ГОСТ 10444.12-88

ГОСТ 10444.12-88


                            М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы Й        С Т А Н Д А Р Т




                                        ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ
                            МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДРОЖЖЕЙ И ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ



                                                 Издание официальное




                                                       С1ШЩ*рт^О|И
                                                            2010




инженерное проектирование

УДК 664:543.06:006.354                                                                          Группа 1109

М   Е     Ж   Г   О   С   У   Д   А    Р   С   Т   В   Е   Н   Н   Ы   Й        С Т А Н Д А Р Т


                          ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ

                Метод определения дрожжей и плесневых грибов
                                                                                           ГОСТ
                                  Food products.                                      10444.12-88
                   Method for determination of yeast and mould

МКС 07.100.30
ОКСТУ 9109

                                                                                     Дата введения 01.01.90


     Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает метод определения
в них дрожжей и плесневых грибов.
     Метод основан на высеве продукта или гомогената продукта и (или) их разведений в питатель­
ные среды, определении принадлежности выделенных микроорганизмов к плесневым грибам и дрож­
жам по характерному росту на питательных средах и по морфологии клеток.
     Допускается использование хромогенных сред для предварительного выявления дрожжей И плес­
невых грибов в масложировой продукции.
     Метод предназначен для:
     установления соответствия микробиологических показателей качества пищевого продукта требо­
ваниям нормативно-технической документации;
     установления промышленной стерильности консервов;
     выяснения причин возникновения дефектов продуктов.
     (Поправка)*.

                                      I. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ

      1.1. Отбор проб пищевых продуктов по ГОСТ 26668. ГОСТ 26809 и ГОСТ 9225**.
      1.2. Подготовка проб пищевых продуктов к испытанию по ГОСТ 26669. ГОСТ 9225.
      Консервы проверяют на герметичность по ГОСТ 8756.18.
      Полные консервы, нормальные по внешнему виду, перед испытанием термостатируют при
30 — 37 “С в таре вместимостью до 1дм' включительно не меиее5сут, в таре вместимостью свыше
I дм3 - не менее 7 сут.
      Пищевые продукты, в которых нормируется допустимое количество дрожжей и плесневых гри­
бов. термостатированию не подлежат.
      Масса (объем) навески, предназначенной для приготовления гомогената продукта или исходного
разведения - не менее (10,0±0.1) г (см5).
      Исходные разведения продуктов с массовой долей NaCI более 5% готовят с использованием
пептонной воды; исходные разведения мясных продуктов готовят с использованием физиологического
раствора. Для приготовления последующих десятикратных разведений используют пептонно-солевой
раствор. Пептонную воду и пептонно-солевой раствор готовят по ГОСТ 26669. физиологический
раствор - по ГОСТ 10444.1.
      Из пробы пищевого продукта, в котором нормируется количество дрожжей и (или) плесневых
грибов, или из исходного разведения пищевого продукта готовят ряд разведений в соответствии с
допустимым количеством дрожжей и (или) плесневых грибов, указанным в нормативно-технической
документации на конкретный вид пищевого продукта.
         * Действует только на территории Российской Федерации.
        ** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53430—2009.
Издание официальное                                                                  Перепечатка воспрещена
         ★
                                                                           © Издательство стандартов. 1988
                                                                            © СТАНДАРТИНФОРМ, 2010
                                                       297

С. 2 ГОСТ 10444.12-88

                          2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ

     2.1.      Для проведения испытаний применяют аппаратуру, материалы, реактивы по ГОСТ 10444.1.
а также аппаратуру, материалы и реактивы, указанные ниже:
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*.
с наибольшим пределом взвешивания до 200 г и поверочной ценой деления не более 2 мг (для
взвешивания реактивов);
     весы лабораторные общего назначения с метрологическими характеристиками по ГОСТ 24104*.
с наибольшим пределом взвешивания до 200 г и поверочной ценой деления не более 20 мг (для
взвешивания продукта);
     термостат, позволяющий поддерживать температуру (24±1) "С;
     микроскоп световой биологический или других аналогичных марок;
     масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739;
     стекла предметные по ГОСТ 9284;
     стекла покровные по ГОСТ 6672,
     вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
     агар сывороточный БФ;
     бромфеноловый синий, водорастворимый, индикатор;
     гентамицина сульфат во флаконах по 0.08 г или в ампулах по 1 или 2 см’ водный раствор
массовой долей 4%;
     окситетраииклина дегидрат в таблетках по 0,25 г (250000 ЕД);
     неомнцниа сульфат во флаконах по 0,5 г (50000 ЕД) или в таблетках по 0,10 и 0,25 г;
     препараты группы левомицетина:
     левомицетин сукцинат растворимый (для инъекций) во флаконах по 0.5 и 1,0 г:
     левомицетин в таблетках по 0,25 и 0,5 г;
     препараты группы пенициллина;
     бензилпенициллииа натриевая соль или калиевая соль во флаконах по 250000. 500000 или
1000000 ЕД;
     бензилпенициллииа новокаиновая соль во флаконах по 300000, 600000 или 1200000 ЕД;
     новоцин во флаконах по 400000. 800000. 1200000 ЕД;
     препараты группы стрептомицина:
     стрептомицина сульфат во флаконах по 0.25 г (250000 ЕД). 0.5 г (500000 ЕД), 1 г (1000000 ЕД);
     стрептосульмицина сульфат во флаконах по 0,25, 0,5 или 1 г;
     стрептомицина-хлоркальниевый коматекс во флаконах по 0,1, 0,2. 0,5 г;
     днгидрострептомицина сульфат во флаконах по 0.25, 0,5 или 1 г;
     дигидрострептомицина пантотенат во флаконах по 0.25 г (250000 ЕД), 0.5 г (500000 ЕД). 1 г
(1000000 ЕД).

                                3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

      3.1. Приготовление растворов ангнбиотиков
      3.1.1. Растворы антибиотиков готовят непосредственно перед использованием. Антибиотики
в таблетках используют для приготоатения растворов при отсутствии антибиотиков для инъекций. При
приготовлении растворов антибиотиков из таблеток не допускается проводить взвешивание, так как в
таблетках может содержаться разное количество наполнителя. В этом случае приготовление растворов
основано на использовании целых таблеток с точно известным содержанием антибиотиков.
      Допускается при анализе пищевых продуктов (кроме консервов) проводить приготовление
растворов антибиотиков из таблеток с соблюдением правил асептики на стерильной дистиллированной
воде.
      3.1.2. Раствор массовой концентрацией гентамицина сульфата К) г/дм3:
      во флакон с 80 мг гентамицина сульфата (для инъекций) вносят 8 см' стерильной дистиллиро­
ванной воды, содержимое флакона растворяют. Раствор добавляют к готовой основе среды.
      При использовании раствора гентамицина сульфата в ампулах исходят из того, что ампула
с 1 см ’ раствора содержит 40 мг гентамицина, а с 2 см3 — 80 мг.

     * С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104—2001. На территории Российской Федерации дейст вует
ГОСТ Р 53228-2008.
                                                  298

ГОСТ 10444.12—88 С. 3

      3.1.3. Раствор массовой концентрацией левомицетина сукцината растворимого 50 и 100 г/дм1:
во флакон с 0.5 или 1.0 г левомицетина (для инъекции) вносят 10 см ’ стерильной дистиллированной
полы, содержимое флакона растворяют. Раствор добавляют к готовой основе среды.
      При использовании левомицетина в таблетках по 0,25 и 0.5 г готовят растворы массовой концен­
трацией левомицетина 5 г/дм3. Для этого 2 таблетки по 0,25 г или I таблетку по 0,5 г растирают в
ступке, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см5, смывая дистиллированной водой, стерили­
зуют методом мембранной фильтрации по ГОСТ 26670. Допускается раствор левомицетина стерилизо­
вать вместе с ос копой среды.
      3.1.4. Раствор массовой концентрацией окситетрациклина дигидрата I г/дм': 1 таблетку по
0.25 г растирают в ступке, переносят в мерную колбу вместимостью 250 с м \ смывая дистиллирован­
ной водой. Раствор доводят до метки дистиллированной водой, стерилизуют методом мембранной
фильтрации по ГОСТ 26670.
      3.1.5. Растворы препаратов группы пенициллина готовят из расчета содержания антибиотика
50000 или 100000 ЕД в I см 5 раствора:
      во флаконы с 250000, 300000, 500000 ЕД вносят соответственно 5, 6. 10 см3 стерильной дистил­
лированной воды, содержимое флакона растворяют, получая растворы, содержащие в 1 см3 50000 ЕД
антибиотика;
      во флаконы с 1000000, 1200000 ЕД вносят соответственно 10, 12 см ’ стерильной дистиллирован­
ной воды, получая растворы, содержащие в I см ' 100000 ЕД антибиотика.
      3.1.6. Растворы препаратов группы стрептомицина массовой концентрацией антибиотика
100 г/дм3: во флаконы с 0,10; 0.25; 0.50 и 1 г антибиотика вносят соответственно I; 2,5; 5; 10 см’
стерильной дистиллированной воды, содержимое флакона растворяют.
      3.1.7. Раствор массовой концентрацией неомицина сульфата 50 г/дм5: во флакон с 0,5 г неомини-
на сульфата (для инъекций) вносят 10 см' стерильной дистиллированной воды.
      При приготовлении раствора массовой концентрацией неомицина сульфата 10 г/дм3 из таблеток:
2 таблетки по 0,25 г или 5 таблеток по 0,1 г растирают в ступке, порошок переносят в мерную колбу на
50 см3, смывая дистиллированной водой, объем доводят до метки. Раствор стерилизуют методом мем­
бранной фильтрации по ГОСТ 26670.
      3.2. Приготовление питательных сред
      3.2.1. Питательные среды с антибиотиками готовят непосредственно перед использованием.
      При приготовлении сред с антибиотиками вначале готовят основы сред. К расплавленной и
охлажденной до температуры (46±1) ‘С основе среды добавляют растворы антибиотиков.
      3.2.2. Для приготовления питательных сред с антибиотиками используют следующие основы.
      3.2.2.1. Основу среды (среду Сабуро) готовят следующим образом: 40.0 глюкозы. 10.0 г пептона.
18,0 г агара добавляют к 1дм3дистиллированной воды. Смесь подогревают, периодически помешивая,
до расплавления составных частей, охлаждают до 45—55 *С. устанавливают pH таким образом, чтобы
после стерилизации он составлял при 25 "С 6.5±0.1, разливают в мерные колбы и стерилизуют 15 мин
при температуре (121±I) ‘С. Основу среды хранят при температу ре (4±2) *С не более 14 сут.
      Основу среды (среду Сабуро) допускается использовать без добавления антибиотиков при анали­
зе консервов на промышленную стерильность.
      3.2.2.2. Основ;» среды из сухого сывороточного агара БФ.
      В состав среды входят, г:
           сухая гилрсхз шонаиная с м е с ь .....................................................................................37,0
           каш й фосфорнокислый однозамешенный........................................................... 0,8
           натрий (|юсфорнокис.1 ый однозамешенный.........................................................0,04
           бромфеназоный синий, нодорасгворимый. индикатор...........................................0.16
           агар.............................................. ................................................................................. 22,0.
      60.0 г сухого сывороточного агара БФ прибавляют к 1 дм3 дистиллированной воды, нагревают
до полного растворения (при наличии осадка фильтруют). Устанавливают pH таким образом, чтобы
после стерилизации при 25 'С он составлял 4,2±0,2. Определенный объем среды разливают в колбы и
стерилизуют при температуре (121 ±1) *С в течение 15 мин.
      Основу среды используют при анализе молока и молочных продуктов.
      3.2.3. Для определения дрожжей и плесневых грибов используют среды, указанные в
пп. 3.2.3.I—3.2.3.7.
      3.2.3.1.       Среда агаризованная с левомнцетнном: к I дм3 основы добавляют 2 см5 раствора лсвомм-
цетина сукцината растворимого (для инъекций) массовой концентрацией 50 г/дм' или 1 см3 раствора
                                                                                 299