3.1.2. Раствор массовой концентрации гидроокиси натрия 4 г/дм': 0.4 г гидроокиси натрия
переносят, смывая дистиллированной водой, в мерную посуду вместимостью 100 см ', доводят объем
дистиллированной водой до метки.
      Применяют для приготовления раствора индикатора фенолового красного.
      3.1.3. Раствор полимиксин В сульфата или полимиксин М сульфата: непосредственно перед ис
пользованием во флакон со стерильным полимиксин сульфатом 250000 ЕД (для инъекций) внести
2,5 см3 стерильной дистиллированной воды (на 500000 ЕД вносят 5 с м ' воды).
      Применяют для приготовления селективных сред.
      3.1.4. Раствор 5-амммо-2-нафталеп сульфоновой кислоты: 0,1 г 5-амино-2-нафтален сульфоновой
кислоты переносят, смывая раствором уксусной кислоты с объемной долей уксусной кислоты
15 %, в мерную посуду вместимостью 100 с м ’ и доводят этой же кислотой объем до метки.
      Раствор фильтруют через бумажный фильтр и хранят при температуре (4±2) *С в хорошо закупо
ренных сосудах из темного стекла не более 3 мес.
      Применяют для приготовления индикатора при определении иитратредуцируюших свойств.
      3.1.5. Раствор массовой концентрации сульфаниловой кислоты 4 г/дм': 0.4 г сульфаниловой
кислоты переносят, смывая раствором уксусной кислоты с объемной долей уксусной кислоты 15 96, в
мерную посуду вместимостью 100 см '.
      Объем доводят до метки тем же раствором уксусной кислоты. Раствор фильтруют через бумаж
ный фильтр и храпят при температуре (4± 2) *С в хорошо закупоренных сосудах из темного стекла не
более 2 мес.
      Применяют для приготоатения индикатора при определении иитратредуцирующих свойств.

     * С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001. На территории Российской Федерации действует
ГОСТ Р 5 3 2 2 8 -2 0 0 8 .
                                                 267

Страница 4

С. 3 ГОСТ 10 4 4 4 .8 -8 8

3.1.6. Раствор массовой концентрации сульфаниловой кислоты 8 г/дм’: 0.8 г сульфаниловой
кислоты переносят, смывая раствором уксусной кислоты с объемной долей уксусной кислоты
30 %, в мерную посуду вместимостью 100 см '. Объем доводят до метки тем же раствором уксусной
кислоты. Раствор фильтруют через бумажный фильтр и хранят при температуре (4±2) *С в хорошо
закупоренных сосудах из темного стекла не более 2 мес.
Применяют в качестве индикатора при определении нитратредуцируюших свойств.
3.1.7. Раствор массовой концентрации 1-нафтола 5 г/дм3: 0.5 г 1-нафтола переносят, смывая
раствором уксусной кислоты с объемной долей уксусной кислоты 30 %, в мерную посуду
вместимостью 100 см '. Объем доводят до метки тем же раствором уксусной кислоты.
Применяют в качестве индикатора при определении нитратредуцируюших свойств.
3.1.8. Растворы с объемной долей уксусной кислоты 15 и 30 %: 15 или 30 см3 ледяной уксусной
кислоты вносят в мерную посуду вместимостью 100 см\ Объем доводят до метки дистиллированной
водой.
Применяют .тля приготовления индикатора при определении нитратредуцируюших свойств.
3 .1.9. Раствор индикатора фенолового красного: 1,25 г фенолового красного растирают в ступке с
40 см 1 раствора гидроокиси натрия, как указано в п. 3.1.2, до полного растворения. Добавляют 460 см 1
стерильной дистиллированной волы. Раствор хранят в сосуде из темного стекла при комнатной темпе
ратуре не более 3 мес.
Применяют для приготовления агара желточного с полнмиксин В или полимиксин М
сульфатом.
3.1.10. Эмульсию яично-желточную готовят по ГОСТ 10444.7.
3.2. Приготовление питательных сред
3.2.1. Селективный агар для выделения и идентификации, выпускаемый Дагестанским НИИ
питательных сред.
Состав среды на 1 дм 5, г:
ферментативный гидролизат кормовых дрожжей 12,0
С-а-децнтин или яичное масло 1,0
натрий хлористый 3,0
натрий лимоннокислый трехзамешенный 5,0
литий сернокислый 5,0
маннит 5,0
бромтиматовый синий 0,04
агар микробиологический 10,0.
4,0 г сухого порошка готовой среды размешать в колбе со 100 см 3 дистиллированной воды. Колбу
закрыть рыхлой ватной пробкой, нагреть на слабом огне до кипения и кипятить 2 —3 мин. Раствор
профильтровать через ватный фильтр, фильтрат разлить по колбам. Стерилизовать 20 мин при темпе
ратуре (121 + 1) *С. pH среды после стерилизации 7,4±0,1.
Применяют в качестве селективной среды.
3.2.2. Лецитин-агар для выделения В. cereus из консервированных продуктов, выпускаемый Да
гестанским НИИ питательных сред.
Состав среды на I дм\ г:
ферментативный гидролизат кормовых дрожжей 15.0
i - a -дсцитнн или яичное масло 1.0
натрии хлористый 3.0
бром in матовый синий 0,04
агар микробиологический 10,0.
2,8 г сухого порошка готовой среды размешать в колбе в 100 см 5дистиллированной воды; колбу
закрыть рыхлой ватной пробкой, нагреть на слабом огне до кипения и кипятить 2—3 мин. Профиль
тровать через ватный фильтр. Фильтрат разлить по колбам и стерилизовать 20 мин при температуре
(121+1) *С.
Охлажденную до 4 5 - 5 0 *С среду разлить в чашки Петри. После застывания агара чашки
подсушить в термостате 40—60 мин. Цвет готовой среды - салатный, pH среды после стерилизации
7.4±0,2.
Применяют в качестве селективной среды для выделения В. cereus из консервированных
продуктов.

268

Показаны первые 4 из 8

История статуса

Подтверждённых событий пока нет.